.png)
（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | Bradford蛋白定量试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Bradford Protein Assay Kit | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
目前世界上最常用的蛋白浓度检测方法是：BCA蛋白定量试剂盒(BCA Protein Assay Kit)和Bradford蛋白定量试剂盒(Bradford Protein Assay Kit)，Bradford 法与传统方法相比，更简单、更稳定、兼容性更好，Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中β-巯基乙醇的浓度高达1M，DTT的浓度高达5mM，但本法受高浓度去垢剂的影响明显，故在用Bradford Protein Assay Kit进行蛋白定量时需确保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween20/60/80低于0.015%，含高浓度去污剂的蛋白定量，建议采用BCA Protein Assay Kit。
Bradford Protein Assay Kit检测原理是在酸性乙醇溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白结合颜色由棕色变为蓝色，在595nm有最大吸收值，检测速度很快，少量样品一般只需10min即可完成检测，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1～20μl，在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
Bradford Protein Assay Kit检测原理是在酸性乙醇溶液中考马斯亮蓝G250与蛋白结合颜色由棕色变为蓝色，在595nm有最大吸收值，检测速度很快，少量样品一般只需10min即可完成检测，检测浓度下限达到25μg/ml，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1～20μl，在50~1000μg/ml浓度范围内有较好的线性关系。
操作步骤：
1、样品蛋白质的提取:称取新鲜绿豆芽下胚轴(或小麦叶片)0.5-1.0g 放入研钵中，加2mL蒸馏水研磨成匀浆，转移到离心管中，再用6mL蒸馏水分次洗涤研钵，洗涤液收集于同离心管中,在室温(20-25°C)下放置0.5-1h以充分提取,然后4000r/min离心20min去沉淀，上清液转入10mL容量瓶，以蒸馏水定容至刻度，即得待测样品提取液。
2、取 1ml 蛋白标准配制液完全加入到含有20mg的蛋白标准(BSA)中，充分溶解，后配制成20mg/ml 的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，配制的蛋白标准溶液应-20℃保存。
3、取适量的 20mg/ml蛋白标准，用蛋白标准稀释液稀释至终浓度为500μg/ml或所需浓度，如取 25μl 20mg/ml蛋白标准，加入975μl蛋白标准稀释液，充分混匀，即配制成 500μg/ml蛋白标准溶液。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中;一般也可以用 0.9%NaCI 或PBS 作为溶解 BSA稀释液，稀释后的500μg/ml蛋白标准溶液也应-20°C长期保存。
4、将标准品按 0,1,2,4,8,12,16,20μl加到96 孔板或 EP管中，加蛋白标准稀释液补足至20μl。
5、加适当体积样品到96 孔板或EP 管中，补蛋白标准稀释液至20μl。
6、各孔加入 200ul G250染色液，室温放置3-5min。
7、酶标仪或分光光度计测定595nm波长处的吸光度，560-610nm之间的波长也可，根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
2、取 1ml 蛋白标准配制液完全加入到含有20mg的蛋白标准(BSA)中，充分溶解，后配制成20mg/ml 的蛋白标准溶液，配制后可立即使用，配制的蛋白标准溶液应-20℃保存。
3、取适量的 20mg/ml蛋白标准，用蛋白标准稀释液稀释至终浓度为500μg/ml或所需浓度，如取 25μl 20mg/ml蛋白标准，加入975μl蛋白标准稀释液，充分混匀，即配制成 500μg/ml蛋白标准溶液。特别提示:待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也宜溶解于什么样的稀释液中，例如待测蛋白溶解于蔗糖中，亦取20mg/ml蛋白标准溶解于蔗糖中;一般也可以用 0.9%NaCI 或PBS 作为溶解 BSA稀释液，稀释后的500μg/ml蛋白标准溶液也应-20°C长期保存。
4、将标准品按 0,1,2,4,8,12,16,20μl加到96 孔板或 EP管中，加蛋白标准稀释液补足至20μl。
5、加适当体积样品到96 孔板或EP 管中，补蛋白标准稀释液至20μl。
6、各孔加入 200ul G250染色液，室温放置3-5min。
7、酶标仪或分光光度计测定595nm波长处的吸光度，560-610nm之间的波长也可，根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
自备材料：
1、酶标仪或分光光度计、96孔板或比色杯、电子天平、研钵或匀浆器、离心机、离心管
2、蒸馏水、0.9%NaCI或PBS
2、蒸馏水、0.9%NaCI或PBS
组分：
| 组分名称 | PS2068-1000T | Storage |
| 试剂(A)：G250 染色液 | 200mL | RT |
| 试剂(B)：蛋白标准(BSA) | 20mg | RT |
| 试剂(C)：蛋白标准配制液 | 10mL | RT |
保存条件：
室温,12个月。蛋白标准配置成溶液后应-20℃保存。
注意事项：
1、G250 染色液恢复至室温充分混匀后使用，有利于提高检测的灵敏度，加完G250染色液后，尽量在30min内完成吸光度的测定，防止沉淀形成后影响实验结果。
2、蛋白标准在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也应溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。
4、建议每次测定时都做标准曲线，因为测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定应每次都做标准曲线。
5、没有酶标仪，也可使用分光光度计测定，但应考虑比色杯的最小检测体积，需按比例适当加大G250染色液、样品和标准品的用量使总体积不小于最小检测体积，使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
6、用比色杯测定蛋白含量时，由于考马斯亮蓝易结合石英比色杯，应优先选用一次性塑料比色杯，如用玻璃比色杯，比色完毕应立即用乙醇清洗干净。
7、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、蛋白标准在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。
3、待测蛋白溶解于什么样的稀释液中，蛋白标准也应溶解于什么样的稀释液中，否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致，有可能导致测定不准确。
4、建议每次测定时都做标准曲线，因为测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，所以除非精确控制显色反应的时间和温度，否则如需精确测定应每次都做标准曲线。
5、没有酶标仪，也可使用分光光度计测定，但应考虑比色杯的最小检测体积，需按比例适当加大G250染色液、样品和标准品的用量使总体积不小于最小检测体积，使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
6、用比色杯测定蛋白含量时，由于考马斯亮蓝易结合石英比色杯，应优先选用一次性塑料比色杯，如用玻璃比色杯，比色完毕应立即用乙醇清洗干净。
7、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
(2).jpg)
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
