( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。| 中文名称: | 2',7'-二氯荧光素二乙酸酯 促销 热销 文献数量:2 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | 2′,7′-Dichlorofluorescin diacetate | ||||
| 别名: | 活性氧ROS荧光探针 DCFH-DA | ||||
| CAS No: | 4091-99-0 | 分子式: | C24H16Cl2O7 | 分子量: | 487.29 |
| CAS No: | 4091-99-0 | ||||
| 分子式: | C24H16Cl2O7 | ||||
| 分子量: | 487.29 | ||||
| MDL: | MFCD00128955 | ||||
应用包括响应氧化代谢的活性氧的灵敏快速定量;用于吞噬细胞中的氧化产物的微孔板检测;以及定量多孔髓样分化测定。
1.制备1-10mM DMSO储备溶液。 应将未使用的DMSO储备溶液等分到单次使用的小瓶中并储存在-20℃,避光。
2.在生理缓冲液(如PBS,HBSS,HEPES)中使染料的工作浓度为1-10μM。根据经验确定最佳工作浓度。
3.从生长培养基中取出细胞,将染料工作溶液(来自步骤2)加入细胞中,并在室温或37℃下孵育细胞5至60分钟。
4.去除染料工作溶液; 用预热的HBSS洗涤,加入预热的HBSS或生长培养基,在最佳温度下孵育。 最佳孵育时间可能相差较大,因为一些细胞类型通常表现出低水平的酯酶活性。
5.在将细胞暴露于实验诱导物之前,确定加载细胞样品的基线荧光强度。
6.阴性对照应评估如下:
A:检查未染色的细胞在绿色发射范围内的自发荧光。
B:对于流式细胞术,确定染料加载和处理后细胞的正向和侧向散射不变。细胞尺寸的变化可能与处理或毒性反应引起的起泡或收缩有关。
C:检测有没有诱导物的染料和缓冲液/培养基的无细胞混合物的荧光。在没有细胞外酯酶和其他氧化酶的情况下,荧光随时间的逐渐增加可能与自发水解,大气氧化或光诱导有关。
D:检查已经保存在生长培养基或简单缓冲液中的未处理(对照)负载细胞的荧光。在染料加载孵育后,健康细胞应表现出低水平的荧光,在实验期间相对稳定; 然而,可以观察到荧光逐渐增加(由于自动氧化)或减少(由于细胞中的染料损失或光漂白)。 在没有任何刺激或诱导的情况下,健康的未经处理的细胞中的荧光突发可以指示细胞死亡或一些其他氧化事件的进展。
7.可以用H2O2或叔丁基过氧化氢(TBHP)刺激阳性对照至终浓度~100μM(基于细胞的敏感性和反应增加或减少剂量)。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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