( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | SYBR14绿色荧光核酸染料 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | SYBR14 Green Fluorescent Nucleic Acid Stain | ||||
| 别名: | 精子活性检测染料 | ||||
| CAS No: | |||||
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Em:520
推荐孔板:FITC滤波片;黑色透明底板
本产品通常用于检测精子的活性。 精液中活精子的比例可通过使用SYBR-14和碘化丙啶(PI)的双重染色技术进行评估。 SYBR14是一种核酸染料,与DNA结合后可在488 nm处大吸收并在518 nm处发射。 它使活精子的细胞核染成绿色。 相反,PI仅染色失去其膜完整性的非活动性精子。 可以通过先用SYBR-14和PI染色,然后通过流式细胞仪评估染色吸收来确定活精和死精的比例。 通过使用SYBR-14和PI双重染色,可以很容易地确定哺乳动物精液中活的和死的精子的比例,并可以通过流式细胞术进行定量。
1:将5mM的母液用适合的缓冲液稀释至10-20μM,现配现用。浓度针对不同的细胞类型和条件进行优化。
二:操作步骤
以下方案作为开发您自己染色方案的基本指南。最佳染色所需的试剂浓度可能因细胞(即精子细胞)密度和样品中的其他材料而异。
1:将样品(例如精液样品)用含有牛血清白蛋白的 HEPES 缓冲盐溶液(10 mM HEPES,150 mM NaCl,10% BSA,pH 7.4)稀释。
2:向1mL稀释后的样品中加入 5μL 稀释后的工作液。
3:37℃孵育样品 5-10 分钟。
4:使用带有 FITC 滤光片组的荧光显微镜观察样品。或者,可以使用530/30nm 滤光片通过流式细胞术分析样品。
2:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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