SP-琼脂糖凝胶FF - CAS号查询_生物试剂_化学试剂_分析试剂

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英文名称:	SP-Sepharose FF
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产品说明书

S10188 SP-琼脂糖凝胶FF (普西唐-psaitong)

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包装规格：

25mL 100mL 500mL in poly bottle

产品简介：

本产品具有高化学稳定性、高流速、高载量、好的机械性能、可在位清洗、多次重复使用等特点，非特异性吸附低，回收率高，适用于工业规模生产，适用于在 pH 工作范围内可形成正离子的生物大分子的分离纯化，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的离子交换制备。
凝胶类型：强阳离子
配基量：0.16-0.25mmol/ml
颗粒大小：45~165μm
最大流速：200 cm/h
工作pH 值：4-13
稳定性：0.1M 的酸碱以及常规缓冲液
检测条件：层析柱 16mm×10cm 柱床高 5cm，25℃，流动相为水。

操作步骤：

一、装柱
1、让所有的材料和试剂均平衡至层析实验的温度。配制缓冲液，对所有的缓冲液进行脱气处理（填料不可以超声）。
2、检查层析柱所有部件，特别是过滤网，密封圈，螺旋塞是否紧密，玻璃管是否干净和完整。
3、根据需要量取相应量的凝胶，用去离子水清洗掉 20%乙醇。
4、将柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位，务必使底端无气泡。
5、用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
二、平衡
让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，直到流出液电导和 pH 不变。平衡液是低浓度的缓冲溶液，如 NaAC、PBS 等。
三、上样
1、样品用平衡液配制，样品一定要离心或过滤后上样。盐浓度太大的样品需要处理后再配。
2、样品一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
3、介质对样品组分吸附的程度取决于样品的带电性质、流动相的离子强度和 pH 值。盐浓度小，介质对样品组分吸附较牢。用 CM 介质时，推荐的操作 pH 值应在缓冲液 pKa 的 0.5 个单位内，并且和目标分子的等电点（pI）相差至少一个 pH 单位。
对于目标分子的吸附，选择具有适当 pH 的缓冲液是至关重要的，请参考下表：
阳离子交换层析用缓冲液

pH 范围	组分	浓度(mM)	平衡离子	pKa(25℃)¹
1.4-2.4	马来酸	20	Na⁺	1.92
2.6-3.6	甲基丙二酸	20	Na⁺or Li⁺	3.07
2.6-3.6	柠檬酸	20	Na⁺	3.13
3.3-4.3	乳酸	50	Na⁺	3.86
3.3-4.3	甲酸	50	Na⁺or Li⁺	3.75
3.7-4.7	琥珀酸	50	Na⁺	4.21
5.1-6.1	琥珀酸	50	Na⁺	5.64
4.3-5.3	乙酸	50	Na⁺or Li⁺	4.75
5.2-6.2	甲基丙二酸	50	Na⁺or Li⁺	5.76
5.6-6.6	MES	50	Na⁺or Li⁺	6.27
6.7-7.7	磷酸盐	50	Na⁺	7.20
7.0-8.0	HEPES	50	Na⁺	7.56
7.8-8.8	BICINE	50	Na⁺	8.33
1Handbook of chemistry and physics,83 rd edition,CRC,2002-2003.

四、洗脱
CM 介质可用增大盐浓度或增大 pH 值进行洗脱，常用增大盐浓度的办法洗脱。
五、再生
根据样品的性质，通常通过用高离子强度洗脱缓冲液，如 2M NaCl 对柱子进行洗涤，或改变缓冲液pH，然后在平衡缓冲液中重新平衡来进行再生。如果填料吸附性能发生改变，诸如变性蛋白质或脂质的物质在再生过程中洗脱不下来，则需要通过在位清洗程序 CIP 来清除。
六、在位清洗（CIP）
通过用 2-3 倍柱床体积的 0.1M NaOH 溶液清洗填料，随后立即用大量纯水彻底清洗直至中性，从而除去沉淀的蛋白质、疏水结合的蛋白质和脂蛋白。

保存条件：

2-8℃

注意事项：

1、使用完的填料，用纯水彻底冲洗，最后保存在 4℃（保存溶液为 20%乙醇），不能冷冻。
2、上样之前，样品必须经过膜过滤及去除色素，否则杂质及色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。所有的缓冲液均需要用 0.45um 的过滤器过滤。
3、在使用过程中，避免使用高浓度的强酸强碱，酸和碱的浓度应低于 0.1M。碱会使流速变慢。
4、不同的样品，吸附和洗脱方法不相同，可以根据相关的文献进行。
5、离子交换介质在选择层析柱时，避免使用细长柱，会增加实验操作压力。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

UN码：

HazardClass：

危害声明：

安全说明：

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