( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 预染蛋白marker 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | |||||
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2:吸取 3-5 μl 到 SDS-聚丙烯酰胺胶的上样孔中,与待测样品一起电泳和转膜
3:转膜后,进行正常的封闭、一抗和二抗孵育,最后进行 ECL 发光检测。
4:电泳结束后,通过蛋白染色液染色观察目的条带。
附录:转膜和洗膜:
1:转膜条件(冰上进行)
a. Transfer with buffer containing 20% methanol to fix proteins on membrane。
b. Wash membrane with PBS or TBS containing less than 0.1% Tween-20 at 4°C。
2:洗膜条件(4 度进行)
Membrane: Nitrocellulose membranes / PVDF。
Wash Buffer:1X Tris buffered saline, 0.1% Tween-20 (TBST)(吐温 20 不能超过 0.1%)。
3:Stripping Buffer
Stripping Buffer: 15g Glycine, 1g SDS, 10 ml Tween20, pH2.2–Adjust volume to 1L。
如果需要用到含有 DTT /b-ME 的 Stripping buffer,膜需要先以 1X Tris buffered saline(TBS) 行 Stripping。洗三次,把 Tween-20 去干净后,再进行Stripping。
1X Tris buffered saline: 6.05 g Tris and 8.76 g NaCl in 800 mL of H2O.
Adjust pH to 7.5 with 1 M HCl and make volume up to 1 L with H2O
2:使用前先将产品恢复至室温后混匀,使沉淀充分溶解,否则可能导致电泳条带出现不同程度的弥散或拖带。
3:本产品含有 SDS,蛋白已变性,不宜作为天然蛋白分子电泳时的分子量参照标准。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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