中文名称: T4 DNA连接酶  一键复制产品信息
英文名称: T4 DNA Ligase
CAS No: 9015-85-4
T14469 T4 DNA连接酶 (普西唐-psaitong)
产品简介:
T4 DNA ligase是将源于T4 噬菌体的 T4 DNA 连接酶基因在大肠杆菌中高效表达,经过多次柱层析纯化而获得的高效率、高纯度、高活性的 DNA 连接酶。该酶具有催化双链 DNA 或 RNA 上相邻的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端形成磷酸二酯键的特性。不仅能够催化平齐末端或粘性末端之间的连接,还可以修复双链 DNA、RNA 或 DNA/RNA 杂交双链中的单链切刻。T4 DNA 连接酶经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。 单位定义:
(以粘性末端活性单位)1 单位是指在 20μl 1×T4 DNA ligase 反应缓冲液中,16˚C 反应条件下,30 分钟能使 50%经 HindIII 消化的λ DNA 片段[5’端浓度为 0.12 μM (300 μg/ml)]连接所需要的酶量。
反应条件:
1X T4 DNA Ligase 反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5 @25˚C), 10mM MgCl2,10mM DTT, 1mM ATP。推荐 DNA 5’末端浓度为 0.1-1.0μM, 16˚C 温育。 热失活:65˚C 10 分钟。
浓度:
400,000 units/ml
适用范围:
1:高效连接粘性末端和平末端: TA 克隆 和 Blunt 克隆;
2:修复 dsDNA 切刻,同时可以用于连接 RNA 和 DNA;
3:构建高丰度克隆文库
基本反应体系:
与载体的连接反应(16˚C,30分钟-1小时,或者4˚C,过夜)
载体 DNA 0.05-0.5μg
DNA 片段 3 倍于载体的摩尔数
10×Ligase Buffer 2 μl
T4 DNA Ligase 0.5-1μl(根据粘性/平末端调整)
总体积 20μl
与linker的连接反应(16˚C,1-4 小时,或者 4˚C,过夜)
DNA 0.1-1μg
linker 10 倍于 DNA 的摩尔数
10×Ligase Buffer 2 μl
T4 DNA Ligase 0.5-1μl
总体积 20μl
组分:
产品名称 规格 规格
T4 DNA Ligase 10000U(25μl) 20000U(50μl)
保存条件:
-20˚C,24 个月;经常使用,建议分装保存。
注意事项:
1、ATP 是反应必须的辅因子。而大肠杆菌 DNA 连接酶则需要 NAD 作为辅因子。如 T4 DNA 连接酶稀释后于-20˚C 贮存,应选用含 50%甘油的贮存缓冲液;如稀释后立即使用,则用 1× T4 DNA 连接酶缓冲液稀释即可。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、以上信息仅做参考交流之用。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)

分析证书(COA)

Lot/Batch Number

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):
请在下列方框中输入相关信息后点击计算,可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法:
举例:给药剂量是10 mg/kg,每只动物体重20g,给药体积100 μL, TargetMol | Animal experiments  一共给药动物10只,您使用的配方为5%TargetMol | reagent DMSO 30%PEG300 5%Tween 80 60%Saline/PBS/ddH2O, 那么您的工作液浓度为2mg/mL
母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSOTargetMol | reagent  ( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSOTargetMol | reagent  母液,添加 300 μLPEG300TargetMol | reagent  混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2OTargetMol | reagent ​ 混匀澄清

方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
 
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例,并不是具体某个试剂的配制,请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系普西唐客服为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算,您也可以参考 更多