( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 宽分子量非变性电泳蛋白质Marker 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | Broad MW Native Electrophoresis Protein Marker | ||||
| CAS No: | 分子式: | 分子量: | |||
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| 蛋白名称 | 分子量(KD) | 蛋白来源 | pI | 备注 |
| Ferritin | 440 880 |
equine spleen | N/A | 非变性下440kD和880 kD |
| Carbonic Anhydrase | 300 | Bovine Erythrocytes | 6.4 | 单体分子量29kD,非变性下为10聚体,低于300kD有电荷异构体(charge isomer) |
| Lactic Dehydrogenase | 165 | Microorganism | 4.5 | 球蛋白,单体分子量36 kD,非变性下可形成四聚体 |
| Ovalbumin | 45 | egg white | 4.71或 4.59 | 球蛋白,分子量为45kD,非变性条件下大于45kD会出现电荷异构体(charge isomer) |
| Trypsin Inhibitor | 21 | Soybean | 4.5 | 非变性下21 kD |
五种蛋白含量0.2-0.4μg/μl,贮存缓冲液组分:20mM TRIS-Phosphate pH7.5,15%甘油,稳定剂,溴酚蓝。
注意:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,1.0厚度10齿梳子加样孔上样5 μl,1.0厚度15齿梳子加样孔上样量2.5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
2. 该产品不含蛋白凝胶制备试剂,可以选择非变性PAGE凝胶制备及电泳试剂盒或者蛋白预制胶。如自备试剂,经典Laemmli系统中把制胶溶液、电泳缓冲液和上样缓冲液中的SDS和还原剂(DTT或β-巯基乙醇)全部去除即可进行非变性电泳。
3.电泳条件:建议使用8%非变性胶或者4-12%梯度非变性胶进行电泳。
恒电压:150V
起始电流:30-35 mA/板胶
结束电流:8-15 mA/板胶
电泳时间:80min+
4.电泳结束后,考马斯亮蓝染色,观察结果。
注意:使用银染染色时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,需要适当降低Marker上样量,一般稀释50倍后上样。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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