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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | Cal-520 AM 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Cal-520 AM | ||||
| 别名: | 钙离子荧光探针Cal520AM | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品是一种细胞渗透性钙离子指示剂，相比传统指示剂具有长波长、高灵敏度及超过100倍荧光增强等特性，使其成为检测细胞钙信号的理想指示剂。其高信噪比与优异的胞内滞留性，使Cal-520钙检测体系成为评估GPCR及钙通道靶点、筛选相应激动剂与拮抗剂的可靠工具。
在表达特定GPCR（G蛋白偶联受体）或钙离子通道的细胞中，钙信号传导可通过预载Cal-520 AM进行检测。Cal-520 AM可自由穿过细胞膜进入胞内。进入细胞后，其疏水性封闭基团会被酯酶水解，从而生成带负电荷的荧光染料并滞留于细胞内。该染料与钙离子结合后，荧光强度会大幅增强。当使用激动剂刺激细胞时，受体会引发胞内钙离子释放，从而显著增强Cal-520的荧光信号。
在表达特定GPCR（G蛋白偶联受体）或钙离子通道的细胞中，钙信号传导可通过预载Cal-520 AM进行检测。Cal-520 AM可自由穿过细胞膜进入胞内。进入细胞后，其疏水性封闭基团会被酯酶水解，从而生成带负电荷的荧光染料并滞留于细胞内。该染料与钙离子结合后，荧光强度会大幅增强。当使用激动剂刺激细胞时，受体会引发胞内钙离子释放，从而显著增强Cal-520的荧光信号。
Ex/Em：
492/515 nm
操作步骤：
一：储备液的配制
用无水DMSO制备2mM-5mM的储备液。储备液分装为单次用量，-20°C避光保存，避免反复冻融。
二：工作溶液配制
在所选缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中加入0.04% Pluronic F-127，配制2-20 µM的Cal-520 AM工作液。对于多数细胞系，推荐终浓度为4-5μM。具体染料加载浓度需根据实验条件优化。若细胞存在有机阴离子转运体，可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒（孔板终浓度0.5-1 mM）以减少水解后染料的泄漏。
三：操作步骤—活细胞加载AM酯的推荐方案，请根据实际需求调整。
1：将细胞于生长培养基中孵育过夜。
2：次日向细胞板中加入 Cal-520 AM工作液，若待测化合物与血清存在干扰，加载前需更换为新鲜HHBS缓冲液。
3：将加载染料的细胞板置于37°C培养箱孵育1-2小时。
4：移除工作液，更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液以清除多余探针。
5：加入刺激剂后，立即使用配备FITC滤光片的荧光显微镜或者具备程序化液体处理系统的荧光酶标仪（如FDSS、FLIPR或FlexStation）Ex/Em = 490/525 nm，截止波长515 nm检测荧光信号。
用无水DMSO制备2mM-5mM的储备液。储备液分装为单次用量，-20°C避光保存，避免反复冻融。
二：工作溶液配制
在所选缓冲液（如Hanks和Hepes缓冲液）中加入0.04% Pluronic F-127，配制2-20 µM的Cal-520 AM工作液。对于多数细胞系，推荐终浓度为4-5μM。具体染料加载浓度需根据实验条件优化。若细胞存在有机阴离子转运体，可在工作液中加入1-2 mM丙磺舒（孔板终浓度0.5-1 mM）以减少水解后染料的泄漏。
三：操作步骤—活细胞加载AM酯的推荐方案，请根据实际需求调整。
1：将细胞于生长培养基中孵育过夜。
2：次日向细胞板中加入 Cal-520 AM工作液，若待测化合物与血清存在干扰，加载前需更换为新鲜HHBS缓冲液。
3：将加载染料的细胞板置于37°C培养箱孵育1-2小时。
4：移除工作液，更换为HHBS或含阴离子转运抑制剂（如1 mM丙磺舒）的缓冲液以清除多余探针。
5：加入刺激剂后，立即使用配备FITC滤光片的荧光显微镜或者具备程序化液体处理系统的荧光酶标仪（如FDSS、FLIPR或FlexStation）Ex/Em = 490/525 nm，截止波长515 nm检测荧光信号。
产品特点：
1：信噪比显著提升。
2：即便不使用丙磺舒，仍能实现优异的胞内滞留效果。
3：可取代传统的钙离子指示剂（如 Fluo-3 与 Fluo-4）。
2：即便不使用丙磺舒，仍能实现优异的胞内滞留效果。
3：可取代传统的钙离子指示剂（如 Fluo-3 与 Fluo-4）。
保存条件：
-20℃
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
