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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | Duplex-specific nuclease(DSN) 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Duplex-specific nuclease(DSN) | ||||
| 别名: | 双链特异性核酸酶 Duplex-specific nuclease(DSN) | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品是能够选择性降解双链DNA 和DNA-RNA 杂交体中的DNA，但对单链核酸分子和双链RNA 几乎没有活性。DSN 可以精确区分10-12 bp 的DNA-DNA 双链单核苷酸错配，当dsDNA大于10bp、DNA-RNA 大于15 bp时DSN能产生切割活性。
操作步骤：
1：按表1建议配制体系反应液（冰上操作）
2：轻轻混匀，短暂离心。
3：65°C，孵育7-20 min。
4：加入5μL 2×DSN Stop Buffer，轻轻混匀，短暂离心， 65℃，孵育5 min 以终止反应。
表1：
2：轻轻混匀，短暂离心。
3：65°C，孵育7-20 min。
4：加入5μL 2×DSN Stop Buffer，轻轻混匀，短暂离心， 65℃，孵育5 min 以终止反应。
表1：
| 组分 | 10μL 反应体系 |
| 50-500 ng DNA | x μL |
| 10×DSN Reaction Buffer | 1 μL |
| DSN | y μL |
| ddH2O | up to 10 μL |
酶活定义：
在标准反应体系下，25℃，50μg/mL 小牛胸腺DNA 吸光度每分钟增加0.001 定义为1个单位。
组分：
| 组分 | 组分名称 | 规格(50U) | 储存 |
| 组分A | DSN (0.1U/μL) | 500 μL | -20℃ |
| 组分B | 10×DSN Reaction Buffer | 0.5mL | -20℃ |
| 组分C | 2×DSN Stop Buffer | 1mL | -20℃ |
保存条件：
-20℃，有效期2 年，避免反复冻融。
注意事项：
1：10×DSN Reaction Buffer的组分为：500 mM Tris-HCl, pH 8.0, 50 mM MgCl2, 10 mM DTT。
2：2×DSN Stop Buffer的组分为：10 mM EDTA。
3：关于失活或抑制：DSN 对盐离子浓度高度敏感（例如在0.2 M NaCl 下活性降低10 倍）; EDTA 可抑制DSN 活性；高温可致使失去活性（例如在80°C 时，DSN 仅保留10%的活性）。
4：DSN 消化时间取决于样本和特定的实验要求。孵育温度可以在35°C 至70°C 之间变化；在这种情况下，孵育时间和DSN 浓度需要另外优化。
5：DSN 在二价阳离子（Mn2+、Co2+或Mg2+）存在下有活性。大多数应用中的Mg2+离子浓度应至少为5 mM。
6：DSN 活性的最适温度为60°C。
7：DSN对蛋白酶K 处理（37°C 孵育30 分钟）具有耐受性。
8：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2：2×DSN Stop Buffer的组分为：10 mM EDTA。
3：关于失活或抑制：DSN 对盐离子浓度高度敏感（例如在0.2 M NaCl 下活性降低10 倍）; EDTA 可抑制DSN 活性；高温可致使失去活性（例如在80°C 时，DSN 仅保留10%的活性）。
4：DSN 消化时间取决于样本和特定的实验要求。孵育温度可以在35°C 至70°C 之间变化；在这种情况下，孵育时间和DSN 浓度需要另外优化。
5：DSN 在二价阳离子（Mn2+、Co2+或Mg2+）存在下有活性。大多数应用中的Mg2+离子浓度应至少为5 mM。
6：DSN 活性的最适温度为60°C。
7：DSN对蛋白酶K 处理（37°C 孵育30 分钟）具有耐受性。
8：为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
