Apoptosis(细胞凋亡)

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分重要。同时,了解细胞死亡和存活机制也是毒理分析和药物研发应用中一个非常关键的内容。

细胞凋亡的研究方法一般包括:Caspase活性检测、DNA片段化分析、膜变化检测(AnnexinV染色、膜电位、线粒体功能完整性分析检测实验)及细胞形态学检测。

Caspase活性检测:
Caspase (cysteinyl-aspartic acid proteases)是一个家族的蛋白酶,它的活化是细胞凋亡的典型特征。一旦一个Caspase 酶被激发,就会激活一系列其他的Caspas酶,裂解相应的胞浆胞核底物,最终导致细胞凋亡。Caspase 3 活化发生在凋亡早期,并在凋亡过程中起重要作用。Caspase 3 Activity Assay (CASP3C) 基于荧光免疫酶测定,能在体外特异性地对Caspase 3进行定量。

DNA片段化分析:
DNA降解也是细胞凋亡的典型标志之一,其降解产物可分为两种,即高分子量的单链DNA缺口以及低分子量DNA片断(单链及寡聚核小体)。单链DNA缺口有特定的检测方法,即利用酶催化,将特定核酸标记到游离的3'-OH末端,这种方法被称为 TUNEL。

膜变化检测:
凋亡细胞另一个生化特征是细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸从胞质转至胞外。膜联蛋白中的Annexin V,是一种磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸有强亲和力。

细胞形态学检测:
细胞形态的变化如胞膜皱摺或出泡、核染色质致密、胞质浓缩等,都可作为细胞凋亡的证据。一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA特异性染料有:Hoechst 33342 (B70035),Hoechst 33258 (B70007), DAPI (D10112)。三种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。

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CAS No:923564-51-6 分子式:C47H55ClF3N5O6S3 分子量:974.61
N10040 ≥98%(HPLC) 【psaitong】
Venetoclax

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CAS No:1257044-40-8 分子式:C45H50ClN7O7S 分子量:868.44
V10012 ≥98%(HPLC) 【psaitong】
Obatoclax mesylate

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CAS No:803712-79-0 分子式:C21H23N3O4S 分子量:413.49
O10012 ≥98%(HPLC) 【psaitong】
BH3I-1

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CAS No:300817-68-9 分子式:C15H14BrNS2O3 分子量:400.31
B70011 ≥97% (HPLC) 【psaitong】
HA 14-1

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CAS No:65673-63-4 分子式:C17H17BrN2O5 分子量:409.23
H10027 ≥98% (HPLC) 【psaitong】
RITA

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CAS No:213261-59-7 分子式:C14H12O3S2 分子量:292.37
R10016 ≥97%(HPLC) 【psaitong】
Tenovin-3

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1-(4-AMino-phenyl)-3-(4-tert-butyl-benzoyl)-thiourea

CAS No:1011301-27-1 分子式:C18H21N3Os 分子量:327.44
T10029 ≥98% (HPLC) 【psaitong】
Pifithrin-α

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Pifithrin-α

CAS No:63208-82-2 分子式:C16H18N2Os.HBr 分子量:367.3
P10054 ≥97% (HPLC) 【psaitong】
环状抑制剂-α氢溴酸盐

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Cyclic Pifithrin-α hydrobromide

CAS No:511296-88-1 分子式:C16H16N2S.HBr 分子量:349.29
C10037 ≥98% (HPLC) 【psaitong】
RSL3

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RSL3

CAS No:1219810-16-8 分子式:C23H21ClN2O5 分子量:440.88
R10018 ≥98% (HPLC) 【psaitong】