( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。(以粘性末端活性单位)1 单位是指在 20μl 1×T4 DNA ligase 反应缓冲液中,16˚C 反应条件下,30 分钟能使 50%经 HindIII 消化的λ DNA 片段[5’端浓度为 0.12 μM (300 μg/ml)]连接所需要的酶量。
反应条件:
1X T4 DNA Ligase 反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5 @25˚C), 10mM MgCl2,10mM DTT, 1mM ATP。推荐 DNA 5’末端浓度为 0.1-1.0μM, 16˚C 温育。 热失活:65˚C 10 分钟。
浓度:
400,000 units/ml
适用范围:
1:高效连接粘性末端和平末端: TA 克隆 和 Blunt 克隆;
2:修复 dsDNA 切刻,同时可以用于连接 RNA 和 DNA;
3:构建高丰度克隆文库
基本反应体系:
| 与载体的连接反应(16˚C,30分钟-1小时,或者4˚C,过夜) | |
| 载体 DNA | 0.05-0.5μg |
| DNA 片段 | 3 倍于载体的摩尔数 |
| 10×Ligase Buffer | 2 μl |
| T4 DNA Ligase | 0.5-1μl(根据粘性/平末端调整) |
| 总体积 | 20μl |
| 与linker的连接反应(16˚C,1-4 小时,或者 4˚C,过夜) | |
| DNA | 0.1-1μg |
| linker | 10 倍于 DNA 的摩尔数 |
| 10×Ligase Buffer | 2 μl |
| T4 DNA Ligase | 0.5-1μl |
| 总体积 | 20μl |
| 产品名称 | 规格 | 规格 |
| T4 DNA Ligase | 10000U(25μl) | 20000U(50μl) |
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、以上信息仅做参考交流之用。
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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