.png)
（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | QAE-葡聚糖凝胶A-25 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | QAE-Sephadex A-25 | ||||
| 别名: | QAE-葡聚糖凝胶A-25 QAE-Sephadex A-25 | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
包装规格：
25g 100g 500g in poly bottel
产品简介：
| 产品编号： | S11533 |
| 产品名称： | QAE 葡聚糖凝胶 A-25 |
| 基质： | 交联葡聚糖 |
| 类型： | 强阴离子 |
| 配基量： | 2-3.4 mmol/g干粉 |
| 颗粒大小： | 干粉 40-120μm |
| 最大流速： | 100cm/h |
| 工作pH值： | 2-12 |
| 稳定性： | 0. 1M 的酸碱以及常规缓冲液 |
| 注：层析柱 10mm*20cm，5cm 柱床高度，流动相为水，25℃ | |
操作步骤：
一、填料的准备
将干粉浸泡于纯水或缓冲液中，液体可以适当多加一些，室温下完全溶胀需 2 天（室温低的情况下可能时间要延长）， 或者用热水浸泡大约 4 个小时（直接倒进去即可，切记不要水浴）。完全溶胀后除去上清液以及上层少许漂浮物，用缓冲液彻底清洗填料。
二、装柱
1：所有实验材料均需平衡至色谱层析操作的温度，所有的缓冲液进行脱气处理（填料不可以超声）；
2：检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
3：用去离子水清洗掉 20%乙醇保存液，用缓冲液配成匀浆。
4：将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。
5：用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
三、平衡柱子
用上样的平衡缓冲液平衡柱子后即可上样。（当流出液的 pH 和电导值与起始缓冲液相同时层析柱即完全平衡）。
四、上样
样品应溶解在起始平衡缓冲液中，或者通过透析或脱盐的方法进行缓冲液置换，将样品缓冲液转移至起始平衡缓冲液。样品的粘度不应超过平衡缓冲液，上样前必须使用 0.45um 微孔滤膜对样品进行过滤。
最常见的程序是让目标分子结合到离子交换柱上，其他杂质流出。然而，在一些情况下，离子交换柱结合杂质而使目标分子流出， 这样的操作也是可以的。
对于目标分子的吸附，选择具有适当 pH 的缓冲液是至关重要的，请参考下表。
缓冲液的离子强度应保持较低，以免干扰样品结合，推荐的操作 pH 应在缓冲液 pKa 的 0.5 个单位内，并且和目标分子的等电点（pI）相差至少一个pH 单位。
五、洗脱
对于DEAE葡聚糖凝胶和QAE 葡聚糖凝胶填料，一般使用盐浓度递增或pH值递减（线性或者阶梯梯度）的方式来进行洗脱。
六、再生
根据样品的性质，通常通过用高离子强度洗脱缓冲液，如 2M NaCl 对柱子进行洗涤，或改变缓冲液 pH，然后在平衡缓冲液中重新平衡来进行再生。如果填料吸附性能发生改变，诸如变性蛋白质或脂质的物质在再生过程中洗脱不下来，则需要通过在位清洗程序 CIP 来清除。
七、在位清洗（CIP）
通过用 2-3 倍柱床体积的 0. 1M NaOH 溶液在位清洗填料，随后立即用大量纯水彻底清洗直至中性，从而除去沉淀的蛋白质、疏水结合的蛋白质和脂蛋白。
将干粉浸泡于纯水或缓冲液中，液体可以适当多加一些，室温下完全溶胀需 2 天（室温低的情况下可能时间要延长）， 或者用热水浸泡大约 4 个小时（直接倒进去即可，切记不要水浴）。完全溶胀后除去上清液以及上层少许漂浮物，用缓冲液彻底清洗填料。
二、装柱
1：所有实验材料均需平衡至色谱层析操作的温度，所有的缓冲液进行脱气处理（填料不可以超声）；
2：检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
3：用去离子水清洗掉 20%乙醇保存液，用缓冲液配成匀浆。
4：将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。
5：用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
三、平衡柱子
用上样的平衡缓冲液平衡柱子后即可上样。（当流出液的 pH 和电导值与起始缓冲液相同时层析柱即完全平衡）。
四、上样
样品应溶解在起始平衡缓冲液中，或者通过透析或脱盐的方法进行缓冲液置换，将样品缓冲液转移至起始平衡缓冲液。样品的粘度不应超过平衡缓冲液，上样前必须使用 0.45um 微孔滤膜对样品进行过滤。
