| 中文名称: | PHA-767491 hydrochloride 促销 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | PHA-767491 hydrochloride | ||||
| 别名: | 1,5,6,7-四氢-2-(4-吡啶基)-4H-吡咯并[3,2-C]吡啶-4-酮盐酸盐 CAY-10572 hydrochloride | ||||
| CAS No: | 942425-68-5 | 分子式: | C12H12ClN3O | 分子量: | 249.7 |
| CAS No: | 942425-68-5 | ||||
| 分子式: | C12H12ClN3O | ||||
| 分子量: | 249.7 | ||||
基本信息
|
产品编号：P10806 |
|||||
|
产品名称：PHA-767491 hydrochloride |
|||||
|
CAS: |
942425-68-5 |
储存条件 |
粉末 |
-20℃ |
四年 |
|
|
|
||||
|
分子式： |
溶于液体 |
-80℃ |
两年 |
||
|
分子量 |
249.70 |
-20℃ |
一个月 |
||
|
化学名： |
1,5,6,7-Tetrahydro-2-(4-pyridinyl)-4H-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one hydrochloride |
||||
|
Solubility (25°C) |
体外 |
DMSO |
24mg/mL (96.11mM) |
||
|
Ethanol |
Insoluble |
||||
|
Water |
Insoluble |
||||
|
体内（现配现用） |
5% DMSO+30% PEG 300+2% Tween 80+ddH2O |
1mg/mL |
|||
|
＜1mg/ml表示微溶或不溶。 |
|||||
|
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。 |
|||||
|
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。 |
|||||
制备储备液
|
浓度
溶液体积 质量 |
1mg |
5mg |
10mg |
|
1mM |
4.0048mL |
20.0240mL |
40.0481mL |
|
5mM |
0.8010mL |
4.0048mL |
8.0096mL |
|
10mM |
0.4005mL |
2.0024mL |
4.0048mL |
生物活性
|
产品描述 |
一种 Cdc7-Dbf4 (DDK)/Cdk9 的双重抑制剂，IC50 值分别为 10nM 和 34nM。 |
||||
|
靶点/IC50 |
Cdc7 |
CDK9 |
GSK-3β |
CDK2 |
CDK1 |
|
10nM |
34nM |
220nM |
240nM |
250nM |
|
|
体外研究 |
PHA-767491 20倍选择性作用于Cdk1, Cdk2 和 GSK3-β,50倍选择性作用于MK2和Cdk5，100倍选择性作用于 PLK1 和 CHK2。PHA-767491 抑制多种人类细胞系增殖，IC50为从作用于SF-268 细胞的0.86μM 到 作用于K562细胞的5.87μM, 且按p53非依赖方式几乎显著诱导所有细胞凋亡，而5-FU 或Gemcitabine 只作用于一小部分细胞系。不同于现在的DNA合成抑制剂，5μM PHA-767491 阻断 DNA 复制开始而不是复制叉的进展，归因于Cdc7 激酶和Mcm2 在Cdc7依赖性Ser40 位点的磷酸化受特定抑制。 3μM PHA-767491 处理抗ABT-737的 OCI-LY1 和 SU-DHL-4 细胞，显著降低上调的Mcl-1水平，可能因为 Cdk9受抑制, 导致对ABT-737的敏感性恢复。 1μM PHA-767491作用于静态慢性淋巴细胞白血病(CLL)细胞，可观察到直接线粒体依赖性的促凋亡效果，EC50为0.34-0.97μM。5μM PHA-767491 处理 CD154 和IL-4刺激的增殖CLL细胞，通过抑制Cdc7而不是触发细胞死亡而废除DNA合成。 |
||||
|
体内研究 |
PHA-767491 每天处理两次，持续5天，显著抑制HL60移植瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，按20 mg/kg 和30 mg/kg剂量处理，TGI分别为50% 和92%,这种效果在A2780, Mx-1, 和 HCT-116移植瘤模型和 DMBA诱导的乳腺癌中也很显著, 与Cdc7受抑制相关，随后降低Mcm2在Cdc7依赖性Ser40 位点的磷酸化。 |
||||
|
特征 |
PHA-767491是第一个通过控制 DNA 复制起始而不是延伸阶段而影响机制的抑制剂。 |
||||
推荐实验方法(仅供参考)
|
激酶实验： |
|
|
体外激酶实验 |
使用强阴离子交换实验测定PHA-767491 (IC50)抑制Cdc7 和 Cdk9的情况。对于每种酶，初步确定ATP的绝对Km值和特定底物，然后在最佳 ATP/33Pγ-ATP 混合物(2Km) 和底物 (5Km) 浓度进行每组实验。在含 50 mM Hepes pH 7.9, 15mM MgCl2,2mM β-甘油磷酸, 0.2mg/mL BSA, 1mM DTT, 3μM Na3VO4,2KmATP/33Pγ-ATP 混合物, 5Km Mcm2 (aa 10-294), 37nM 重组Cdc7/Dbf4，和浓度不断增高PHA-767491的buffer中进行 Cdc7激酶实验，终体积为 30μL, 在 25oC下温育1小时。使用 50nM 重组 Cdk9/cyclin T 在 50mM HEPES pH 7.5, 10mM MgCl2, 1mM DTT, 3μM Na3VO4, 2Km ATP/33Pγ-ATP 混合物, 5Km RNA聚合酶CDT 肽，和浓度不断增高PHA-767491的buffer中进行Cdk9激酶反应，终体积为30μL,在 25oC下温育1小时。温育后，加入150μL 树脂/甲酸盐 (pH 3.0)，终止反应，捕获未反应的33Pγ-ATP, 使其与溶液中磷酸化礼物分离。1小时后，50μL上清液转移到Optiplate 96 孔板上。加入 150μL Microscint 40后，在TopCount上计算放射性。 |
|
细胞实验: |
|
|
细胞系 |
HeLa, MCF7, HCT-116, U2OS, A2780, K562, SF-539, SF-268, Ovcar8, SW480, COLO205, HCT-15, Jurkat, PC3, 和 NHDF |
|
浓度 |
溶于DMSO,终浓度为~ 20μM |
|
处理时间 |
24 或72 小时 |
|
方法 |
使用 PHA-767491处理细胞24 或 72小时。裂解细胞，使用耐高温萤火虫荧光素酶实验测定孔中ATP含量，用来衡量存活细胞数。通过含特定促发光底物的荧光素酶实验，测量 caspase-3 和 caspase-7的活化，衡量实验组和对照组的比率。通过流式细胞仪测量DNA复制，衡量核苷酸类似物BrdU渗透进DNA的量。 |
|
动物实验: |
|
|
动物模型 |
皮下移植 HL60细胞的雌性SCID小鼠,皮下移植 HCT116细胞,A2780 或Mx-1细胞的雄性Hsd，无胸腺nu-nu 小鼠,和携带DMBA诱导的乳腺癌的雌性Sprague-Dawley大鼠 |
|
剂量 |
~50mg/kg |
|
给药处理 |
静脉注射或口服处理，每天两次。 |
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
