产品简介:
一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
操作步骤:
使用前用生理盐水或 PBS 将 Hoechst 33342 染色液稀释 100 倍,即为工作液。
1、对于固定的细胞或组织:
a、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则 先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染 色,则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33342 工作液,覆盖住样品即可;对于悬浮细 胞,至少加入待染色样品 3 倍体积的工作液,混匀。室温放置 3-5
c、吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3
d、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的 细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织:
a、加入适当量 Hoechst 33342 工作液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔 需加入 1mL 工作液,对于 96 孔板一个孔需加入 100μL 工作液。
b、在适宜于细胞培养的温度下培养 20-30 分钟。弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可 进行荧光检测。
1、对于固定的细胞或组织:
a、对于细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则 先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行 Hoechst 33342 染色。如果不需要进行其它染 色,则直接进行后续的 Hoechst 33342 染色。
b、对于贴壁细胞或组织切片,加入少量 Hoechst 33342 工作液,覆盖住样品即可;对于悬浮细 胞,至少加入待染色样品 3 倍体积的工作液,混匀。室温放置 3-5
c、吸除 Hoechst 33342 染色液,用 TBST、PBS 或生理盐水洗涤 2-3
d、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时,会看到凋亡细胞的 细胞核呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织:
a、加入适当量 Hoechst 33342 工作液,必须充分覆盖住待染色的样品,通常对于六孔板一个孔 需加入 1mL 工作液,对于 96 孔板一个孔需加入 100μL 工作液。
b、在适宜于细胞培养的温度下培养 20-30 分钟。弃染色液,用 PBS 或培养液洗涤 2-3 次即可 进行荧光检测。
保存条件:
-20℃ 避光 一年
注意事项:
1、荧光染料都存在淬灭的问题,为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。建议染色后尽量当天完成检测,活细胞或组织染色后应立即观察。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、以上信息仅做参考交流之用。
2、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
3、以上信息仅做参考交流之用。
UN码:
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危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )