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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | 辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | CoQ10 Activity Assay Kit | ||||
| 别名: | 辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒 CoQ10 Activity Assay Kit | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
辅酶Q(Coenzyme Q，CoQ)是一种生物体内广泛存在的脂溶性醌类化合物，故又称泛醌，在体内呼吸链中质子移位及电子传递中起重要作用，是呼吸链中重要的递氢体，它是细胞呼吸和细胞代谢的激活剂，也是重要的抗氧化剂和非特异性免疫增强剂。对多种酶有激活作用。不同生物体来源的辅酶Q其侧链异戊烯单位的数目不同，人类和哺乳动物是10个异戊烯单位，故称辅酶Q10。辅酶Q10是辅酶Q类的重要成员之一，它们与线粒体内膜相结合，广泛参与体内的生物代谢过程。
辅酶Q10不仅能给心脏提供动力，还具有卓越的抗氧化、清除自由基功能，能预防血管壁脂质过氧化，预防动脉粥样硬化，并且无任何毒副作用。具体作用体现在以下四个方面：
①帮助保护心脏 辅酶Q10有助于为心肌提供充足氧气，预防突发性心脏病，尤其在心肌缺氧过程中辅酶Q10发挥关键性改善作用。
②保护皮肤 长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤衰老，减少脸部皱纹。
③抗疲劳 辅酶Q10使细胞保持良好健康的状态，因而机体充满活力，精力旺盛，脑力充沛。它是细胞自身产生的天然抗氧化剂和细胞代谢启动剂，具有保护和恢复生物膜结构的完整性、稳定膜电位作用，是机体的非特异性免疫增强剂，因此显示出极好抗疲劳作用。
④防癌抗癌 研究表明，辅酶Q10有抗肿瘤作用，临床对于晚期转移性癌症有一定疗效。
辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)其检测原理是待测样品在碱性条件下，EC取代了CoQ10上的甲氧基，形成蓝色化合物，通过酶标仪测定620nm处吸光度值，根据标准曲线即可测出辅酶Q10的含量。本产品可用于测定花生、牛肉、沙丁鱼、保健品等食品中的CoQ10的含量。
辅酶Q10不仅能给心脏提供动力，还具有卓越的抗氧化、清除自由基功能，能预防血管壁脂质过氧化，预防动脉粥样硬化，并且无任何毒副作用。具体作用体现在以下四个方面：
①帮助保护心脏 辅酶Q10有助于为心肌提供充足氧气，预防突发性心脏病，尤其在心肌缺氧过程中辅酶Q10发挥关键性改善作用。
②保护皮肤 长期使用辅酶Q10能够有效防止皮肤衰老，减少脸部皱纹。
③抗疲劳 辅酶Q10使细胞保持良好健康的状态，因而机体充满活力，精力旺盛，脑力充沛。它是细胞自身产生的天然抗氧化剂和细胞代谢启动剂，具有保护和恢复生物膜结构的完整性、稳定膜电位作用，是机体的非特异性免疫增强剂，因此显示出极好抗疲劳作用。
④防癌抗癌 研究表明，辅酶Q10有抗肿瘤作用，临床对于晚期转移性癌症有一定疗效。
辅酶Q10(CoQ10)检测试剂盒(比色法)其检测原理是待测样品在碱性条件下，EC取代了CoQ10上的甲氧基，形成蓝色化合物，通过酶标仪测定620nm处吸光度值，根据标准曲线即可测出辅酶Q10的含量。本产品可用于测定花生、牛肉、沙丁鱼、保健品等食品中的CoQ10的含量。
操作步骤：
1、准备样品：
①新鲜动物心脏或肝脏样品：用醇碱皂化法、溶剂皂化法等提取(方法见附二)。
②动物血清样品：0.1ml血清加入0.9ml三氯甲烷，持续摇动30min以上，使CoQ10充分提取出来。如果检测结果较低，可以降低三氯甲烷的加入量。
③细胞样品：取一定数量的细胞加入生理盐水或PBS，用匀浆器匀浆或超声破碎处理，高速离心，留取上清。后续参考血清样品操作。
④保健食品：参考GB/T 22252-2008 《保健食品中辅酶Q10的测定》中样本的提取方法。具体如下：根据试样中CoQ10含量，称取1~5g均匀试样(精确至0.001g)，置于25ml棕色容量瓶中，加正己烷20ml，超声提取20min后，加正己烷至刻度，摇匀，量取1.0ml上述溶液于10ml棕色容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，混匀，0.45μm滤膜过滤，滤液备用。
⑤酵母菌等发酵菌体样品：用醇碱皂化法提取，提取方法参考如下：
将湿菌体移入150ml圆底烧瓶，加入0.7g焦性没食子酸、2.5g氢氧化钾、19ml甲醇和7ml蒸馏水，混匀。90℃水浴锅中回流30min，迅速冷却至室温，倒入分液漏斗中，加入石油醚(正己烷、三氯甲烷或丙酮) 等有机溶剂40ml，剧烈震荡5min，萃取CoQ10，连续萃取2次，合并萃取液，用蒸馏水洗涤至中性，加入5g无水硫酸钠干燥。用旋转蒸发仪50℃浓缩至浓稠液，加入10ml无水乙醇，放入冰箱冷冻析出胆固醇等杂质，过滤，滤液定容至100ml待用。
2、CoQ10加样：按照下表设置空白管、标准管和测定管，溶液应按顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的CoQ10浓度过高，可减少样品用量或用EC buffer稀释后再进行测定。
3、CoQ10测定：混匀，室温避光孵育3~5min，以空白管调零，比色杯光径1cm，分光光度计620nm(600~640nm亦可)处测定标准管或测定管的吸光度。
计算公式:
液体样品辅酶Q10浓度：CoQ10(mg/ml)=A测定/A标准×1
液体样品辅酶Q10含量：CoQ10(mg)= A测定/A标准×1×VT
每100g固体样品辅酶Q10含量：CoQ10(mg)= A测定/A标准×1×VT×100/m
式中：A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
1= CoQ10标准的浓度(mg/ml)
VT=CoQ10提取液的总体积(ml)
m=样品的实际用量(g)
CoQ10的提取方法(供参考）：
方法一：醇碱皂化法
1、皂化液的制备：取猪心残渣，压干称重，按干渣重加300g/L工业焦性没食子酸，搅匀，加醇-碱溶液(干渣重3~3.5倍量乙醇、320g/L氢氧化钠)，加热搅拌回流25~30min，迅速冷却至室温，得皂化液。
2、浓缩液的制备：取皂化液，立即加入其体积1/10量的石油醚或120号汽油提取3~4次，搅拌，分层，得提取液。水洗至近中性，在40℃以下浓缩至原体积的1/10，冷却，-5℃以下静置过夜，过滤，得浓缩液。
3、辅酶Q10精制品的制备：将浓缩液过硅胶柱层析，先后用石油醚、10%乙醚-石油醚洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得黄色油状物。加热无水乙醇溶解，过滤，滤液静置，冷却结晶，真空干燥，得辅酶Q10精制品。
方法二：醇醚混合溶剂提取法
1、辅酶Q10粗制品的制备：取猪心残渣，加1.5倍量的V乙醇：V乙醚=3：1混合溶剂，加热提取3~4次，每次15~20min，冷至室温，过滤，合并提取液。浓缩，加适量水，加石油醚提取，提取液浓缩，浓缩物为黄色油状物，即辅酶Q10粗制品。
2、辅酶Q10成品的制备：取辅酶Q10粗制品，加丙酮溶解，置-10℃以下析出杂质，过滤，滤液蒸去丙酮，加少量石油醚溶解，过硅胶柱层析分离，加无水乙醇结晶，得辅酶Q10成品。
①新鲜动物心脏或肝脏样品：用醇碱皂化法、溶剂皂化法等提取(方法见附二)。
②动物血清样品：0.1ml血清加入0.9ml三氯甲烷，持续摇动30min以上，使CoQ10充分提取出来。如果检测结果较低，可以降低三氯甲烷的加入量。
③细胞样品：取一定数量的细胞加入生理盐水或PBS，用匀浆器匀浆或超声破碎处理，高速离心，留取上清。后续参考血清样品操作。
④保健食品：参考GB/T 22252-2008 《保健食品中辅酶Q10的测定》中样本的提取方法。具体如下：根据试样中CoQ10含量，称取1~5g均匀试样(精确至0.001g)，置于25ml棕色容量瓶中，加正己烷20ml，超声提取20min后，加正己烷至刻度，摇匀，量取1.0ml上述溶液于10ml棕色容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，混匀，0.45μm滤膜过滤，滤液备用。
⑤酵母菌等发酵菌体样品：用醇碱皂化法提取，提取方法参考如下：
将湿菌体移入150ml圆底烧瓶，加入0.7g焦性没食子酸、2.5g氢氧化钾、19ml甲醇和7ml蒸馏水，混匀。90℃水浴锅中回流30min，迅速冷却至室温，倒入分液漏斗中，加入石油醚(正己烷、三氯甲烷或丙酮) 等有机溶剂40ml，剧烈震荡5min，萃取CoQ10，连续萃取2次，合并萃取液，用蒸馏水洗涤至中性，加入5g无水硫酸钠干燥。用旋转蒸发仪50℃浓缩至浓稠液，加入10ml无水乙醇，放入冰箱冷冻析出胆固醇等杂质，过滤，滤液定容至100ml待用。
2、CoQ10加样：按照下表设置空白管、标准管和测定管，溶液应按顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的CoQ10浓度过高，可减少样品用量或用EC buffer稀释后再进行测定。
| 加入物(μl) | 空白孔 | 标准孔 | 待测孔 |
| EC buffer | 2 | 1.75 | 1.75 |
