| 中文名称: | 酵母蛋白提取试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | Yeast Protein Extraction | ||||
| CAS No: | 分子式: | 分子量: | |||
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产品简介：
酵母蛋白提取试剂盒采用EDTA，山梨醇和蜗牛酶，蛋白酶抑制剂，蜗牛酶在合适的等渗体系中消化酵母的细胞壁，在用等渗液冲洗后，用含有蛋白酶抑制剂和温和去污剂的低渗缓冲液进行反复冻溶，促进细胞破裂，从而释放蛋白质，可以应用酵母蛋白和重组胞内蛋白的活性分析，western blot、SDS-PAGE、2D和免疫共沉淀等蛋白质电泳以及免疫学实验,每次可以处理50mg的湿重酵母，可以使用50次。
如果酵母蛋白提取后续实验为SDS-PAGE等变性蛋白电泳及免疫学实验，亦可通过裂解液（组分II）处理后加入SDS-PAGE上样缓冲液直接制备蛋白样品。
如果酵母蛋白提取后续实验为SDS-PAGE等变性蛋白电泳及免疫学实验，亦可通过裂解液（组分II）处理后加入SDS-PAGE上样缓冲液直接制备蛋白样品。
操作步骤：
1、将酵母在28-30℃的环境中培养到OD600=1.0左右。8000 rpm（5000g) 离心1 min，收集菌体并称量菌体的湿重。
2、以每50mg湿重加500μL等渗液，5 μL蜗牛酶和1 μL的巯基乙醇，枪头吹吸或者涡旋震荡，将菌体悬浮。
3、30℃水浴60 min，5000 rpm(2500g) 离心1min，去上清，收集沉淀。
4、用500μL等渗液重悬，再5000 rpm(2500g) 离心1 min，去上清，收集沉淀，重复洗涤一次。
5、加人500μL 低渗液(使用前，在500μL低渗液中加5 μL PMSF)重悬，再放入-20℃冰箱中冷冻30 min，室温溶解。再放入-20℃冰箱中冷冻30 min，室温溶解。
6、裂解后的溶液12000 rpm (12830g) 离心5 min后，取上清可以用于实验。
2、以每50mg湿重加500μL等渗液，5 μL蜗牛酶和1 μL的巯基乙醇，枪头吹吸或者涡旋震荡，将菌体悬浮。
3、30℃水浴60 min，5000 rpm(2500g) 离心1min，去上清，收集沉淀。
4、用500μL等渗液重悬，再5000 rpm(2500g) 离心1 min，去上清，收集沉淀，重复洗涤一次。
5、加人500μL 低渗液(使用前，在500μL低渗液中加5 μL PMSF)重悬，再放入-20℃冰箱中冷冻30 min，室温溶解。再放入-20℃冰箱中冷冻30 min，室温溶解。
6、裂解后的溶液12000 rpm (12830g) 离心5 min后，取上清可以用于实验。
组分：
| 产品组分1 | PS1999-50T |
| 等渗液 | 75 mL |
| 低渗液 | 25 mL |
| 蜗牛酶 | 0.25 mL |
| PMSF | 0.25 mL |
| 产品组分2 | PS1999-50T |
| 裂解液 | 10mL |
| 中和液 | 0.4 mL |
| 5xSDS 上样缓冲液 | 1mL |
保存条件：
常温下运输，收到后，将等渗液和低渗液在4℃保存，蜗牛酶和PMSF在-20℃的冰箱中保存，保质期两年。
注意事项：
1、按照每50 mg湿重加500μL的等渗液和5μL的蜗牛酶，菌体的量不能够过多,否则会使的菌体裂解不充分。
2、裂解后的酵母菌蛋白液,应在-20℃的冰箱中保存。
3、在跑电泳时，由于蜗牛酶已经被冲洗，所以可能产生与蜗牛酶相关的几个条带，一般不会产生。
4、溶液使用后，请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气的物质发生化学反应。
5、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、以上信息仅做参考交流之用。
2、裂解后的酵母菌蛋白液,应在-20℃的冰箱中保存。
3、在跑电泳时，由于蜗牛酶已经被冲洗，所以可能产生与蜗牛酶相关的几个条带，一般不会产生。
4、溶液使用后，请旋紧瓶盖，防止溶液挥发和与空气的物质发生化学反应。
5、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
