| 中文名称: | CP-466722 促销 一键复制产品信息 | ||||
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| 英文名称: | CP-466722 | ||||
| 别名: | 1-(6,7-二甲氧基-4-喹唑啉基)-3-(2-吡啶基)-1H-1,2,4-三唑-5-胺;CP466722 抑制剂;CP-466722 国华试剂 2-(6,7-dimethoxyquinazolin-4-yl)-5-pyridin-2-yl-1,2,4-triazol-3-amine | ||||
| CAS No: | 1080622-86-1 | 分子式: | C17H15N7O2 | 分子量: | 349.35 |
| CAS No: | 1080622-86-1 | ||||
| 分子式: | C17H15N7O2 | ||||
| 分子量: | 349.35 | ||||
包装规格：
5mg 25mg 100mg in glass bottle
产品简介：
是一种可逆的 ATM 抑制剂，IC50 值为 0.41 μM，但对 PI3K，PIKK 家族蛋白没有作用。
溶解性：
溶于DMSO（7 mg/mL 加热）
储备液保存：
-80°C, 2 years
-20°C, 1 year
-20°C, 1 year
靶点：
ATM:4.1 μM (IC50)
体外研究：
CP-466722 (CP466722，6-10 μM) 抑制 IR 诱导的 ATM 激酶活性，并且这种抑制可以迅速完全逆转。CP466722 (6，10 μM) 抑制小鼠细胞中的 p53 诱导和 ATM 依赖性磷酸化，但CP466722 不能抑制 Chk1 的 ATR 活性和 ATR 依赖性磷酸化。CP466722 (6 μM) 破坏细胞中依赖于ATM 的细胞周期检查点。CP466722 (1 μM) 完全抑制 MCF7 细胞中 ATM 依赖性磷酸化。CP466722 (10 μM) 降低MCF7 细胞中的 pKAP1 磷酸化，IC50 为 0.41 μM。CP466722 (10 μM) 抑制 pATM 和pKAP1 信号。CP-466722 (CP466722，5-50 μM) 比 MCF-7 癌细胞更能抑制 SKBr-3 癌细胞的增殖。处理48 小时后，CP466722 (10 μM) 也略微增加 G1 期 MCF-7 和 SKBr-3 细胞的比例。
激酶实验：
体外激酶试验:
采用体外激酶试验筛选小分子 ATM 激酶活性抑制剂，进行 ELISA 试验测量 ATM 下游靶点p53 的磷酸化状态。重组 GST-p53(1-101)和全长 Flag 标记的 ATM & ATR 纯化后用于 ELISA 和体外激酶试验。简而言之，Nunc 96孔 Maxisorp 板用 2μg 纯化的重组 GST-p53(1-101)的 PBS 溶液涂覆过夜(4 °C)。所有随后的培养在室温下进行。用 0.05%v/v-Tween/PBS 洗涤平板，然后在 CP-466722 存在或不存在下加入包含纯化的重组全长ATM 激酶的 80μL 终体积反应缓冲液(20 mM HEPES，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，10 mM MnCl2，1 mM DTT 和1 μM ATP)中。CP-466722 (10μM)重复两份加入板中，激酶试验培养 90 min。将板用 0.05%v/v-Tween/PBS洗涤，用 1%w/v-BSA/PBS 密封 1 小时并漂洗，然后将抗磷酸(Ser15)-p53 抗体(1:1000/PBS)加入板中，再培育 1 小时。为减少非特异性结合，先将板用 0.05%v/v-Tween/PBS 清洗，再与 HRP-耦合的山羊抗兔子IgG二级抗体(1:5000/PBS)孵育 1 小时。连接到磷酸化 GST-p53(1–101)蛋白质的二级抗体用TMB 底物试剂检测。将板培育 15-30 分钟，停止反应(终浓度 1 M H2SO4)，然后测定吸光度(λ=450nm)。在ELISA 试验中抑制 ATM 激酶活性的 CP-466722，在体外激酶试验中能够抑制 ATM/ATR 激酶活性。使用抗磷酸(Ser15)-p53抗体的免疫印迹法读出 ATM/ATR 抑制情况。CP466722 (10 μM)对一组市售激酶的进一步作用分析通过Upstate 进行。
