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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | PAGE凝胶银染试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | PAGE Gel Silver Staining Kit | ||||
| 别名: | 蛋白银染试剂盒;蛋白快速银染试剂盒 | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
蛋白质条带的银染是基于蛋白质中各种基团（如琉基、碳基等）与银的结合，然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使Ag+还原成银颗粒，可把蛋白电泳带染成黑褐色。它主要用于聚丙烯酰胺凝胶电泳染色。其灵敏度比考马斯亮蓝高，该产品整个过程操作简单，灵敏度高，能检测到10ng以下的蛋白条带。
操作步骤：
一、染色液配制(无水乙醇自备)
需要配制的染色液体积根据 PAGE 胶的大小而定，一般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。配制用的器皿清洗干净后用去离子水涮洗，染色液须用去离子水配制，现用现配。如果配制的溶液体积不是 100mL，可以按比例改变各成分用量。
1、固定液：取 40mL 无水乙醇，10mL 染色液 A 加去离子水至 100mL，混匀；
2、敏化液： 取 30mL 无水乙醇，10mL 染色液 C 加去离子水至 100mL，混匀；
3、银染液：称取 0.12g 试剂 E，用 50mL 去离子水溶解，加入 10ul 染色液 B 混匀，加去离子水至 100mL 现用现配。
4、显色液：10mL 显色液 D 和 30μL 染色液 B 加入去离子水至 100mL，混匀，现用现配。
5、终止液：取 5mL 染色液 A 加去离子水稀释至 100mL，现用现配。
二、染色
1、PAGE 电泳结束后，将 PAGE 蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中，用固定液固定 30min。
2、将 PAGE 胶转移至敏化液中，使染液没过 PAGE 胶，室温作用 30min。可置于摇床上缓慢摇晃。
3、弃去敏化液，用去离子水漂洗三次，每次 10min。
4、将 PAGE 胶转移至银染液中，使染液没过 PAGE 胶，室温摇晃 40min。
5、将 PAGE 胶转移至显色液中，使显色液没过 PAGE 胶，室温摇晃，该显色一般在10min 左右。
6、再选择合适的时间进行终止，弃去显色液，加入终止液即可。最后可进行信号收集保存。
需要配制的染色液体积根据 PAGE 胶的大小而定，一般的 mini-PAGE 胶需要 20-30mL。配制用的器皿清洗干净后用去离子水涮洗，染色液须用去离子水配制，现用现配。如果配制的溶液体积不是 100mL，可以按比例改变各成分用量。
1、固定液：取 40mL 无水乙醇，10mL 染色液 A 加去离子水至 100mL，混匀；
2、敏化液： 取 30mL 无水乙醇，10mL 染色液 C 加去离子水至 100mL，混匀；
3、银染液：称取 0.12g 试剂 E，用 50mL 去离子水溶解，加入 10ul 染色液 B 混匀，加去离子水至 100mL 现用现配。
4、显色液：10mL 显色液 D 和 30μL 染色液 B 加入去离子水至 100mL，混匀，现用现配。
5、终止液：取 5mL 染色液 A 加去离子水稀释至 100mL，现用现配。
二、染色
1、PAGE 电泳结束后，将 PAGE 蛋白胶转移至玻璃平皿或搪瓷盘中，用固定液固定 30min。
2、将 PAGE 胶转移至敏化液中，使染液没过 PAGE 胶，室温作用 30min。可置于摇床上缓慢摇晃。
3、弃去敏化液，用去离子水漂洗三次，每次 10min。
4、将 PAGE 胶转移至银染液中，使染液没过 PAGE 胶，室温摇晃 40min。
5、将 PAGE 胶转移至显色液中，使显色液没过 PAGE 胶，室温摇晃，该显色一般在10min 左右。
6、再选择合适的时间进行终止，弃去显色液，加入终止液即可。最后可进行信号收集保存。
组分：
| 组分名称 | 规格 | Storage |
| 染色液 A | 200mL | RT |
| 染色液 B | 1mL | RT |
| 染色液 C | 100mL | RT |
| 显色液 D | 100mL | RT |
| 试剂 E | 2g | RT |
| 注：1L 规格指可配制的银染液的体积，实际使用次数根据 PAGE 胶大小不同而不同。 | ||
保存条件：
室温干燥，避光，1年。
注意事项：
1、银染主要出现在 PAGE 胶的表面，使用薄胶（0.5-0.75mm）可以提高灵敏度。
2、对于考马斯亮蓝染色的 SDS-PAGE 胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。考染过程中的乙酸会干扰银染，因此要确保将 PAGE 凝胶中残留的乙酸彻底洗净。
3、不同蛋白质对银染的反应是不一样的，尤其是碱性蛋白染色效果差。因此，不宜用银染测定不同蛋白的比例。
4、染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择 40-60 rpm。
5、凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程中都应带手套操作。
6、PAGE 凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于 1μS 的去离子水。
7、如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是在几步漂洗过程中洗得不够彻底，或是染色过程时温度太低。
8、较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。
9、PAGE 胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和两性电解质这些物质会干扰银染。
10、室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。
11、凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高 40 倍。
12、染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。
13、银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。
14、银染容器最理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。
15、试剂如有沉淀析出，混匀溶解（可加热）后室温使用。
16、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
17、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
18、以上信息仅做参考交流之用。
相关产品:
PS0108/常规考马斯亮蓝染色液
PS0109/考马斯亮蓝快速染色液
PS1084/蛋白Marker-预染超低分子量,1.7-40kD
PS1377/蛋白Marker-超宽范围预染,10-310 kDa
PS0148/SDS-PAGE凝胶配制试剂盒
2、对于考马斯亮蓝染色的 SDS-PAGE 胶，可用甲醇将胶漂洗后，继续进行银染。考染过程中的乙酸会干扰银染，因此要确保将 PAGE 凝胶中残留的乙酸彻底洗净。
3、不同蛋白质对银染的反应是不一样的，尤其是碱性蛋白染色效果差。因此，不宜用银染测定不同蛋白的比例。
4、染色过程中，缓慢的振荡是必要的，一般选择 40-60 rpm。
5、凝胶表面的裂纹多是由于压力、手印及表面干燥所致，所以全程中都应带手套操作。
6、PAGE 凝胶背景呈均一的黑色多是水中的杂质引起的，所以溶液的配制应使用电导率小于 1μS 的去离子水。
7、如果染色后有呈灰尘或烟雾状灰色或棕色的沉淀出现在凝胶表面，可能是在几步漂洗过程中洗得不够彻底，或是染色过程时温度太低。
8、较深的银染背景多是丙烯酰胺中的杂质所致。
9、PAGE 胶中的甘油、尿素、甘氨酸、Triton X-100 和两性电解质这些物质会干扰银染。
10、室温操作时，温度的波动往往会干扰银染的效果，恒温水浴可以解决这个问题。
11、凭借戊二醛预处理可以使各种蛋白质的染色提高 40 倍。
12、染色使用的玻璃器皿必须非常干净，用酸浸泡可以满足要求。
13、银染应尽快照相，随着时间延长，蛋白条带会变浅，而背景会加深。
14、银染容器最理想的是玻璃平皿，其次是搪瓷盘和密胺塑料盘等。
15、试剂如有沉淀析出，混匀溶解（可加热）后室温使用。
16、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
17、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
18、以上信息仅做参考交流之用。
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PS1084/蛋白Marker-预染超低分子量,1.7-40kD
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UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
