( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。2、低速离心,收集细胞沉淀。
3、用培养液重悬细胞沉淀,制备成单细胞悬液,并计数。
4、细胞接种于 96 孔培养板,一般接种密度为 3000~10000 /孔。通常细胞增殖实验每孔加 3000 个细胞,细胞毒性实验每孔加入 6000 个细胞即可。具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定。
5、37℃ 5%CO2继续培养或按照实验具体需要进行培养,一般培养 6~24h。
6、按照实验具体要求,给予 0~20μl 干预药物处理,37℃ 5%CO2继续培养至合适时间。
7、弃培养液,每孔加入 10μl MTT solution 和 100μl 新鲜培养液,在细胞培养箱内继续孵育 4h。
8、弃培养液,每孔加入 110μl DMSO,置摇床上低速振荡 10 min,使结晶物充分溶解。如果紫色结晶较小或较少,溶解的时间会短一些。如果紫色结晶较大或较多,溶解的时间会长一些。
9、在酶联免疫检测仪 570nm 测定各孔吸光度。
2、 胰蛋白酶消化液
3、 低速离心机
4、 96 孔培养板
5、 细胞计数板或计数器
6、 DMSO 或 Formazan solvent
7、 摇床
8、 显微镜
9、 酶联免疫检测仪
| 产品名称 | 规格 | Storage |
| MTT溶液 1mg/mL | 5ML | 5ML |
2、 由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,应注意蒸发问题。
3、 MTT solution 在低温情况下会凝固,使用前请置于室温或 20~25℃水浴至全部融解后使用。
4、 观察 formazan 是否完全溶解,亦可以借助光学显微镜观察。
5、 培养细胞时尽量细菌避免污染。
6、 应注意设立 OD 调零孔和对照。
7、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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