采用体外激酶试验筛选小分子 ATM 激酶活性抑制剂，进行 ELISA 试验测量 ATM 下游靶点p53 的磷酸化状态。重组 GST-p53(1-101)和全长 Flag 标记的 ATM & ATR 纯化后用于 ELISA 和体外激酶试验。简而言之，Nunc 96孔 Maxisorp 板用 2μg 纯化的重组 GST-p53(1-101)的 PBS 溶液涂覆过夜(4 °C)。所有随后的培养在室温下进行。用 0.05%v/v-Tween/PBS 洗涤平板，然后在 CP-466722 存在或不存在下加入包含纯化的重组全长ATM 激酶的 80μL 终体积反应缓冲液(20 mM HEPES，50 mM NaCl，10 mM MgCl2，10 mM MnCl2，1 mM DTT 和1 μM ATP)中。CP-466722 (10μM)重复两份加入板中，激酶试验培养 90 min。将板用 0.05%v/v-Tween/PBS洗涤，用 1%w/v-BSA/PBS 密封 1 小时并漂洗，然后将抗磷酸(Ser15)-p53 抗体(1:1000/PBS)加入板中，再培育 1 小时。为减少非特异性结合，先将板用 0.05%v/v-Tween/PBS 清洗，再与 HRP-耦合的山羊抗兔子IgG二级抗体(1:5000/PBS)孵育 1 小时。连接到磷酸化 GST-p53(1–101)蛋白质的二级抗体用TMB 底物试剂检测。将板培育 15-30 分钟，停止反应(终浓度 1 M H2SO4)，然后测定吸光度(λ=450nm)。在ELISA 试验中抑制 ATM 激酶活性的 CP-466722，在体外激酶试验中能够抑制 ATM/ATR 激酶活性。使用抗磷酸(Ser15)-p53抗体的免疫印迹法读出 ATM/ATR 抑制情况。CP466722 (10 μM)对一组市售激酶的进一步作用分析通过Upstate 进行。
细胞实验：
细胞系：HeLa 和 A-T
浓度：0-6 μM
处理时间：4 小时
方法：HeLa 或 A-T (表达 hTERT 的 GM02052)细胞以一式三份接种，培育 24 小时。细胞用IR (0-10Gy)预处理前，先用 DMSO，CP466722 或 KU55933 预处理。然后将细胞培育 4 小时，移除培养基，细胞用PBS 清洗，胰蛋白酶化，计数并重新接种(2000 细胞/板，10 cm 平板)在缺乏药物的培养基中，培育10 天。在菌落计数前，将细胞清洗(PBS)，着色(PBS，0.0037%v/v-甲醛， 0.1%w/v-结晶紫)，漂洗(dH2O)并干燥。确定的群体(>50 细胞)以一个存活菌落计数，数据以存活菌落数相对于对照板+/− SE 的百分比计算。
浓度：0-6 μM
处理时间：4 小时
方法：HeLa 或 A-T (表达 hTERT 的 GM02052)细胞以一式三份接种，培育 24 小时。细胞用IR (0-10Gy)预处理前，先用 DMSO，CP466722 或 KU55933 预处理。然后将细胞培育 4 小时，移除培养基，细胞用PBS 清洗，胰蛋白酶化，计数并重新接种(2000 细胞/板，10 cm 平板)在缺乏药物的培养基中，培育10 天。在菌落计数前，将细胞清洗(PBS)，着色(PBS，0.0037%v/v-甲醛， 0.1%w/v-结晶紫)，漂洗(dH2O)并干燥。确定的群体(>50 细胞)以一个存活菌落计数，数据以存活菌落数相对于对照板+/− SE 的百分比计算。
保存条件：
-20℃
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
