( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 碱性磷酸酶-PAS联合染色液 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | ALP-PAS combined staining solution | ||||
| CAS No: | |||||
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2、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内, 4℃固定 2~5min。
3、切片入ALP 孵育液(阴性对照切片入ALP对照液),置于37℃温箱;冰冻切片孵育 5~15min,石蜡切片孵育2~ 12h;流水洗2min后入蒸馏水。
4、入硝酸钴溶液, 置于 37℃温箱染色 5min, 流水洗 5min 后入蒸馏水。
5、上述过程中配制 ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水稀释 50倍,即为 ALP 硫化工作液,即配即用;切片入硫化工作液,孵育 2min。
6、流水洗 10min 后入蒸馏水。
7、入高碘酸溶液室温氧化 2 ~5min。蒸馏水换洗 3 次。
8、入 Schiff 试剂置于 37℃温箱染色 10 ~30min。
9、按亚硫酸溶液:蒸馏水 =3:1 的比例配制亚硫酸工作液,清洗 3 次,每次 2min,入蒸馏水。
10、冰冻切片直接用甘油明胶封片;石蜡切片脱水,常规二甲苯或脱蜡透明液透明,中性树胶封片。
2、温箱或水浴锅、染色缸
| 组分名称 | PS2111-6×50mL | Storage |
| 试剂(A): ALP 孵育液 | 50ml | 4℃ 避光 |
| 试剂(B): 硝酸钴溶液 | 50ml | RT |
| 试剂(C): ALP 硫化溶液 | 2×1ml | 4℃ 避光 |
| 试剂(D): 高碘酸溶液 | 50ml | 4℃ 避光 |
| 试剂(E): Schiff 试剂 | 50ml | 4℃ 避光 |
| 试剂(F): 亚硫酸溶液 | 50ml | RT |
| 试剂(G): ALP 对照液 | 10ml | 4℃ 避光 |
| 碱性磷酸酶活性部位 | 黑色 |
| PAS 阳性物质 | 紫红色 |
阴性对照:
1、ALP 对照液为不含底物的孵育液。取相同的切片入 ALP 对照液,其余同上。结果为阴性。
2、(备选方案)切片进入 ALP 孵育液前, 可先经碘液和 5%硫代硫酸钠溶液各 3min, 充分水洗后再进行孵育等步骤,可用此法作阴性对照。
2、碱性磷酸酶显色后,经高碘酸应特别小心,严格控制时间,否则褪色。
3、ALP 孵育液、ALP 硫化液易失效,最好分成小份储存,一经开启立即使用。
4、ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
5、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
6、组织在石蜡包埋时,温度不宜高于 56℃。应使用熔点为 52~54℃的石蜡进行浸蜡,浸蜡时间要短,否则酶活性会减弱或消失。
7、不纯的二甲苯会分解黑色沉淀,宜选用 AR 级以上的二甲苯。
8、试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
9、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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