包装规格：
50mL in glass bottle
产品简介：
本产品是传统Trizol的免氯仿升级版，广泛适用于从各类动物组织、植物材料、培养细胞、细菌等样品中提取Total RNA和Small RNA。
与传统Trizol提取方法相比，本产品不需要使用氯仿进行分层，操作更简单，且全程可在常温进行。本产品提取的RNA基本不残留DNA，提取的RNA可以直接用于cDNA克隆、qRT-PCR检测、mRNA纯化、体外翻译、Northern blotting杂交、高通量测序等各种分子生物学实验。
与传统Trizol提取方法相比，本产品不需要使用氯仿进行分层，操作更简单，且全程可在常温进行。本产品提取的RNA基本不残留DNA，提取的RNA可以直接用于cDNA克隆、qRT-PCR检测、mRNA纯化、体外翻译、Northern blotting杂交、高通量测序等各种分子生物学实验。
操作步骤：
(用本产品抽提RNA时要戴手套和护眼罩。避免接触皮肤和衣服。在化学通风橱完成操作。避免呼吸道吸入。如无特殊说明，所有的操作应该在在15-30°C的条件下进行.)
一：样本处理
1：植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在本产品中迅速研磨，每25-50 mg组织加入0.5 ml 本产品，混匀。
2：动物组织：取新鲜或-70°C冻存动物组织尽量剪碎，每15-50 mg组织加入0.5 mL本品，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入0.5 ml本品混匀。
3：单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm的培养板中加0.5mL本产品覆盖并反复吹打裂解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的本产品的量（每10 cm2加0.5 mL）。当本品量不足时可导致抽提RN中污染DNA。
注意：贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶（皿）脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全破裂开，并已释放出全部RNA，继续做即可。
4：细胞悬液：离心收集细胞。在本品中用移液管反复吹打来裂解细胞。每1 - 5×106 的动物细胞，植物细胞或每5×106 细菌加0.5 ml 本产品。在加入前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。
5：液体样本：每200 μl（低于200 μl时，可用RNase-free H2O补足）血浆、血清等液体样本，加入0.5mL本品后振荡混匀 。
二：向上述裂解液中加入2/5体积的 RNase-free H2O(每 500μl 本品加 200 μl 水)，剧烈振荡混匀，室温静置5 min。注意：当处理样本量较大50 mg左右时，可延长室温静置时间到10 - 15 min。
三：室温12,000 rpm 离心 15 min。
四：离心后溶液分成上层水相(含 RNA)和下层沉淀(含蛋白质、DNA、多糖等杂质)，小心吸取上层水相至一个新的离心管中。 注意：上层水相约占总体积的90%，如用500 μl 本产品进行提取，上层水相约为630 μl，建议吸取500 μl；提取微量样本时，为减少RNA损失，可以全部转移上清。
五：加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温静置 10 min。
六：室温 12,000 rpm 离心 10 min。通常可以看见白色沉淀，小心弃去上清。注意：RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧壁和管底形成薄片状沉淀（样品量少的情况下，RNA沉淀散在管侧壁和管底有可能看不到明显沉淀）。部分组织材料由于含有较多的代谢产物，导致沉淀不能聚集而分散在离心管壁上，此时，请沿液面缓慢吸取上清。
七：加入1 mL 75%乙醇(RNase-free ddH2O 配制)漂洗，涡旋震荡15 sec，让沉淀悬浮起来，并上下颠倒数次。
八：室温 12,000 rpm 离心 3 min，小心弃上清。
九：重复步骤 7 和 8 漂洗一遍，小心弃尽上清。
注意：为减少杂质残留，应尽可能的将上清弃干净。建议弃去大部分上清后，短暂点甩离心将残留液体甩至管底，用200 μl 吸头吸尽残留的液体，保留管底及管侧壁的白色RNA沉淀。
十：室温晾干约 1 min，加入适量约 50 -100 μl RNase-free ddH2O 溶解沉淀，轻弹离心管底，让水充分接触管底和管侧壁的沉淀帮助溶解 RNA（可用移液器反复吹打管底和管侧壁的沉淀帮助溶解），使 RNA 沉淀充分溶解。提取的 RNA 产物可以分装后在- 85 - -65°C 长期保存，在- 30 - - 15°C 仅可短期保存。注意：一般稍稍晾干RNA即可，过度干燥会导致RNA难于溶解。
注意：从某些样本提取RNA时，RNA沉淀并非完全聚集在离心管管底，而是也以均匀的薄雾状沉淀吸附在管侧壁上。请注意仔细观察，并用移液器吹打管底和沉淀所在的管侧壁充分溶解所有的RNA。
一：样本处理
1：植物组织：取新鲜植物组织在液氮中充分研磨或将植物组织剪碎后直接在本产品中迅速研磨，每25-50 mg组织加入0.5 ml 本产品，混匀。
