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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | Long Taq PCR MasterMix 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Long Taq PCR MasterMix | ||||
| 别名: | 长片段专用 | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品包含LongTaqDNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液，浓度为2×。具有快速简便、
灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点，可最大限度的减少人为误差。使用时只需加入DNA模
板和引物既可。可用于长片段DNA扩增和GC含量高，二级结构丰富的片段扩增。本产品使用方便快捷，能避免PCR操作过程中的污染，使用时只需取适量2×LongTaqPCRMasterMix溶液，加入模板和引物，并加入去离子水补足体积，使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀，操作需在冰上进行。
本产品(0.1U/μ)经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
本产品(0.1U/μ)经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余DNA ；能有效地扩增人基因中的单拷贝基因；室温存放一周，无明显活性改变。
操作步骤：
| 1：用2×Long Taq PCR MasterMix 产品，以人基因组DNA 为模板，扩增1kb 的片段，反应体系为50μl（如反应体系不同，可按此比例增加或减少用量）。 | |
| 模板DNA 2.5ng（λphage）或者0.5μg(Human) 噬菌体（0.1-5ng），人基因组(0.1-1μg ） | μl |
| 引物1（20 μM） | 0.5-1μl |
| 引物2（20 μM） | 0.5-1μl |
| 2× long Taq MasterMix | 25μl |
| ddH2O | 补至50μl |
| 2：PCR 反应循环的设置 | ||
| 94℃ | 3min | 30 cycles |
| 94℃ | 30sec | |
| 55℃ | 30sec | |
| 72℃ | 1min | |
| 72℃ | 5min | |
| 3：结果检测：反应结束后取5μl 反应产物，琼脂糖凝胶电泳检测。 | ||
组分：
Long Taq DNA Polymerase (recombinant)：0.05units/μl ；MgCl2： 4mM ；dNTPs (dATP, dCTP, dGTP,
dTTP)：0.4mM。
保存条件：
-20℃ 两年
注意事项：
1：扩增长片段强烈推荐使用0.2μl 薄壁管。其他试管未经测试。较厚的试管在92℃时不能有效地使模板变性。变性时，尽可能缩短变性时间，降低变性温度。第一步变性在92~94℃下进行2 分钟（GC 含量高可延长时间达5 分钟）。长片段在循环过程中尽可能缩短变性时间（92~94℃下进行10-15 秒），除非模板中富含GC，则95℃下变性30 秒。这可以防止DNA 脱嘌呤和链断裂，对于所需扩增的基因组DNA 片段终长度超过12 kb 时，应该尽可能的降低变性温度和时间。变性需要的时间在不同的PCR 仪器上稍有不同。
2：如果扩增模板GC 含量高或者扩增片段比较长，可在反应混合物中加入甜菜碱或者DMSO, 甜菜碱终浓度1-2.5M; DMSO 到终浓度1%-8%，最常用2％（<30kb）或者4％（>30kb）往往会改善扩增效果。
3：扩增长片段，引物一般终浓度为0.3-1μM，长度最好为27-36bp；退火温度一般在65℃-70℃，此时退火温度和延伸温度基本一致，可将退火延伸在同一个温度进行，使用2 阶段扩增法。当然如果设计的引物在20bp 左右，则还是使用传统3 阶段扩增法为好。
4：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2：如果扩增模板GC 含量高或者扩增片段比较长，可在反应混合物中加入甜菜碱或者DMSO, 甜菜碱终浓度1-2.5M; DMSO 到终浓度1%-8%，最常用2％（<30kb）或者4％（>30kb）往往会改善扩增效果。
3：扩增长片段，引物一般终浓度为0.3-1μM，长度最好为27-36bp；退火温度一般在65℃-70℃，此时退火温度和延伸温度基本一致，可将退火延伸在同一个温度进行，使用2 阶段扩增法。当然如果设计的引物在20bp 左右，则还是使用传统3 阶段扩增法为好。
4：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
