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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | 分散酶II 文献数量：2 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Dispase II | ||||
| 别名: | 中性蛋白酶II Dispase II | ||||
| CAS No: | 42613-33-2 | ||||
| CAS No: | 42613-33-2 | ||||
| MDL: | MFCD02253017 | ||||
包装规格：
500mg in glass bottle
产品简介：
分散酶 II（中性蛋白酶）是一种氨基内肽酶，可水解非极性氨基酸残基的 N 端肽键。该序列常见于胶原蛋白。分散酶 II 具有温和的蛋白水解作用，可用于原代细胞的分离和常规传代。分散酶 II 相对温和，在生理温度和 pH 值条件下具有良好的解离能力，通常可维持细胞膜完整性。
溶解性：
在10mM NaAc(pH 7.5)和5mM CaAc的缓冲液中制备50U/mL的储备溶液，储存在4°C。
体外研究：
使用方法
1、溶液配制
1）用 DPBS 缓冲盐溶液（无钙镁离子）溶解适量本品冻干粉，配制成 10 mg/mL 的储存液，用 0.22 μM 滤膜过滤除菌。
2）使用时用 DPBS 将上述储存液稀释到工作液浓度即可，用于细胞分离时其常用工作浓度为 0.6-2.4 U/mL。
注：不推荐使用高于 2.4 U/mL的工作浓度。
2、组织的解离
1）用无菌的小刀或者剪刀将组织剪成 3-4 mm的组织块；
2）用无菌 PBS 清洗组织块；
3）向组织块中加入 Dispase II 溶液（工作浓度为 0.6-2.4 U/mL），并确保组织块全部浸没于 Dispase 溶液中。
4）37℃ 孵育，孵育过程缓慢搅拌直至组织块全部解离。
注：一般对于较难解离组织，1h即可达到分离目的，但更长时间（如数小时）的孵育也不会明显影响细胞活性。
5）如有需要，可将上述消化产物通过无菌不锈钢网筛过滤，以分开单细胞与残留的组织块。或者待大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞，若是需要，换用新鲜 dispase 溶液以进一步解离残留组织。
6）离心沉淀细胞，倒掉酶溶液；
7）用培养基重悬细胞沉淀，并于常规条件下培养细胞。
3、细胞传代
1）利用 Dispase 溶液（37℃预热）浸没细胞，于 37℃孵育5 min；
2）吸除上述溶液，继续于 37℃孵育 10 min；
3）显微镜下观察细胞分离情况，如需要，可进一步孵育 15 min；
4）利用细胞培养基悬浮细胞，轻轻旋转使得细胞沉淀用培养基清洗细胞；
5）换用新鲜细胞培养液重悬细胞，并按常规方法进行细胞铺板。
1、溶液配制
1）用 DPBS 缓冲盐溶液（无钙镁离子）溶解适量本品冻干粉，配制成 10 mg/mL 的储存液，用 0.22 μM 滤膜过滤除菌。
2）使用时用 DPBS 将上述储存液稀释到工作液浓度即可，用于细胞分离时其常用工作浓度为 0.6-2.4 U/mL。
注：不推荐使用高于 2.4 U/mL的工作浓度。
2、组织的解离
1）用无菌的小刀或者剪刀将组织剪成 3-4 mm的组织块；
2）用无菌 PBS 清洗组织块；
3）向组织块中加入 Dispase II 溶液（工作浓度为 0.6-2.4 U/mL），并确保组织块全部浸没于 Dispase 溶液中。
4）37℃ 孵育，孵育过程缓慢搅拌直至组织块全部解离。
注：一般对于较难解离组织，1h即可达到分离目的，但更长时间（如数小时）的孵育也不会明显影响细胞活性。
5）如有需要，可将上述消化产物通过无菌不锈钢网筛过滤，以分开单细胞与残留的组织块。或者待大块组织沉淀后轻轻倒出上层细胞，若是需要，换用新鲜 dispase 溶液以进一步解离残留组织。
6）离心沉淀细胞，倒掉酶溶液；
7）用培养基重悬细胞沉淀，并于常规条件下培养细胞。
3、细胞传代
1）利用 Dispase 溶液（37℃预热）浸没细胞，于 37℃孵育5 min；
2）吸除上述溶液，继续于 37℃孵育 10 min；
3）显微镜下观察细胞分离情况，如需要，可进一步孵育 15 min；
4）利用细胞培养基悬浮细胞，轻轻旋转使得细胞沉淀用培养基清洗细胞；
5）换用新鲜细胞培养液重悬细胞，并按常规方法进行细胞铺板。
保存条件：
2-8℃
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
客户发表文献
