( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 谷胱甘肽检测试剂 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | ThiolTracker Violet | ||||
| 别名: | 谷胱甘肽检测试剂 ThiolTracker Violet | ||||
| CAS No: | |||||
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ThiolTrace Violet与硫醇结合后,在405 nm紫激光激发下可发射520-530 nm的强荧光。与ThiolTracker Violet(Thermo Fisher Scientific)相比,在含生长因子的细胞培养基中,ThiolTrace Violet 500的荧光强度高出10-100倍,且能兼容多种稀释液(包括含血清细胞培养基)。该探针可广泛应用于流式细胞术、HCS成像及荧光显微镜检测领域
适用仪器:
1:流式细胞仪
Ex:405 nm,Em:525/50 nm。通道:Pacific Orange 通道。
2:荧光显微镜
Ex:405 nm,Em:525 nm。推荐孔板:黑色透明底板。通道:TRITC 通道。
1:用5×105到1×106细胞/mL的密度制备含测试化合物的细胞。
2:准备ThiolTrace Violet工作溶液并将其添加到细胞中。
3:在37 ℃孵育20至30分钟
4:在Ex/Em=405/525nm处读取荧光强度-Pacific Orange。
二、储备液的配制
在试剂瓶中加入200 µL DMSO,充分混匀得到500X储备液。储备液分装为单次用量,-20°C避光保存,避免反复冻融。
三:工作溶液配制
将1 µL 500X储备溶液加入您选择的0.5 mL缓冲液或无血清的细胞培养基,并充分混合。
四:实验步骤
1:按所需时间,用测试化合物处理细胞。注意:对于贴壁细胞,用0.5 mM EDTA轻轻提起细胞以保持细胞完整,并在用ThiolTrace 工作溶液孵育之前,用含血清的培养基洗涤细胞一次。注意:适当的孵育时间取决于所用的单个细胞类型和细胞浓度。优化每个实验的孵育时间。
2:将细胞以1000 rpm的速度离心4分钟,然后用1 mL所选缓冲液(可选)洗涤细胞。
3:将细胞重悬于0.5 mL ThiolTrace Violet 工作溶液中,并在37℃培养箱中孵育20至30分钟。注意:对于荧光显微镜,每孔添加200 µL ThiolTrace Violet工作溶液。
4:以1000 rpm离心细胞4分钟,然后在1 mL所选缓冲液(可选)中洗涤细胞。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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