基本信息
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产品编号： |
D10121 |
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产品名称： |
Daphnetin |
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CAS: |
486-35-1 |
储存条件 |
粉末 |
室温 |
四年 |
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分子式： |
溶于液体 |
-80℃ |
六个月 |
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分子量 |
178.14 |
-20℃ |
一个月 |
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化学名： |
7,8-Dihydroxycoumarin |
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Solubility (25°C)： |
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体外:
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DMSO |
50mg/mL (280.68mM; Need ultrasonic) |
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Ethanol |
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Water |
< 0.1mg/mL (insoluble) |
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体内(现配现用): |
1.请依序添加每种溶剂：10% DMSO→40% PEG300→5% Tween-80→45% saline Solubility: ≥ 2.5mg/mL (14.03mM); Clear solution |
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此⽅案可获得 ≥ 2.5mg/mL (14.03mM，饱和度未知) 的澄清溶液。 以 1mL ⼯作液为例，取 100μL 25.0mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加⼊ 50μL Tween-80，混合均匀；然后继续加⼊ 450μL ⽣理盐⽔定容⾄ 1mL。 |
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2.请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in saline) Solubility: ≥ 2.5mg/mL (14.03mM); Clear solution |
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此⽅案可获得 ≥ 2.5mg/mL (14.03mM，饱和度未知) 的澄清溶液。 以 1mL ⼯作液为例，取 100μL 25.0mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900μL 20% 的 SBE-β-CD ⽣理盐⽔⽔溶液中，混合均匀。 |
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3.请依序添加每种溶剂：10% DMSO→90% corn oil Solubility: ≥ 2.5mg/mL (14.03mM); Clear solution |
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此⽅案可获得 ≥ 2.5mg/mL (14.03mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此⽅案不适⽤于实验周期在半个⽉以上的实验。 以 1mL ⼯作液为例，取 100μL 25.0mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900μL ⽟⽶油中，混合均匀。 |
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＜1mg/ml表示微溶或不溶。 |
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普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 |
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请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 |
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制备储备液
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浓度
溶液体积 质量 |
1mg |
5mg |
10mg |
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1mM |
5.6136mL |
28.0678mL |
56.1356mL |
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5mM |
1.1227mL |
5.6136mL |
11.2271mL |
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10mM |
0.5614mL |
2.8068mL |
5.6136mL |
生物活性
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产品描述 |
一种活性内酯，存在于植物中。也是一种蛋白激酶抑制剂。 |
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靶点 |
EGFR 7.67μM |
PKA 9.33μM |
PKC 25.01μM |
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体外研究 |
Daphnetin不仅能有效抑制EGF受体催化外源底物酪氨酸磷酸化，还能抑制PKA和PKC的活性Daphnetin处理24小时会抑制MCF-7雌激素应答的人类癌细胞系生长，IC50 为73μM。 Daphnetin在50μM浓度下就可以降低细胞周期蛋白D1的水平。Daphnetin能防止皮质神经受地塞米松影响而降低细胞活性，且这种效应是剂量依赖的。Daphnetin能以特殊的方式抑制内源或重组TaPRK的活性，这种作用也是剂量依赖的。25μM 到40μM的 Daphnetin对恶性疟原虫引起的次黄嘌呤掺入达到50%的抑制率。Daphnetin抑制ERK1/ERK2的促有丝分裂的信号传导。 |
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体内研究 |
140mg/kg 的Daphnetin能减少子宫的重量39.5%。用2到8mg/kg Daphnetin处理能增强应激小鼠在水迷宫测试和强迫游泳测试中的表现。Daphnetin能显著延长P. yoelli感染的小鼠的存活时间。 |
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推荐实验方法(仅供参考)
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激酶实验： |
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蛋白激酶(PKC)和cAMP 依赖的蛋白激酶(PKA)活性实验: |
首先检测PKC和PKA活性。简单来说， 5mL PKC或PKA 与 5mL脂类制剂混合，脂类制剂中含有100mM phorbol 12-myristate 13-acetate, 2.8mg/mL phosphatidyl serine和 Triton X-100 混合的胶团（用于PKC分析）或者5mL 40mM cAMP 溶于50mM Tris-HCl, pH 7.5, （用于PKA分析）以及5mL daphnetin. 加入10mL的 PKC底物溶液（包含250mM乙酰化髓鞘碱性蛋白，100mM ATP, 5mM CaCl2, 10mMmgCl2, 20mM Tris-HCl, pH 7.5）或10mL的 PKA底物溶液（包含200mM Kemptide, 400mM ATP, 40mMmgCl2, 1mg/mL BSA, 50mM Tris-HCl, pH 7.5和20-25 mCi/mL[g-32P] ATP）开始反应。25°C孵育5分钟，立刻向磷酸纤维素圆盘中的每个20mL混合物加入1% H3PO4。当圆盘中的游离的[g-32P] ATP移除后，用闪烁计数器计算多肽结合的32P的数量。 |
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细胞实验： |
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细胞系： |
MCF-7 细胞 |
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浓度： |
12.5μM, 25μM, 50μM, 100μM, 200μM |
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处理时间： |
24 小时, 48 小时, 72 小时 |
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方法： |
利用MTT法和MCF-7肿瘤细胞评估Daphnetin对细胞生长的抑制效果。这一方法基于活细胞中可溶性四唑盐被线粒体还原。还原产物为不溶性的紫色结晶甲瓒，将其溶于DMSO并在570nm处利用分光光度法测量。甲瓒含量与活细胞数量成正比。96孔板中每孔接种3 × 103个细胞并加入 200μL含有相应浓度daphnetin的培养基。检测5个不同Daphnetin浓度 (12.5μM, 25μM, 50μM, 100μM, 200μM)。24小时，48小时和72小时后，与溶剂处理的对照组细胞相比来估计Daphnetin对细胞增殖的抑制率。 (PI% = [(T/C) − 1] × 100). PI = 增值抑制; T = 处理组, C = 对照组. 通过最小二乘法浓度减去响应回归计算IC50。 |
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动物实验： |
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动物模型 |
发育不完全的CD1 (Im)雌性小鼠 |
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剂量 |
35mg/kg, 70mg/kg和140mg/kg |
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给药处理 |
皮下给药 |
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
