( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 类器官冻存液 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | Organoid Cryopreservation Medium | ||||
| 别名: | 类器官冻存液 Organoid Cryopreservation Medium | ||||
| CAS No: | |||||
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为了获得最佳结果,在冷冻前,类器官或细胞应处于生长旺盛阶段(对数生长中期),细胞活率最好大于 90%。
1:类器官(或细胞)已消化至寡细胞团或单细胞悬液并终止,使用自动细胞计数器(也可以使用手动方法)确定细胞数量和活率,并计算所需的冻存液体积,以达到最终冻存细胞密度为 1×106至1×107细胞/毫升。
2:300 g离心3分钟,无菌吸弃上清液而不干扰细胞沉淀,向离心后的类器官(或细胞)中加入预冷的(2-8°C)类器官冻存液,吹打混匀后迅速转移至细胞冻存管中(根据冻存管制造商的规格要求分装,例如,在2毫升冻存管中放入1-1.5mL 细胞悬液)。
3:将冻存管放入程序降温盒内(程序降温盒须提前平衡至室温或4°C),随后立即将降温盒放入-80°C超低温冰箱中程序降温(每分钟约降低 1°C)。
4:6小时后或次日,将冷冻细胞低温转移至液氮中长期存储。
二:类器官(或细胞)复苏
1:从冻存容器中取出细胞,并迅速在37°C的水浴中解冻(<1分钟)至冻存管内冻存物仅剩少量冰渣残留时。
2:将细胞悬液转移到无菌的15mL锥型离心管中,加入5-10倍体积预热的基础培养基,轻轻混匀。
3:300 g 离心 3 分钟,观察确认是否有细胞沉淀,无菌吸弃上清液而不干扰细胞沉淀。
4:根据后续实验需求,使用适量的预热类器官完全培养基重悬细胞,用于后续类器官(或细胞)的培养。
2:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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