( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | RNA样本保存液 热销 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | RNAstay | ||||
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1、动物组织:
RNAstay并不破坏或者溶解组织结构,因此浸泡在RNAstay中达到渗透平衡的组织可以从RNAstay中取出,然后切成更小的块,然后放回RNAstay中,下次继续使用。小器官如小鼠肝、肾和脾不需要剪切,可以完整的存放在RNAstay中。
2:植物组织
很多植物组织直接浸泡到RNAstay即可,某些植物有天然渗透屏障如蜡质保护层,需要先破坏蜡质层,便于RNAstay渗透。
3:组织培养细胞
细胞被吹打下来后,离心收集细胞,弃上清,用冰浴的PBS缓冲液洗一次,去除残留培养液。将细胞悬浮在少量PBS缓冲液中,加入5-10倍体积的RNAstay,混匀。
4:血和血浆
红细胞和从血清中分离的白细胞可以用组织培养细胞保存方法一样进行保存。RNAstay也可以保存抗凝全血、血清和血浆。对于全血加入3倍体积的RNAstay,混匀。
5:酵母
离心收集3x108细胞(>12,000g离心2分钟),立刻将细胞团重悬在0.5-1ml的RNAstay中。酵母细胞可以保存在RNAstay中25℃ 8小时,4度一周。如果需要保持更长时间,将酵母细胞放在RNAstay中放置一个小时后,再次>12,000g离心5分钟,将酵母细胞团放入液氮,瞬时冷冻后置于-80˚C保存。
6:细菌
RNAstay不破坏细菌,但是细菌也不能在RNAstay中生长。细菌在RNAstay中保存一个月仍旧可以提出完整的RNA。
RNAstay中样本的RNA提取:
将样本从RNAstay中取出,RNAstay可以直接倒入水池,用自来水冲洗即可,不需要特殊处理。
1:组织
用干净镊子将样本从RNAstay中捞出,用吸水纸吸去残留的RNAstay后,可以和新鲜组织一样按照液氮研磨,然后匀浆处理,按后续标准程序进行RNA提取。
2:细胞
对于保存在RNAstay中的细胞有两种选择,一是去除RNAstay后提取RNA,另一个是直接从细胞和RNAstay混合物中提取。
3:去除RNAstay后提取RNA
存放于RNAstay中的细胞可以承受较高的离心速度(约x5000g)而不破裂,由于每种细胞的强度不同,可以先用不重要的细胞做预实验,以保证在使用的速度下离心不会破坏细胞。另外,可以在离心前加等体积的PBS稀释RNAstay和细胞的混合物,以减少溶液密度,使细胞沉淀下来。
4:不去除RNAstay,直接提取RNA
可以直接加10倍体积的一步法RNA提取试剂(如Trigent,MF034或者MF736)到细胞和RNAstay混合物中,然后按照标准程序提取RNA。
2.无需液氮:使样品的保存不需液氮,干冰或-80˚C冰箱, 尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3.方便运输:处理过的样品能在25˚C保存一周, 使样品邮寄和运输变得容易和便宜, 有利学术合作和交流。
4.多次冻融: 经RNAstay处理的样品可反复冻融多次, 其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA 的质量。
5.稳定性强: RNAstay能减少大规模样品处理中的误差, 增加各次实验数间的可比性,对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
6.兼容性广: 多种总RNA提取试剂都可以用来提取保存在RNAstay内的样品。还可直接用于组织切片, 免疫学和流式细胞分析而不影响RNA 提取的质量。
存储:
1:存放在-80˚C
此法可以长期保存样本。将RNAstay中的样本放于4˚C过夜,然后将样本捞出,尽量去除干净RNAstay液体,然后放置于-80˚C。对于组织培养细胞,则不需要去除RNAstay,直接冷冻于-80˚C,并不会裂解细胞。样本使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
2:存放在-20˚C
将RNAstay中样本放置于4˚C过夜,然后转移到-20˚C。在-20˚C样本不会被冰冻,但是可能会形成一些结晶,这并不会影响将来RNA提取。样本使用时可以在室温融化,并且还可以再次冷冻而不影响RNA的完整性和产量。
3:存放在4˚C
样本可以存放在4˚C一个月。
4:存放在25˚C
存放于25˚C样本的RNA在一周内保持完整,保存2周的样品RNA有轻微降解,勉强能用于Northern 分析,但是质量足够用于Nuclease Protection 分析或者RT-PCR分析。
5:存放于37˚C
存放于37˚C样本的RNA在24小时内保持完整,3天后有部分降解。
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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