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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | 钙盐染色液 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Calcium salt staining solution | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
钙在人体内大量存在，构成骨骼作为支持人体的支架，在分泌、运送、肌肉收缩、神经传导等也起重要作用，钙在机体内以两种形式存在，一种是离子钙，存在血液循环内，即所谓血钙；另一种是结合钙，和蛋白、碳酸或磷酸结合而沉着在组织内，除骨骼和牙齿外正常时钙渗透在所有组织和细胞中，一般不以固体状态出现在组织内，但在某些情况下钙析出成固体并沉着于组织内，则为病理性钙盐沉着，沉着的钙盐主要是磷酸钙，其次为碳酸钙。钙盐通常是单折射的，但草酸钙是双折射的，当使用HE染色时钙一般呈紫蓝色，许多染料可以于钙形成螯合物，包括茜素红S、红紫素、核固红等，茜素红S属一种蒽醌类衍生物，是茜素磺酸钠盐，它能与碳酸钙或磷酸钙中的钙盐螯合形成橙红色复合物。
钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法，钙盐染色液(Von Kossa银法)又称冯库萨染色液，属金属置换法，其原理在于Von Kossa银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时，钙被银置换，银盐在光的作用下被还原为黑色金属银，适用于大量样本的钙盐组织染色。
钙盐染色常用方法有硝酸银法和茜素红S法，钙盐染色液(Von Kossa银法)又称冯库萨染色液，属金属置换法，其原理在于Von Kossa银溶液作用于含有不溶性钙盐的切片时，钙被银置换，银盐在光的作用下被还原为黑色金属银，适用于大量样本的钙盐组织染色。
操作步骤：
一、常规染色
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚度 3-5μm,常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水,蒸馏水洗。
3、切片加入Von Kossa银溶液,强光照射 15-60min(见注意事项 2),蒸馏水洗 1min。
4、加入海波溶液处理2min,HE 染色液或 Van Gieson复染细胞核1min。
5、常规脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
二、不溶性钙染色
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水,注意在95%乙醇中脱水应充分。
2、塑料包埋,室温过夜,37℃烤箱中聚合2-4天,-20℃冰箱冷却15-20min。
3、切片厚度3-5μm,未脱钙骨切片脱塑至水,蒸馏水洗。
4、切片加入Von Kossa银溶液,强光照射 10-60min(见注意事项2),蒸馏水洗。
5、加入海波溶液处理2min,HE染色液、中性红或Van Gieson复染细胞核1min。
6、常规脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
染色结果：
阴性对照：
如有必要,可做阴性对照。取另外一张连续切片脱蜡(脱塑)至水,置于 Von Kossa对照液处理10-20min,蒸馏水冲洗,与试验片一同入Von Kossa 银溶液,余下步骤同上,结果应为阴性。
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水包埋。
2、切片厚度 3-5μm,常规二甲苯或脱蜡透明液脱蜡至水,蒸馏水洗。
3、切片加入Von Kossa银溶液,强光照射 15-60min(见注意事项 2),蒸馏水洗 1min。
4、加入海波溶液处理2min,HE 染色液或 Van Gieson复染细胞核1min。
5、常规脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
二、不溶性钙染色
1、组织固定于10%中性福尔马林固定液,常规脱水,注意在95%乙醇中脱水应充分。
2、塑料包埋,室温过夜,37℃烤箱中聚合2-4天,-20℃冰箱冷却15-20min。
3、切片厚度3-5μm,未脱钙骨切片脱塑至水,蒸馏水洗。
4、切片加入Von Kossa银溶液,强光照射 10-60min(见注意事项2),蒸馏水洗。
5、加入海波溶液处理2min,HE染色液、中性红或Van Gieson复染细胞核1min。
6、常规脱水,二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封固。
染色结果：
| 钙盐、尿酸盐 | 黑褐色至深黑色 |
| 细胞核 | 根据复染液不同而不同 |
阴性对照：
如有必要,可做阴性对照。取另外一张连续切片脱蜡(脱塑)至水,置于 Von Kossa对照液处理10-20min,蒸馏水冲洗,与试验片一同入Von Kossa 银溶液,余下步骤同上,结果应为阴性。
自备材料：
1、10%中性福尔马林固定液、系列乙醇、蒸馏水、环保脱蜡透明液、中性树胶
2、HE 染色液或 Van Gieson 染色液、碳酸锂水溶液
2、HE 染色液或 Van Gieson 染色液、碳酸锂水溶液
组分：
| 组分名称 | PS2063-2X50ml | Storage |
| 试剂(A): Von Kossa银溶液 | 50ml | 4℃ 避光 |
| 试剂(B):海波溶液 | 50ml | RT |
| 试剂(C): Von Kossa对照液 | 10ml | 4℃ |
保存条件：
2-8°C 避光 12个月
注意事项：
1、钙盐组织固定以中性福尔马林为佳,不宜采用 Bouin液等酸性固定液和甲醛钙固定液;如用常规的10%福尔马林固定,固定4-6h后即可进行脱水包埋,以防止固定液酸化导致钙盐溶解。
2、作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间;如暴露于强光下15min已经足够;如暴露于紫外灯下 10min 即可;如暴露于一般光线下,宜适当延长曝光时间。
3、如果钙盐染色过深,可用蒸馏水适当稀释Von Kossa 银溶液或减少光照时间或光照强度;如果钙盐染色较浅,应增加 Von Kossa 银溶液用量并增加光照时间和光照强度。
4、该染色法可以区分尿酸盐和钙盐,其原理在于钙盐不溶解于碳酸锂溶液,尿酸盐则易溶。因此,切片经碳酸锂处理后入Von Kossa 银溶液并置于强光下照射,呈阴性者为尿酸盐。
5、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、以上信息仅做参考交流之用。
2、作用时间取决于阳光照射时光的强度和时间;如暴露于强光下15min已经足够;如暴露于紫外灯下 10min 即可;如暴露于一般光线下,宜适当延长曝光时间。
3、如果钙盐染色过深,可用蒸馏水适当稀释Von Kossa 银溶液或减少光照时间或光照强度;如果钙盐染色较浅,应增加 Von Kossa 银溶液用量并增加光照时间和光照强度。
4、该染色法可以区分尿酸盐和钙盐,其原理在于钙盐不溶解于碳酸锂溶液,尿酸盐则易溶。因此,切片经碳酸锂处理后入Von Kossa 银溶液并置于强光下照射,呈阴性者为尿酸盐。
5、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