2：动物组织：取新鲜或-70°C冻存动物组织尽量剪碎，每15-50 mg组织加入0.5 mL本品，匀浆仪进行匀浆处理。或在液氮中研磨后加入0.5 ml本品混匀。
3：单层培养细胞：尽量去除干净残留培养液后直接往直径3.5 cm的培养板中加0.5mL本产品覆盖并反复吹打裂解细胞。依据培养板的面积而不是依据细胞的数量来决定所需的本产品的量（每10 cm2加0.5 mL）。当本品量不足时可导致抽提RN中污染DNA。
注意：贴壁培养细胞往往不能完全从培养瓶（皿）脱落，这并不意味着裂解不完全，此时细胞膜实际已经完全破裂开，并已释放出全部RNA，继续做即可。
4：细胞悬液：离心收集细胞。在本品中用移液管反复吹打来裂解细胞。每1 - 5×106 的动物细胞，植物细胞或每5×106 细菌加0.5 ml 本产品。在加入前应避免洗涤细胞，因为那样会增加mRNA降解的可能性。破裂某些细菌可能需要使用匀浆器。
5：液体样本：每200 μl（低于200 μl时，可用RNase-free H2O补足）血浆、血清等液体样本，加入0.5mL本品后振荡混匀 。
二：向上述裂解液中加入2/5体积的 RNase-free H2O(每 500μl 本品加 200 μl 水)，剧烈振荡混匀，室温静置5 min。注意：当处理样本量较大50 mg左右时，可延长室温静置时间到10 - 15 min。
三：室温12,000 rpm 离心 15 min。
四：离心后溶液分成上层水相(含 RNA)和下层沉淀(含蛋白质、DNA、多糖等杂质)，小心吸取上层水相至一个新的离心管中。 注意：上层水相约占总体积的90%，如用500 μl 本产品进行提取，上层水相约为630 μl，建议吸取500 μl；提取微量样本时，为减少RNA损失，可以全部转移上清。
五：加入等体积异丙醇，颠倒混匀，室温静置 10 min。
六：室温 12,000 rpm 离心 10 min。通常可以看见白色沉淀，小心弃去上清。注意：RNA沉淀在离心前通常不可见，离心后在管侧壁和管底形成薄片状沉淀（样品量少的情况下，RNA沉淀散在管侧壁和管底有可能看不到明显沉淀）。部分组织材料由于含有较多的代谢产物，导致沉淀不能聚集而分散在离心管壁上，此时，请沿液面缓慢吸取上清。
七：加入1 mL 75%乙醇(RNase-free ddH2O 配制)漂洗，涡旋震荡15 sec，让沉淀悬浮起来，并上下颠倒数次。
八：室温 12,000 rpm 离心 3 min，小心弃上清。
九：重复步骤 7 和 8 漂洗一遍，小心弃尽上清。
注意：为减少杂质残留，应尽可能的将上清弃干净。建议弃去大部分上清后，短暂点甩离心将残留液体甩至管底，用200 μl 吸头吸尽残留的液体，保留管底及管侧壁的白色RNA沉淀。
十：室温晾干约 1 min，加入适量约 50 -100 μl RNase-free ddH2O 溶解沉淀，轻弹离心管底，让水充分接触管底和管侧壁的沉淀帮助溶解 RNA（可用移液器反复吹打管底和管侧壁的沉淀帮助溶解），使 RNA 沉淀充分溶解。提取的 RNA 产物可以分装后在- 85 - -65°C 长期保存，在- 30 - - 15°C 仅可短期保存。注意：一般稍稍晾干RNA即可，过度干燥会导致RNA难于溶解。
注意：从某些样本提取RNA时，RNA沉淀并非完全聚集在离心管管底，而是也以均匀的薄雾状沉淀吸附在管侧壁上。请注意仔细观察，并用移液器吹打管底和沉淀所在的管侧壁充分溶解所有的RNA。
保存条件：
2-8°C
自备试剂：
异丙醇（新开封或提取RNA专用）、75%乙醇(用RNase free H2O配制)、 RNase free H2O或者DEPC 处理过的水。
注意事项：
本产品中含有苯酚，具有毒性和腐蚀性。如果吸入体内、接触皮肤、吞食等会导致中毒、灼伤以及其他身体伤害。使用本制品时应穿戴防护物品，如防护服装、手套、眼罩、面罩等。如果不小心接触，应立即用大量的水冲洗并前往医院治疗。
RNA 最重要的指标就是没有降解完整性高，目前普通的分光光度计包括 Nanodrop 是无法通过测量 OD260/280 和 OD260/230 来确认RNA 是否降解的。判断 RNA 是否降解可以通过跑 1%琼脂糖电泳检测通过直接观察 28S:18S 比值来判断是否降解，或者用采用安捷伦 Bioanalyzer2100 仪器检测，测定 RNA 产物的 RIN 值。
本品与传统 Trizol 一样属于通用型总 RNA 提取试剂，具有和 Trizol 类似的适用范围。绝大部分常规动物组织细胞(如：肝脏、肾脏、脑组织、培养细胞)、简单植物组织(如水稻、玉米、拟南芥、烟草、小麦等)都有良好效果。但是对于多糖多酚植物如棉花，某些难破壁的细菌等样品不适用。
RNA 最重要的指标就是没有降解完整性高，目前普通的分光光度计包括 Nanodrop 是无法通过测量 OD260/280 和 OD260/230 来确认RNA 是否降解的。判断 RNA 是否降解可以通过跑 1%琼脂糖电泳检测通过直接观察 28S:18S 比值来判断是否降解，或者用采用安捷伦 Bioanalyzer2100 仪器检测，测定 RNA 产物的 RIN 值。
本品与传统 Trizol 一样属于通用型总 RNA 提取试剂，具有和 Trizol 类似的适用范围。绝大部分常规动物组织细胞(如：肝脏、肾脏、脑组织、培养细胞)、简单植物组织(如水稻、玉米、拟南芥、烟草、小麦等)都有良好效果。但是对于多糖多酚植物如棉花，某些难破壁的细菌等样品不适用。
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参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