| CoQ10标准(1mg/ml) | - | 0.25 | - |
| 待测样品(提取液) | - | - | 0.25 |
| EC solution | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
| CoQ10 Assay buffer | 0.5 | 0.5 | 0.5 |
计算公式:
液体样品辅酶Q10浓度：CoQ10(mg/ml)=A测定/A标准×1
液体样品辅酶Q10含量：CoQ10(mg)= A测定/A标准×1×VT
每100g固体样品辅酶Q10含量：CoQ10(mg)= A测定/A标准×1×VT×100/m
式中：A测定=测定管的吸光度
A标准=标准管的吸光度
1= CoQ10标准的浓度(mg/ml)
VT=CoQ10提取液的总体积(ml)
m=样品的实际用量(g)
CoQ10的提取方法(供参考）：
方法一：醇碱皂化法
1、皂化液的制备：取猪心残渣，压干称重，按干渣重加300g/L工业焦性没食子酸，搅匀，加醇-碱溶液(干渣重3~3.5倍量乙醇、320g/L氢氧化钠)，加热搅拌回流25~30min，迅速冷却至室温，得皂化液。
2、浓缩液的制备：取皂化液，立即加入其体积1/10量的石油醚或120号汽油提取3~4次，搅拌，分层，得提取液。水洗至近中性，在40℃以下浓缩至原体积的1/10，冷却，-5℃以下静置过夜，过滤，得浓缩液。
3、辅酶Q10精制品的制备：将浓缩液过硅胶柱层析，先后用石油醚、10%乙醚-石油醚洗脱，收集洗脱液，回收溶剂，得黄色油状物。加热无水乙醇溶解，过滤，滤液静置，冷却结晶，真空干燥，得辅酶Q10精制品。
方法二：醇醚混合溶剂提取法
1、辅酶Q10粗制品的制备：取猪心残渣，加1.5倍量的V乙醇：V乙醚=3：1混合溶剂，加热提取3~4次，每次15~20min，冷至室温，过滤，合并提取液。浓缩，加适量水，加石油醚提取，提取液浓缩，浓缩物为黄色油状物，即辅酶Q10粗制品。
2、辅酶Q10成品的制备：取辅酶Q10粗制品，加丙酮溶解，置-10℃以下析出杂质，过滤，滤液蒸去丙酮，加少量石油醚溶解，过硅胶柱层析分离，加无水乙醇结晶，得辅酶Q10成品。
自备材料：
1、无水乙醇、蒸馏水、三氯甲烷或正己烷等提取试剂
2、电子天平、烧瓶、水浴锅、分光光度计、比色杯、超声波
2、电子天平、烧瓶、水浴锅、分光光度计、比色杯、超声波
组分：
| 组分名称 | PS1925-50T | Storage |
| 试剂(A): CoQ10标准(1mg/ml) | 1ml | -20℃ 避光 |
| 试剂(B): EC solution | 25ml | RT 避光 |
| 试剂(C): EC buffer | 100ml | RT |
| 试剂(D): CoQ10 Assay buffer | 25ml | 4℃ |
保存条件：
—20℃ 避光 6个月
注意事项：
1、CoQ10标准(1mg/ml)、CoQ10 Assay buffer如果出现浑浊可超声波助溶后再进行标准浓度稀释。
2、待测样品中不能含有CoQ10抑制剂，同时需避免反复冻融。
3、在皂化过程中，震荡不要剧烈，以免形成乳化层。
4、EC solution有一定毒性，请小心操作。
5、检测标准品时，按步骤2表格混合后，2min内即出现明显的蓝色变化并逐渐加深，20min后蓝色开始变浅，30min后逐渐呈黄绿色。620nm检测数据表明，随着时间的延长，OD值在不断的下降，对应的颜色也已发生变化，特别是高浓度的标准品变化比较大。因此，应在出现最深的蓝色结果且稳定的时间段内尽快检测，而且建议每次同时检测标准品(0.5~1mg/ml)和样品。如有条件，最好用酶标仪检测，减少因检测时间导致的误差。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、以上信息仅做参考交流之用。
2、待测样品中不能含有CoQ10抑制剂，同时需避免反复冻融。
3、在皂化过程中，震荡不要剧烈，以免形成乳化层。
4、EC solution有一定毒性，请小心操作。
5、检测标准品时，按步骤2表格混合后，2min内即出现明显的蓝色变化并逐渐加深，20min后蓝色开始变浅，30min后逐渐呈黄绿色。620nm检测数据表明，随着时间的延长，OD值在不断的下降，对应的颜色也已发生变化，特别是高浓度的标准品变化比较大。因此，应在出现最深的蓝色结果且稳定的时间段内尽快检测，而且建议每次同时检测标准品(0.5~1mg/ml)和样品。如有条件，最好用酶标仪检测，减少因检测时间导致的误差。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
(2).jpg)
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
