中文名称: 乙酰胆碱酯酶染色液  一键复制产品信息
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分子量:
PS0288 乙酰胆碱酯酶染色液 亚铁氰化铜法 (普西唐-psaitong)
产品简介:
胆碱酯酶(cholinesterase,ChE)属于特异性酯酶,可分为两大类。一类是乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)又称为真性胆碱酯酶,能水解乙酰胆碱,起到生理的调节作用;另一类为胆碱酯酶,又称假性胆碱酯酶(Pseudocholinesterase,PsChE),能水解胆碱的酯而不能水解乙酰胆碱酯。乙酰胆碱酯酶主要存在于神经元的胞质内、神经不肌肉接头处即所谓运动终板处;PsChE主要存在于血浆、胰腺、唾液腺内,生理功能尚不明确。乙酰胆碱酯酶染色液(亚铁氰化铜法)属于Karnovsky和Roots法,其染色原理是乙酰胆碱酯酶水解碘化乙酰硫代胆碱,释放乙酸和硫代胆碱。硫代胆碱中的硫氢基(-SH)把铁氰化钾还原为亚铁氰化钾,后者与铜离子结合形成不溶性的红棕色至深棕色的亚铁氰化铜沉淀在酶活性部位而显示出来。其优点是操作简便、酯酶的扩散较少,其缺点是对底物对组织的渗透性较差。该染色液可用于观察中枢神经和周围神经纤维等疾病情况下的改变,亦有利于巨结肠症、肠神经元发育异常的诊断。有机农药中毒时可使该酶受到抑制,酶的活性下降而呈阴性反应。
操作步骤:
1、冰冻切片,厚6μm,不固定或置于遇冷的10%甲醛钙固定10min。
2、蒸馏水洗3次,每次1min。
3、配制AChE孵育液:临用前,取A2加入至A1中,使后者完全溶解,即为A12混合液,4℃保存。取适量的A12混合液、A3、A4、A5、A6,按A12混合液:A3:A4:A5:A6=1:7:1:1:0.2充分混合,即为AChE孵育液,6h内使用。
注意:如果想显示AChE和ChE,即无需区分AChE和ChE,无需加入Iso-OMPA。
4、切片入预温的AChE孵育液中,37℃避光孵育1~3h(一般不超过6h),至切片呈淡棕色时取出。
5、蒸馏水洗,镜下观察如活性部位仍较淡,可于蒸馏水洗后再进行孵育,至反应合适为止。
6、流水冲洗5min。
7、滴加苏木素染色液浅染细胞核3~5min。
8、封固,镜检。

阴性对照(可选):
取配制好的 AChE 孵育液,按 AChE 孵育液:AChE-ChE 抑制剂=50:1 充分混合,取相同切片入含 AChE 抑制剂的 AChE 孵育液中,其余同上,呈阴性反应。
自备材料:
1、10%甲醛钙固定液、二甲苯或环保脱蜡透明液、甘油明胶
2、恒温箱或水浴锅、染色缸
3、光学显微镜
组分:
产品名称 规格 规格 Storage
试剂(A):  AChE孵育液 A1: AChE Iodide 10mg 25mg 4℃ 避光
A2: AChE Buffer A 2ml 5ml RT
A3: AChE Buffer B 14ml 35ml 4℃ 避光
A4: AChE Buffer C  2ml 5ml 4℃ 避光
A5: AChE Buffer D 2ml 5ml 4℃ 避光
A6: Iso-OMPA 0.4ml 1ml -20℃ 避光
试剂(B): REGAL苏木素染色液  20ml 50ml 4℃ 避光
试剂(C):AChE-ChE 抑制剂 0.4ml 1ml 4℃ 避光
染色结果:
AChE酶活性部位 红棕至深棕色
细胞核 蓝色
保存条件:
-20℃,避光,6个月
注意事项:
1、本染色液适用于冰冻切片,同时应减少切片在室温暴露的时间。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)

分析证书(COA)

Lot/Batch Number

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):
请在下列方框中输入相关信息后点击计算,可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法:
举例:给药剂量是10 mg/kg,每只动物体重20g,给药体积100 μL, TargetMol | Animal experiments  一共给药动物10只,您使用的配方为5%TargetMol | reagent DMSO 30%PEG300 5%Tween 80 60%Saline/PBS/ddH2O, 那么您的工作液浓度为2mg/mL
母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSOTargetMol | reagent  ( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。
体内配方的制备方法: 取 50μLDMSOTargetMol | reagent  母液,添加 300 μLPEG300TargetMol | reagent  混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2OTargetMol | reagent ​ 混匀澄清

方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
 
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例,并不是具体某个试剂的配制,请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
第一步:请输入基本实验信息(考虑到实验过程中的损耗,建议多配一只动物的药量)
第二步:请输入动物体内配方组成(配方适用于不溶于水的药物;不同批次药物配方比例不同,请联系普西唐客服为您提供正确的澄清溶液配方)
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计算结果:

工作液浓度 mg/ml;

DMSO母液配制方法 mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,

体内配方配制方法μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。

1. 首先保证母液是澄清的;
           2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算,您也可以参考 更多