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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | β-半乳糖苷酶染色试剂盒 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | β-Galactosidase Staining Kit | ||||
| 别名: | X-GAL;SA-β-Ga | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品是一种基于衰老时衰老相关β-半乳糖苷酶(Senescence-associated β-galactosidase, SA-β-Gal)活性水平上调而快速、便捷地对衰老3D细胞或类器官进行染色检测的试剂盒。在普通的光学显微镜下就可以观测到3D细胞或类器官的衰老情况。细胞衰老也被认为是生物体抑制肿瘤的一种方式,同时也是生物体老化的一种潜在原因。本产品可以用于培养细胞的衰老检测,也可以用于组织切片的衰老检测。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。本试剂盒仅染色衰老细胞,对正常培养的衰老前的细胞、静止期细胞、永生细胞或肿瘤细胞等不会染色。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测 100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。
β-半乳糖苷酶染色试剂盒以X-Gal为底物,在衰老特异性的β半乳糖苷酶催化下会生成深蓝色产物,光学显微镜下很容易观察到变成蓝色的表达β-半乳糖苷酶的细胞或组织。本试剂盒仅染色衰老细胞,对正常培养的衰老前的细胞、静止期细胞、永生细胞或肿瘤细胞等不会染色。对于组织切片或组织块,可以检测的样品数量视样品的大小而定,对于普通的切片也至少足够检测 100个样品,使用6孔板测定,足够测定100个样品。
操作步骤：
一:贴壁细胞染色
1：对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS 洗涤1次,加入1mL β-Gal固定液,室温固定15min。对于其它类型的培养板,固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
2：吸除细胞固定液,用1×PBS 洗涤细胞3次,每次3min。
3：按照比例配置染色工作液。吸除β-Gal清洗液,每孔加入 1mL染色工作液。
4：37℃孵育过夜12-24h,可以用封板膜或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。
5：普通光学显微镜下观寨。如不能及时观察计数,可以去除染色工作液,加入2mL PBS,2-8℃可以保存数天；或者加上水性明胶封片剂封片后,可以保存较长时间。
二：悬浮细胞染色
1：离心收集细胞至1.5mL离心管内,用PBS 洗涤1次,加入1mlLβ-Gal固定液,室温固定15min。固定时可以在摇床上缓慢摇动,以避免细胞结成团块。
2：离心,吸除细胞固定液,用1×PBS 洗涤细胞3次,每次3min。
3：按照比例配置染色工作液。离心,吸除β-Gal清洗液,每管加入 0.5-1mL染色工作液。37℃孵育过夜12-24h。
4：取部分染色后的细胞,滴加到载玻片上或6孔板内,普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数,可以离心,去除染色工作液,然后加入1mL PBS, 2-8℃可以保存数天。如果离心,取细胞用于涂片,加上封片液封片后,2-8℃可以保存较长时间。
三：组织切片染色
1：对于酶保护处理过的冷冻切片,直接按照以下步骤进行。
2：滴加适当体积的β-Gal固定液,以充分盖住组织为宜,室温固定不少于15min。
3：用PBS 浸泡洗涤组织3次,每次不少于5min。
4：按照比例配置染色工作液。滴加适当量的染色工作液。
5：37℃孵育过夜 12-24h。建议使用湿盒防止挥发或把整.。
6：普通光学显微镜下观寨。如不能及时观察,可使用水性明胶封片剂封片保存。
1：对于6孔板中培养的细胞,吸除细胞培养液,用PBS 洗涤1次,加入1mL β-Gal固定液,室温固定15min。对于其它类型的培养板,固定液及后续溶液的用量参照此比例进行操作。
2：吸除细胞固定液,用1×PBS 洗涤细胞3次,每次3min。
3：按照比例配置染色工作液。吸除β-Gal清洗液,每孔加入 1mL染色工作液。
4：37℃孵育过夜12-24h,可以用封板膜或保鲜膜封住6孔板防止蒸发。
5：普通光学显微镜下观寨。如不能及时观察计数,可以去除染色工作液,加入2mL PBS,2-8℃可以保存数天；或者加上水性明胶封片剂封片后,可以保存较长时间。
二：悬浮细胞染色
1：离心收集细胞至1.5mL离心管内,用PBS 洗涤1次,加入1mlLβ-Gal固定液,室温固定15min。固定时可以在摇床上缓慢摇动,以避免细胞结成团块。
2：离心,吸除细胞固定液,用1×PBS 洗涤细胞3次,每次3min。
3：按照比例配置染色工作液。离心,吸除β-Gal清洗液,每管加入 0.5-1mL染色工作液。37℃孵育过夜12-24h。
4：取部分染色后的细胞,滴加到载玻片上或6孔板内,普通光学显微镜下观察。如不能及时观察计数,可以离心,去除染色工作液,然后加入1mL PBS, 2-8℃可以保存数天。如果离心,取细胞用于涂片,加上封片液封片后,2-8℃可以保存较长时间。
三：组织切片染色
1：对于酶保护处理过的冷冻切片,直接按照以下步骤进行。
2：滴加适当体积的β-Gal固定液,以充分盖住组织为宜,室温固定不少于15min。
3：用PBS 浸泡洗涤组织3次,每次不少于5min。
4：按照比例配置染色工作液。滴加适当量的染色工作液。
5：37℃孵育过夜 12-24h。建议使用湿盒防止挥发或把整.。
6：普通光学显微镜下观寨。如不能及时观察,可使用水性明胶封片剂封片保存。
组分：
| 组分 | 规格(100T) | 储存 |
| 组分A:β-Gal固定液 | 100mL | 4℃,避光 |
| 组分B：X-Gal 溶液 | 5mL | -20℃ 避光 |
| 组分C：β-Gal 染色液A | 1mL | 4℃,避光 |
| 组分D：β-Gal 染色液B | 1mL | 4℃,避光 |
| 组分E：β-Gal 染色液C | 100mL | 4℃ |
| 按照试剂B:C:D:E=5:1:1:93的比例配置染色工作液，现配现用。 | ||
保存条件：
-20℃，避光保存，12个月。
注意事项：
1：配置染色工作液推荐使用聚丙烯(PP)容器,不能使用聚苯乙烯(PS) 容器配制染色工作液。染色过程中的37℃孵育不能在二氧化碳培养箱中进行,易造成假阳性染色。
2：β-Gal固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。
3：半乳糖苷酶稳定性较差,在使用多聚甲醛固定或制备石蜡切片时极易灭活,建议制备速冻切片。
4：爬片或涂片如需长期保存可染色后蒸馏水洗2次,倾去多余液体晾干后中性树胶封片。
5：为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2：β-Gal固定液有一定的腐蚀性和毒性,操作时请注意防护。
3：半乳糖苷酶稳定性较差,在使用多聚甲醛固定或制备石蜡切片时极易灭活,建议制备速冻切片。
4：爬片或涂片如需长期保存可染色后蒸馏水洗2次,倾去多余液体晾干后中性树胶封片。
5：为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
