| 中文名称: | FerroOrange 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | FerroOrange | ||||
| 别名: | 二价铁离子检测探针 | ||||
| CAS No: | |||||
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产品简介:
铁是生物体内最丰富的过渡金属元素,它参与各种生理过程活动。 近年来,活细胞中的游离铁受到广泛关注,游离铁最常以其稳定的氧化还原态存在,即亚铁离子 (Fe2+) 和铁离子 (Fe3+)。对研究者来说,在研究细胞内的还原环境,金属转运蛋白和Fe2+的水溶性时,了解Fe2+的行为比了解Fe3+的行为更为重要。 FerroOrange作为一种新型的荧光探针,可对活细胞内的Fe2+进行荧光成像。
操作步骤:
一:工作液的配制
在一支24ug的管中加入35μl DMSO(DMF和乙醇也适用),用移液器吹打混匀,配制得到1mmol/l FerroOrange溶液,用HBSS溶液稀释1 mmol/l 的FerroOrange溶液,制备得到1μmol/l 的FerroOrange工作液。
1 mmol/l FerroOrange储存液在-20°C稳定1个月。 1μmol/l FerroOrange工作液不稳定。需要现配现用。必要时,可使用无血清培养基代替HBSS,血清会增加背景。
二:操作步骤
1:接种细胞于荧光培养皿中,在37°C,5% CO2培养箱中过夜培养。
2:弃去上清液,并用HBSS或无血清培养基洗涤细胞3次。
3:更换含有药物的培养基,在37°C,5% CO2培养箱中培养。请根据药物特性优化培养时间。
4:去除培养基,用HBSS或无血清培养基清洗3次。
5:加入浓度为1 μmol/l的FerroOrange工作液,在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟。无需清洗,培养后直接进行观察。
6:在荧光显微镜下观察细胞。
三:用FerroOrange检测HeLa细胞中的Fe2+
1:将HeLa细胞接种在μ-Slide 8孔板 (ibidi)中,在37°C,5% CO2培养箱中过夜培养。
2:用无血清培养基洗涤3次后更换新鲜的无血清培养基。
3:将硫酸亚铁(II) 铵(用ddH2O配制,浓度为10 mmol/l) 加入细胞中,终浓度: 100 μmol/l。
4:在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟后,用HBSS洗涤3次。
5:将含有FerroOrange (1 μmol/l) 和2,2'-Bipyridyl (Bpy) (100 μmol/l) 的HBSS溶液加到细胞中,在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟。
6:在激光共聚焦显微镜下观察细胞。
四:FerroOrange与各种细胞内的染色试剂共染
1:用不同试剂染色HeLa细胞,清洗细胞。然后将FerroOrange加到细胞中,并用荧光显微镜观察。
在一支24ug的管中加入35μl DMSO(DMF和乙醇也适用),用移液器吹打混匀,配制得到1mmol/l FerroOrange溶液,用HBSS溶液稀释1 mmol/l 的FerroOrange溶液,制备得到1μmol/l 的FerroOrange工作液。
1 mmol/l FerroOrange储存液在-20°C稳定1个月。 1μmol/l FerroOrange工作液不稳定。需要现配现用。必要时,可使用无血清培养基代替HBSS,血清会增加背景。
二:操作步骤
1:接种细胞于荧光培养皿中,在37°C,5% CO2培养箱中过夜培养。
2:弃去上清液,并用HBSS或无血清培养基洗涤细胞3次。
3:更换含有药物的培养基,在37°C,5% CO2培养箱中培养。请根据药物特性优化培养时间。
4:去除培养基,用HBSS或无血清培养基清洗3次。
5:加入浓度为1 μmol/l的FerroOrange工作液,在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟。无需清洗,培养后直接进行观察。
6:在荧光显微镜下观察细胞。
三:用FerroOrange检测HeLa细胞中的Fe2+
1:将HeLa细胞接种在μ-Slide 8孔板 (ibidi)中,在37°C,5% CO2培养箱中过夜培养。
2:用无血清培养基洗涤3次后更换新鲜的无血清培养基。
3:将硫酸亚铁(II) 铵(用ddH2O配制,浓度为10 mmol/l) 加入细胞中,终浓度: 100 μmol/l。
4:在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟后,用HBSS洗涤3次。
5:将含有FerroOrange (1 μmol/l) 和2,2'-Bipyridyl (Bpy) (100 μmol/l) 的HBSS溶液加到细胞中,在37°C,5% CO2培养箱中培养30分钟。
6:在激光共聚焦显微镜下观察细胞。
四:FerroOrange与各种细胞内的染色试剂共染
1:用不同试剂染色HeLa细胞,清洗细胞。然后将FerroOrange加到细胞中,并用荧光显微镜观察。
保存条件:
2-8°C 避光
注意事项:
1:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )