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（ 母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。| 中文名称: | Rapid PCR MasterMix 一键复制产品信息 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | Rapid PCR MasterMix | ||||
| 别名: | 快速PCR MasterMix | ||||
| CAS No: | |||||
| CAS No: | |||||
产品简介：
本产品包含超速PCR聚合酶、延伸增强因子、dNTP以及优化的超速缓冲体系，扩增速度可达10 sec/kb，适用于快速PCR反应，1 kb以内的极限扩增速度可达1sec/kb，大幅节省PCR反应时间。预先配制的2×Master Mix 用于PCR反应时只需加入引物和模板即可进行扩增，减少了移液操作，提高了检测通量和结果的一致性。本品扩增性能优，保存稳定性高，适用于8 kb以内基因组为模板的PCR扩增以及12 kb以内质粒和λDNA为模板的PCR扩增。扩增体系中加入的保护剂使得2×Master Mix反复冻融后仍可保持稳定活性。本品含有电泳缓冲液和红色染料，可在反应结束后直接进行电泳，使用方便。PCR产物的 3'端带A，可直接克隆至T载体克隆。并适用于无缝克隆试剂盒。
操作步骤：
1：建议 PCR 体系设置
见表1
2：建议PCR循环条件
见表2
表1：
表2：
见表1
2：建议PCR循环条件
见表2
表1：
| Component | 25 μl Reaction | 50 μl Reaction | Final Concentration |
| 2×Rapid PCR MasterMix | 12.5μL | 25μL | 1 × |
| Forward Primer(10μM) | 0.5μL | 1μL | 0.2μM |
| Reverse Primer(10μM) | 0.5μL | 1μL | 0.2μM |
| Template DNA | as required | as required | |
| ddH2O | up to 25μL | up to 50μL | |
| 参考模板用量(50 μl 反应体系): 质粒:0.1-10ng;细菌基因组:10-100ng;人类基因组:50-150ng;cDNA:1-5μl from RT reaction。 | |||
表2：
| Step | Temperature | Time | Cycle Number |
| Initial denaturation | 94℃ | 2-3min | |
| Denaturation | 94℃ | 10sec | 25-35 cycles |
| Annealing | 55℃ | 10-15sec | |
| Extension | 72℃ | 10 sec/kb | |
| Final Extension | 72℃ | 1-5min | |
| 4-8℃ | Hold |
产品特点：
1：超快的扩增速度:延伸速度可以达到 5-10 秒/kb，最短半小时完成 PCR。
2：良好保真性:保真度是taq的3-6 倍以上。
3：强大扩增能力:产量高，对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板有良好效果。
2：良好保真性:保真度是taq的3-6 倍以上。
3：强大扩增能力:产量高，对于一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高模板有良好效果。
保存条件：
室温运输；-20°C，2 年。短时间(1个月内)使用可以置4°C。
注意事项：
1：2×Rapid PCR MasterMix 扩增速度极快，短片段或者简单模板如质粒模板可以尝试5秒/kb延伸速度并采用较少循环数以进一步缩短 PCR 时间。较长片段(≥3kb)或者复杂模板产量较低可以采用15-20 秒/kb延伸速度或者采用较多循环数。
2：2× Rapid PCR MasterMix 产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如 20 秒/kb)和循环数(如 35 个)可以提高PCR产物的产量。
3：对于GC含量很高的模板，短片段预变性和变性温度可以提高到98°C和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度，应该适当延长预变性时间到5分钟，变性时间可以适当提高5-10 秒。
4：如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%， 按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落 PCR(Touchdown PCR)。
2：2× Rapid PCR MasterMix 产量较低时可尝试采用较长的延伸时间(如 20 秒/kb)和循环数(如 35 个)可以提高PCR产物的产量。
3：对于GC含量很高的模板，短片段预变性和变性温度可以提高到98°C和/或适当延长变性时间。长片段为了避免DNA损伤不应该提高变性温度，应该适当延长预变性时间到5分钟，变性时间可以适当提高5-10 秒。
4：如果扩增模板GC含量高或者模板复杂扩增效果不佳时，可在反应混合物中加入DMSO到终浓度1%-8%， 按照1%梯度增加摸索最佳浓度。或者加入甜菜碱至终浓度1.0-1.7 M。并采用降落 PCR(Touchdown PCR)。
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
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体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO 母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清
方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
母液，添加 300 μLPEG300 混匀澄清，再加 50μLTween80, 混匀澄清，再加 600μLSaline/PBS/ddH2O 混匀澄清方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ， 玉米油 等， 均可点击跳转或在网站搜索购买。
以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。
计算结果:
工作液浓度： mg/ml；
DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，
体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的；
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
剂量转换
对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考 更多
