产品简介:
脱氧核糖核酸中的α—脱氧核糖在酸性环境中变成ω—羟基—γ酮基戊醛与二苯胺试剂一起加热产生蓝色化合物,在595nm处有最大的吸收,在每毫升含DNA20~400微克范围内,光密度与DNA的浓度成正比,在反应液中加入少量乙醛,可以提高反应的灵敏度。
操作步骤:
(一)DNA标准曲线的制作
取6支试管,编号,按下表加入试剂
加毕,摇匀,于60℃恒温水浴中保温1小时,(或于沸水中煮沸15分钟,冷却测0.D595nm值。)以吸光度为纵坐标,DNA含量(ug/ml)为横坐标,绘制标准曲线。
(二)样品的测定
取2支试管,各加0.2毫升的待测液(内含DNA应在标准曲线可测范围之内)加蒸馏水稀释至0.5毫升,再加1毫升二苯胺试剂,摇匀,其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的吸光度值,从标准曲线上查出相当该吸光度DNA的含量,按下式计算出样品中DNA的百分含量。
DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数
取6支试管,编号,按下表加入试剂
编号 | 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
DNA标准溶液(μl) | 0 | 100 | 200 | 300 | 400 | 500 |
蒸馏水(μl) | 500 | 400 | 300 | 200 | 100 | 0 |
二苯胺试剂(μl) | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
(二)样品的测定
取2支试管,各加0.2毫升的待测液(内含DNA应在标准曲线可测范围之内)加蒸馏水稀释至0.5毫升,再加1毫升二苯胺试剂,摇匀,其操作步骤与标准曲线的制作相同。根据测得的吸光度值,从标准曲线上查出相当该吸光度DNA的含量,按下式计算出样品中DNA的百分含量。
DNA含量/毫升待测液=标准曲线查得值×稀释倍数
组分:
产品名称 | PS0477-100T | Storage |
试剂(A):DNA标准溶液(200μg/mL) | 2×1ml | -20°C |
试剂(B):二苯胺溶液 | 100ml | RT 避光 |
试剂(C): 乙醛溶液 | 1ml | 4°C |
临用前试剂B:试剂C=100:1比例混匀即为二苯胺试剂。 |
保存条件:
4℃,避光,6个月
注意事项:
1.二茉胺法测定DNA含量灵敏度不高,待测样品中DNA含量低于50mg/L即难以测定。乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量,又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰,能显著提高测定的灵敏度。
2.样品中含有少量RNA并不影响测定,但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物,故能干扰DNA定理。
3、本产品仅供科研使用,严禁用于人体。
2.样品中含有少量RNA并不影响测定,但因蛋白质、多种糖类及其衍生物、芳香醛、羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物,故能干扰DNA定理。
3、本产品仅供科研使用,严禁用于人体。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )