| 中文名称: | SYBR Green I 热销 促销 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | SYBR Green I | ||||
| CAS No: | 163795-75-3 | ||||
| CAS No: | 163795-75-3 | ||||
产品简介：
SYBR Green I, is a very sensitive dye for the detection of double stranded DNA (dsDNA), So it has been widely used in non-specific detection of amplification in realtime qPCR experiments. The double-strand DNA-specific SYBR Green I fluorescent reporter offers distinct advantages. SYBR Green I dye is inexpensive, easy to use, and sensitive. Well-designed primers must be used in SYBR Green quantitative RT-PCR reactions because SYBR Green I dye will detect nonspecific products, resulting in an overestimation of the target concentration.
操作步骤：
1、On ice, prepare a 2x master mix containing no DNA, by mixing the components in the following order: water,DMSO, Taq polymerase buffer, dNTPs, MgCl2, Sybr Green, Taq polymerase.
2、Transfer 2x QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix to tubes or plates. Add RNase-free water. Mix the individual solutions.
3、Prepare a reaction mix according to Table 2.Due to the hot start, it is not necessary to keep samples on ice during reaction setup or while programming the real-time cycler.
PCR Reaction Setup: Table 2：
DNA：Template DNA (<500 ng/reaction)
SYBR Mix：25.0 μL
Primer1（引物1）：2ul（5uM)
Primer2（引物2）：2ul（5uM）
dd H2O：Added to 50.0 μL
Program your real-time cycler according to the program outlined in Table 3
PCR initial activation step： Heating cycling Number of cycles 40
95 °C 5min： 96 °C 10s，60 °C 30s
附件：
SUPER Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800～1000倍。在PCR反应体系中，加入过量SUPER Green I荧光染料，它特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SUPER Green I染料分子荧光不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。
1．使用浓度对荧光PCR结果的影响
SUPER Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SUPER Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出。而在高浓度时，将会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SUPER Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为1×到0.2×之间。
2．Mg2＋浓度的影响
提高Mg2＋浓度可以降低SUPER Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SUPER Green I进行荧光PCR反应时，Mg2＋浓度比无SUPER Green I 的普通 PCR 反应高出0.5-3mM。
2、Transfer 2x QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix to tubes or plates. Add RNase-free water. Mix the individual solutions.
3、Prepare a reaction mix according to Table 2.Due to the hot start, it is not necessary to keep samples on ice during reaction setup or while programming the real-time cycler.
PCR Reaction Setup: Table 2：
DNA：Template DNA (<500 ng/reaction)
SYBR Mix：25.0 μL
Primer1（引物1）：2ul（5uM)
Primer2（引物2）：2ul（5uM）
dd H2O：Added to 50.0 μL
Program your real-time cycler according to the program outlined in Table 3
PCR initial activation step： Heating cycling Number of cycles 40
95 °C 5min： 96 °C 10s，60 °C 30s
附件：
SUPER Green I与dsDNA 结合荧光信号可增强800～1000倍。在PCR反应体系中，加入过量SUPER Green I荧光染料，它特异性地掺入DNA双链后，荧光信号增强，而不掺入链中的SUPER Green I染料分子荧光不变，从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。荧光可以在退火阶段或者延伸阶段测定。
1．使用浓度对荧光PCR结果的影响
SUPER Green I的使用浓度是保证荧光定量PCR实验成功非常关键的因素。如果SUPER Green I的浓度过低会使荧光信号的变化降低，这就意味着低拷贝的样品可能无法检出。而在高浓度时，将会抑制PCR反应，降低PCR反应效率。所以一般在使用SUPER Green I时应根据实际情况优化使用浓度，反应的终浓度为1×到0.2×之间。
2．Mg2＋浓度的影响
提高Mg2＋浓度可以降低SUPER Green I对PCR反应的抑制作用。我们建议在用SUPER Green I进行荧光PCR反应时，Mg2＋浓度比无SUPER Green I 的普通 PCR 反应高出0.5-3mM。
组分：
| Reagent | Final concentration in the mix |
| dNTP | 0.25mM |
| Tween20 | 1% |
| BSA | 0.1% vol. |
| Tris(pH8.4) | 50mM |
| Hot-start Taq DNA polymerase | 1.25 u per reaction |
| NH4Cl | 10mM |
| KCl | 20mM |
| MaCl2 | 2.5mM |
| Sybr Green | 2X |
保存条件：
-20℃ 三年
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
