操作步骤:
1:收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,分于96孔板,每孔180μL,3000-10000 个细胞/孔。
2:置37°C、5%CO2 温箱培养使细胞贴壁,培养6-24小时。
3:加入适当浓度的受试化合物,继续培养适当时间。
4:小心吸去上清,加入90μL新鲜培养液,再加入 10μL MTT 溶液,继续培养4 h。
5:吸掉上清,每孔加入110μL Formazan 溶解液,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光值。
6:同时设置调零孔(培养基、MTT、 Formazan 溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、 Formazan 溶解液),每组设定3复孔。
2:置37°C、5%CO2 温箱培养使细胞贴壁,培养6-24小时。
3:加入适当浓度的受试化合物,继续培养适当时间。
4:小心吸去上清,加入90μL新鲜培养液,再加入 10μL MTT 溶液,继续培养4 h。
5:吸掉上清,每孔加入110μL Formazan 溶解液,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪490 nm处测量各孔的吸光值。
6:同时设置调零孔(培养基、MTT、 Formazan 溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、 Formazan 溶解液),每组设定3复孔。
产品描述:
MTT 可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成结晶状的深紫色产物 formazan,在特定溶剂存在的 情况下,可以被完全溶解,然后通过酶标仪可以测定 490nm 波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快, 则吸光度越高;细胞毒性越大,则吸光度越低。
组分:
组分 | 500T | 100T | 保存 |
MTT溶液 | 5mL | 5mL×2 | -20℃ |
SDS-HCL Formazan 溶解液 | 60mL | 60mL×2 | 2-8℃ |
保存条件:
-20℃,避光,有效期1年。
注意事项:
1:由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,需注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
2:MTT 溶液为黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。 Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以37°C水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2:MTT 溶液为黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。 Formazan 溶解液结冻或产生沉淀时可以37°C水浴孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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