最常见的程序是让目标分子结合到离子交换柱上，其他杂质流出。然而，在一些情况下，离子交换柱结合杂质而使目标分子流出， 这样的操作也是可以的。
对于目标分子的吸附，选择具有适当 pH 的缓冲液是至关重要的，请参考下表。
缓冲液的离子强度应保持较低，以免干扰样品结合，推荐的操作 pH 应在缓冲液 pKa 的 0.5 个单位内，并且和目标分子的等电点（pI）相差至少一个pH 单位。
| 阴离子交换层析专用缓冲液 | ||||
| pH 范围 | 物质 | 浓缩液(mM) | 反离子 | pKa(25℃)1 |
| 4.3-5.3 | N-Methylpiperazine | 20 | Cl- | 4.75 |
| 4.8-5.8 | Piperazine | 20 | Cl-or HCOO- | 5.33 |
| 5.5-6.5 | L-Histidine | 20 | Cl- | 6.04 |
| 6.0-7.0 | Bis-Tris | 20 | Cl- | 6.48 |
| 6.2-7.2 | Bis-Tris propane | 20 | Cl- | 6.65 |
| 8.6-9.6 | Bis-Tris propane | 20 | Cl- | 9.10 |
| 7.3-8.3 | Triethanolamine | 20 | Cl- or CH3OO- | 7.76 |
| 7.6-8.6 | Tris | 20 | Cl- | 8.07 |
| 8.0-9.0 | N-Methyldiethanolamine | 20 | SO42- | 8.52 |
| 8.0-9.0 | N-Methyldiethanolamine | 50 | Cl- or CH3OO- | 8.52 |
| 8.4-9.4 | Diethanolamine | 20 at pH 8.4;50 at pH 8.8 | Cl- | 8.88 |
| 8.4-9.4 | Propane 1,3-diamino | 20 | Cl- | 8.88 |
| 9.0-10.0 | Ethanolamine | 20 | Cl- | 9.50 |
| 9.2-10.2 | Piperazine | 20 | Cl- | 9.73 |
| 10.0-11.0 | Propane 1,3-diamino | 20 | Cl- | 10.55 |
| 10.6-11.6 | Piperidine | 20 | Cl- | 11.12 |
对于DEAE葡聚糖凝胶和QAE 葡聚糖凝胶填料，一般使用盐浓度递增或pH值递减（线性或者阶梯梯度）的方式来进行洗脱。
六、再生
根据样品的性质，通常通过用高离子强度洗脱缓冲液，如 2M NaCl 对柱子进行洗涤，或改变缓冲液 pH，然后在平衡缓冲液中重新平衡来进行再生。如果填料吸附性能发生改变，诸如变性蛋白质或脂质的物质在再生过程中洗脱不下来，则需要通过在位清洗程序 CIP 来清除。
七、在位清洗（CIP）
通过用 2-3 倍柱床体积的 0. 1M NaOH 溶液在位清洗填料，随后立即用大量纯水彻底清洗直至中性，从而除去沉淀的蛋白质、疏水结合的蛋白质和脂蛋白。
保存条件：
室温 密封干燥
注意事项：
1、使用完的填料，用纯水彻底冲洗，然后保存在 20%乙醇中，2-8℃保存，不能冷冻。
2、上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45um的过滤器过滤。
3、在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.1 mol/L。碱会使流速变慢。
4、不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。
5、离子交换介质在选择层析柱时，避免使用细长柱，会增加实验操作压力。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用0.45um的过滤器过滤。
3、在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.1 mol/L。碱会使流速变慢。
4、不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。
5、离子交换介质在选择层析柱时，避免使用细长柱，会增加实验操作压力。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
(2).jpg)
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
