| 中文名称: | 纤维素酶检测试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | CL Assay Kit | ||||
| 别名: | 纤维素酶检测试剂盒 CL Assay Kit | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
纤维素酶(β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶，Cellulase 简称 CES) 是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称，它不是单体酶，而是起协同作用的多组分酶系，是一种复合酶，主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成，还有很高活力的木聚糖酶。在分解纤维素时起生物催化作用，是可以将纤维素分解成寡糖或单糖的蛋白质。
纤维素酶 Cellulase 广泛存在于自然界生物体中。细菌、真菌、动物体内等都能产生纤维素酶。一般用于生产的纤维素酶来自于真菌，比较典型的有木霉属(Trichoderma)、曲霉属（Aspergillus）和青霉属(Penicillium）。微生物纤维素酶在转化不溶性纤维素成葡萄糖以及在果蔬汁中破坏细胞壁从而提高果汁得率等方面具有非常重要的意义。纤维素酶在食品行业和环境行业均有广泛应用。在进行酒精发酵时，纤维素酶的添加可以增加原料的利用率，并对酒质有所提升。 纤维素酶检测试剂盒(DNS 微板法)检测原理是用羧甲基纤维素钠盐(CMC) 作底物，经纤维素酶水解后生成还原糖(葡萄糖)，还原糖在碱性加热条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸(DNS)被还原为棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈正比，在 540nm 处用酶标仪测定棕红色物质的吸光度，即可求得还原糖的含量，进而求得纤维素酶活的大小。
纤维素酶 Cellulase 广泛存在于自然界生物体中。细菌、真菌、动物体内等都能产生纤维素酶。一般用于生产的纤维素酶来自于真菌，比较典型的有木霉属(Trichoderma)、曲霉属（Aspergillus）和青霉属(Penicillium）。微生物纤维素酶在转化不溶性纤维素成葡萄糖以及在果蔬汁中破坏细胞壁从而提高果汁得率等方面具有非常重要的意义。纤维素酶在食品行业和环境行业均有广泛应用。在进行酒精发酵时，纤维素酶的添加可以增加原料的利用率，并对酒质有所提升。 纤维素酶检测试剂盒(DNS 微板法)检测原理是用羧甲基纤维素钠盐(CMC) 作底物，经纤维素酶水解后生成还原糖(葡萄糖)，还原糖在碱性加热条件下被氧化成糖酸，3,5-二硝基水杨酸(DNS)被还原为棕红色的氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与棕红色产物的颜色深浅程度呈正比，在 540nm 处用酶标仪测定棕红色物质的吸光度，即可求得还原糖的含量，进而求得纤维素酶活的大小。
操作步骤：
标准曲线制作：
在室温条件下根据说明书步骤操作，测定葡萄糖标准溶液的浓度依次为100、150、200、250、300μg/ml，采用酶标仪 540nm 测出其相应的吸光度，据此做出如下标准曲线。
曲线图请参考说明书。
采用酶标仪 540nm 测定，“0”号管吸光度为 0.12 左右，呈黄色，100μg/ml 以上呈棕红色并逐渐加深。测定结果显示，当葡萄糖浓度大于 350μg/ml 时，OD值开始偏离，当葡萄糖浓度在 100~300μg/ml 以内比较合适，因此当测定结果明显偏高应稀释后再测。因测定仪器及操作手法等不同，测定结果可有一定偏差。
在室温条件下根据说明书步骤操作，测定葡萄糖标准溶液的浓度依次为100、150、200、250、300μg/ml，采用酶标仪 540nm 测出其相应的吸光度，据此做出如下标准曲线。
曲线图请参考说明书。
采用酶标仪 540nm 测定，“0”号管吸光度为 0.12 左右，呈黄色，100μg/ml 以上呈棕红色并逐渐加深。测定结果显示，当葡萄糖浓度大于 350μg/ml 时，OD值开始偏离，当葡萄糖浓度在 100~300μg/ml 以内比较合适，因此当测定结果明显偏高应稀释后再测。因测定仪器及操作手法等不同，测定结果可有一定偏差。
自备材料：
1、去离子水或蒸馏水
2、电子天平、振荡器、纱布、离心机、离心管或试管
3、三角瓶、容量瓶、水浴锅、培养箱、酶标仪、96 孔板
2、电子天平、振荡器、纱布、离心机、离心管或试管
3、三角瓶、容量瓶、水浴锅、培养箱、酶标仪、96 孔板
组分：
| 组分名称 | PS2035-100T | Storage |
| 试剂(A): Glu 标准(1mg/ml) | 1.8ml | 4℃ |
| 试剂(B): CES Assay buffer | 200ml | RT |
| 试剂(C): CMC Solution | 30ml | RT |
| 试剂(D): DNS 试剂 | 30ml | RT 避光 |
保存条件：
4℃ 避光 12个月
注意事项：
1、Glu 标准应避免反复冻融，以免失效或效率下降。
2、待测酶提取液样品如不能及时测定，应置于-20℃保存，3 天内稳定。
3、如果样品酶活性过高，应用蒸馏水稀释酶提取液后重测，结果乘以稀释倍数。
4、待测样品中不能含有纤维素酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
5、纤维素酶的最适 pH 一般在 4.5~6.5。葡萄糖酸内酯能有效的抑制纤维素酶，重金属离子如铜和汞离子，也能抑制纤维素酶，但是半胱氨酸能消除它们的抑制作用，甚至进一步激活纤维素酶。植物组织中含有天然的纤维素酶抑制剂；它能保护植物免遭霉菌的腐烂作用，这些抑制剂是酚类化合物。如果植物组织中存在着高的氧化酶活力，那么它能将酚类化合物氧化成醌类化合物，后者能抑制纤维素酶。
6、本试剂盒亦适用于其他样品的纤维素酶活性测定，但需有相关资料做为参考依据。
7、CES Assay buffer 如果出现浑浊或絮状物，应弃用。
8、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
10、以上信息仅做参考交流之用。
2、待测酶提取液样品如不能及时测定，应置于-20℃保存，3 天内稳定。
3、如果样品酶活性过高，应用蒸馏水稀释酶提取液后重测，结果乘以稀释倍数。
4、待测样品中不能含有纤维素酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
5、纤维素酶的最适 pH 一般在 4.5~6.5。葡萄糖酸内酯能有效的抑制纤维素酶，重金属离子如铜和汞离子，也能抑制纤维素酶，但是半胱氨酸能消除它们的抑制作用，甚至进一步激活纤维素酶。植物组织中含有天然的纤维素酶抑制剂；它能保护植物免遭霉菌的腐烂作用，这些抑制剂是酚类化合物。如果植物组织中存在着高的氧化酶活力，那么它能将酚类化合物氧化成醌类化合物，后者能抑制纤维素酶。
6、本试剂盒亦适用于其他样品的纤维素酶活性测定，但需有相关资料做为参考依据。
7、CES Assay buffer 如果出现浑浊或絮状物，应弃用。
8、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
9、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
10、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
