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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | |||||
| CAS No: | 分子式: | 分子量: | |||
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产品简介：
DAB辣根过氧化物酶显色试剂盒(DAB Horseradish Peroxidase Color Development Kit)是一种依据辣根过氧化物酶(HRP)结合显色，用于免疫组化显色、原位杂交显色或 Western 、 Southern 、 Northern 、 EMSA 等膜显色的试剂盒 。 DAB 即 3,3N-Diaminobenzidine Tertrahydrochloride, 是辣根过氧化物酶的常用底物，在辣根过 氧化物酶的催化下,DAB 会产生棕色沉淀，该棕色沉淀不溶于水和乙醇，因此在 DAB 显色 后, 还可以使用溶于乙醇的染料进行后续染色。
DAB 辣根过氧化物酶显色试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可用于 Western 等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测以及细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
DAB 辣根过氧化物酶显色试剂盒可以用于细胞或组织在免疫组化或原位杂交时结合的辣根过氧化物酶显色，也可用于 Western 等结合有辣根过氧化物酶的膜的显色检测以及细胞或组织内源性的辣根过氧化物酶显色。
操作步骤：
1、常规组织切片、细胞样品、膜与辣根过氧化物酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后， 用适当洗涤液洗涤 3～5 次，每次 3～5min。对于检测内源性辣根过氧化物酶的组织或细胞 样品，在适当固定后也可用洗涤液洗涤 3～5 次，每次 3～5min。
2、按试剂(A):试剂(B):试剂(C)=5000:5000:3 比例混合, 即为 DAB 显色工作液，即配即用。
3、洗涤组织，去除洗涤液，加入适量 DAB 显色工作液，确保覆盖样品。
4、按实验条件室温避光孵育一定时间，直至显色至预期深浅。
5、去除 DAB 显色工作液，用蒸馏水清洗 1～2 次即可终止显色反应。
6、对组织切片或细胞样品，反应终止后如有必要可用中性红染色，便于观察；对于膜染色，反终止后可室温晾干避光保存。
2、按试剂(A):试剂(B):试剂(C)=5000:5000:3 比例混合, 即为 DAB 显色工作液，即配即用。
3、洗涤组织，去除洗涤液，加入适量 DAB 显色工作液，确保覆盖样品。
4、按实验条件室温避光孵育一定时间，直至显色至预期深浅。
5、去除 DAB 显色工作液，用蒸馏水清洗 1～2 次即可终止显色反应。
6、对组织切片或细胞样品，反应终止后如有必要可用中性红染色，便于观察；对于膜染色，反终止后可室温晾干避光保存。
自备材料：
1、洗涤液、蒸馏水
组分：
| 产品名称 |
规格 2×50ml |
Storage |
| 试剂(A): DAB显色液A | 50ml | -20℃ 避光 |
| 试剂(B): DAB显色液B | 50ml | -20℃ |
| 试剂(C): DAB 氧化剂C | 100μl | 4℃ 避光 |
常见问题：
1、 背景显色太深
①在免疫组化时如果背景显色太深，考虑使用适当的封闭液进行封闭，例如选购适当的封闭 液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。也应请注意选购经过适当吸附的二抗，以 减小二抗的非特异性吸附。
②在进行含内源性过氧化氢酶的免疫组化时，如果背景显色太深，需注意灭活内源性过氧化 氢酶。可以在 4 倍体积甲醇中加入 1 倍体积 3%过氧化氢，混匀后用于内源性过氧化氢酶的 灭活。
③可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。
④选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间。
2、没有显色或显色太弱
①适当提高一抗或二抗的浓度；检测二抗效果，滴 1 滴稀释二抗在膜上，检测二抗是否可 以被正常显色。
②考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
③适当延长显色时间，另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。
①在免疫组化时如果背景显色太深，考虑使用适当的封闭液进行封闭，例如选购适当的封闭 液或使用和一抗相同来源的血清(10%)进行封闭。也应请注意选购经过适当吸附的二抗，以 减小二抗的非特异性吸附。
②在进行含内源性过氧化氢酶的免疫组化时，如果背景显色太深，需注意灭活内源性过氧化 氢酶。可以在 4 倍体积甲醇中加入 1 倍体积 3%过氧化氢，混匀后用于内源性过氧化氢酶的 灭活。
③可以考虑缩短显色时间，或降低二抗浓度。
④选择适当强度的洗涤液，或延长洗涤时间。
2、没有显色或显色太弱
①适当提高一抗或二抗的浓度；检测二抗效果，滴 1 滴稀释二抗在膜上，检测二抗是否可 以被正常显色。
②考虑使用更加灵敏的放大检测体系，例如使用生物素检测体系。
③适当延长显色时间，另外确定抗原修复是否对于使用的一抗是必需的。
保存条件：
-20℃,避光,12个月
注意事项：
1、该试剂盒给予的 DAB 氧化剂多于实际使用量，请按比例使用。
2、DAB 氧化剂易挥发，请注意密闭保存，以免效率下降，一旦开封请尽快使用。
3、DAB 氧化剂有腐蚀性，请勿直接接触于人皮肤、毛发等。
4、试剂(A)、试剂(B)避免反复冻融，以免显色效率下降。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
2、DAB 氧化剂易挥发，请注意密闭保存，以免效率下降，一旦开封请尽快使用。
3、DAB 氧化剂有腐蚀性，请勿直接接触于人皮肤、毛发等。
4、试剂(A)、试剂(B)避免反复冻融，以免显色效率下降。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
分析证书(COA)
Lot/Batch Number
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
