产品简介：
本产品可以有效清除gDNA 残留，得到的RNA一般不需要DNase消化，可用于反转录PCR、荧光定量PCR等实验。独特的裂解液迅速裂解细胞和灭活细胞 RNA 酶， 离心沉淀去除多糖多酚和次级代谢产物，经裂解混合物用乙醇调节 RNA 结合吸附到基因组DNA清除柱，然后RNA被选择性洗脱滤过， 吸附在基因组 DNA 清除柱上的残留 DNA 无法洗脱连同柱子一起丢弃从而清除掉 DNA。滤过的 RNA 用乙醇调节 结合条件后，RNA 在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤，去蛋白液和漂洗液 将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的 RNase free H2O 将纯净 RNA 从硅基质膜上洗脱。
操作步骤：
实验前准备：取1ml裂解液 CLB至离心管内 (如果CLB有析出或者沉淀需先置于65°C水浴重新溶解），在裂解液CLB中加入5% β-巯基乙醇（1ml CLB加50μl β-巯基乙醇）。颠倒混匀后65°C水浴中预热。多个样品按照比例放大准备。
一：直接研磨法(实验室无液氮情况下或者柔软易研磨植物样品推荐此法):
1：新鲜植物组织或者冰冻保存样品称重后取 100-200mg(水分少的样品如叶片种子等可100-150mg，水分多的样品如草莓西瓜果实可多加一些)迅速剪成小块放入研钵，加入 1ml CLB(已加有β-巯基乙醇)室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液 CLB 立刻充分接触以抑制 RNA 酶活性。
注意：β-巯基乙醇是裂解液 CLB 的关键成分，必要的时候可以提高终浓度到 10-20%。如果特别复杂植物，可以尝试在裂解液中加入 PVP40 至终浓度 2%。
2：将裂解物转入离心管，立即剧烈振荡 15 秒，短时放回 65°C 水浴中(5-10 min)，中间偶尔颠倒 1-2 次帮助裂解。13,000rpm 离 心 10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
3：取裂解物上清(在不超过基因组 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上 清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
注意：若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
4：立刻接操作步骤的步骤三。
二：液氮研磨法(适用广泛，提取复杂难破碎，易降解样品时推荐此法)
1：液氮中研磨新鲜或-70°C 冷冻的材料至细粉。
2：转移100-200mg 细粉(水分少的样品如叶片种子等可加 100-150mg，水分多的样品如草莓西瓜果实可多加一些)加至预热的裂 解液 CLB(已加有β-巯基乙醇)离心管中。立即剧烈涡旋 30-60 秒或者用吸头吹打混匀裂解直得到满意匀浆结果(或者电动匀浆 30 秒)，可以剪切 DNA，降低粘稠度和提高产量。
3：短时放回 65°C 水浴中(5-10 min)，中间偶尔颠倒 1-2 次帮助裂解。
4：将裂解物 13,000 rpm 离心 10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
5：取裂解物上清(在不超过基因组 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上 清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
注意：若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
6：立刻接操作步骤的步骤 3。
三：将混合物(每次小于 720μl，多可以分两次加入)加入一个基因组清除柱中，13,000 rpm 离心2分钟，弃掉废液。
注意：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
四：将基因组 DNA 清除柱子放在一个干净 2ml 离心管内(不用 RNAse free 或者 DEPC 处理，一般干净的新离心管即可。也可使用 RNA 吸附柱配套的新的干净收集管)，在基因组清除柱内加 500μl 裂解液 RLT Plus，13,000 rpm 离心 30 秒， 收集滤液(RNA 在 滤液中)，用微量移液器较精确估计滤过液体积(通常为 450-500μl 左右，滤过时候损失体积应该减去)，加入 0.5 倍体积的无水乙 醇，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
五：立刻将混合物(每次小于 720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱 RA 中，(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm 离心2分钟，弃掉 废液。
注意：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间
六：加 700μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1 分钟，13,000rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
七：加入 500μl 漂洗液 RW(请先检查是否已加入无水乙醇!)，13,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW，重复一遍。
八：将吸附柱 RA 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
九：取出吸附柱RA，放入一个RNasefree离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μlRNase-FreeH2O(事先在 70 ̊C 水浴中加热可提高产量)， 室温放置 1 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟。
十：如果预期 RNA 产量>30μg，加 30-50μl RNase-Free H2O 重复步骤 9，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重 复步骤一遍(如果需要 RNA 浓度高)。
注意：洗脱两遍的 RNA 洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高 15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
一：直接研磨法(实验室无液氮情况下或者柔软易研磨植物样品推荐此法):
1：新鲜植物组织或者冰冻保存样品称重后取 100-200mg(水分少的样品如叶片种子等可100-150mg，水分多的样品如草莓西瓜果实可多加一些)迅速剪成小块放入研钵，加入 1ml CLB(已加有β-巯基乙醇)室温下充分研磨成匀浆，注意应该迅速研磨让组织和裂解液 CLB 立刻充分接触以抑制 RNA 酶活性。
注意：β-巯基乙醇是裂解液 CLB 的关键成分，必要的时候可以提高终浓度到 10-20%。如果特别复杂植物，可以尝试在裂解液中加入 PVP40 至终浓度 2%。
2：将裂解物转入离心管，立即剧烈振荡 15 秒，短时放回 65°C 水浴中(5-10 min)，中间偶尔颠倒 1-2 次帮助裂解。13,000rpm 离 心 10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
3：取裂解物上清(在不超过基因组 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上 清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
注意：若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
4：立刻接操作步骤的步骤三。
二：液氮研磨法(适用广泛，提取复杂难破碎，易降解样品时推荐此法)
1：液氮中研磨新鲜或-70°C 冷冻的材料至细粉。
2：转移100-200mg 细粉(水分少的样品如叶片种子等可加 100-150mg，水分多的样品如草莓西瓜果实可多加一些)加至预热的裂 解液 CLB(已加有β-巯基乙醇)离心管中。立即剧烈涡旋 30-60 秒或者用吸头吹打混匀裂解直得到满意匀浆结果(或者电动匀浆 30 秒)，可以剪切 DNA，降低粘稠度和提高产量。
3：短时放回 65°C 水浴中(5-10 min)，中间偶尔颠倒 1-2 次帮助裂解。
4：将裂解物 13,000 rpm 离心 10 分钟，沉淀不能裂解的碎片。
5：取裂解物上清(在不超过基因组 DNA 清除柱能力的情况下可以取更多的上清，这样可以提高产量)转到一个新离心管。加入上 清体积一半的无水乙醇(0.5 体积)，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
注意：若上清表面有漂浮物，用吸头挑开吸取下面液体即可。
6：立刻接操作步骤的步骤 3。
三：将混合物(每次小于 720μl，多可以分两次加入)加入一个基因组清除柱中，13,000 rpm 离心2分钟，弃掉废液。
注意：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间。
四：将基因组 DNA 清除柱子放在一个干净 2ml 离心管内(不用 RNAse free 或者 DEPC 处理，一般干净的新离心管即可。也可使用 RNA 吸附柱配套的新的干净收集管)，在基因组清除柱内加 500μl 裂解液 RLT Plus，13,000 rpm 离心 30 秒， 收集滤液(RNA 在 滤液中)，用微量移液器较精确估计滤过液体积(通常为 450-500μl 左右，滤过时候损失体积应该减去)，加入 0.5 倍体积的无水乙 醇，此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
五：立刻将混合物(每次小于 720μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱 RA 中，(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm 离心2分钟，弃掉 废液。
注意：确保离心后液体全部滤过去，膜上没有残留，如有必要，可以加大离心力和离心时间
六：加 700μl 去蛋白液 RW1，室温放置 1 分钟，13,000rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
七：加入 500μl 漂洗液 RW(请先检查是否已加入无水乙醇!)，13,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。加入 500μl 漂洗液 RW，重复一遍。
八：将吸附柱 RA 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
九：取出吸附柱RA，放入一个RNasefree离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μlRNase-FreeH2O(事先在 70 ̊C 水浴中加热可提高产量)， 室温放置 1 分钟，12,000 rpm 离心 1 分钟。
十：如果预期 RNA 产量>30μg，加 30-50μl RNase-Free H2O 重复步骤 9，合并两次洗液，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重 复步骤一遍(如果需要 RNA 浓度高)。
注意：洗脱两遍的 RNA 洗脱液浓度高,分两次洗脱合并洗脱液的 RNA 产量比前者高 15–30%,但是浓度要低,用户根据需要选择。
产品特点：
1：离心吸附柱内硅基质膜全部采用 Whatman 特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
2：不需要苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀，快速方便，一般可在 25-30 分钟内完成。
3：应用性极广，可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟水稻种子等数百种样品。
4：基因组 DNA 清除柱技术可以有效清除 gDNA 残留，得到的 RNA 一般不需要 DNase 消化，可用于反转录 PCR、荧光定量 PCR 等实验。
5：多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达2.0-2.2，基本无DNA残留，可用于RT-PCR，Northern-blot 和各种实验。
2：不需要苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀，快速方便，一般可在 25-30 分钟内完成。
3：应用性极广，可以提取包括复杂中草药如石斛/丹参/雪莲/人参、复杂淀粉种子如水稻/小麦/玉米种子、复杂果实如葡萄/蓝莓/草莓/西瓜果实、复杂抗逆植物如冬青/松针/沙棘/胡杨、复杂花卉月季/梅/牡丹花、复杂多糖植物紫菜/仙人掌/芦荟水稻种子等数百种样品。
4：基因组 DNA 清除柱技术可以有效清除 gDNA 残留，得到的 RNA 一般不需要 DNase 消化，可用于反转录 PCR、荧光定量 PCR 等实验。
5：多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达2.0-2.2，基本无DNA残留，可用于RT-PCR，Northern-blot 和各种实验。
组分：
组分名称：50T
裂解液 CLB：50mL
裂解液 RLT Plus：25mL
去蛋白液 RW1：40mL
漂洗液 RW(初次使用前请按说明加入指定量的无水乙醇)：10mL
RNase-Free H2O：10mL
基因组 DNA 清除套管：50EA
RNase-Free 吸附套管(RA)：50EA
裂解液 CLB：50mL
裂解液 RLT Plus：25mL
去蛋白液 RW1：40mL
漂洗液 RW(初次使用前请按说明加入指定量的无水乙醇)：10mL
RNase-Free H2O：10mL
基因组 DNA 清除套管：50EA
RNase-Free 吸附套管(RA)：50EA
注意事项：
1：所有的离心步骤均在室温完成(4 ̊C 离心也可以)，使用转速可以达到 13,000 rpm 的传统台式离心机，如 Eppendorf 5415C 或者类似离心机。
2：需要自备β-巯基乙醇、乙醇(尽量新开封或者 RNA 专用)，研钵。
3：裂解液 CLB、RLTplus 和去蛋白液 RW1 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、 眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4：样品处理量绝对不要超过基因组清除柱 DA 和和 RNA 吸附柱 RA 处理能力，否则造成 DNA 残留或产量降低。开始摸索实验条件 时，如果不清楚样品DNA/RNA 含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
5：一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留，本产品采取了独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能 力的吸附膜，在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留(一般电泳 EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果 要进行严格的 mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR，建议在进行模板和引物的选择时:选用跨内含子的引物,以穿过 mRNA 中的连接区,这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。选择基因组 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。将 RNA 提取物用 RNase-Free 的 DNase I 处理。在步骤去蛋白液 RW1 漂洗前，直接在吸附柱 RA 上进行 DNase I 处理。
2：需要自备β-巯基乙醇、乙醇(尽量新开封或者 RNA 专用)，研钵。
3：裂解液 CLB、RLTplus 和去蛋白液 RW1 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、 眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
4：样品处理量绝对不要超过基因组清除柱 DA 和和 RNA 吸附柱 RA 处理能力，否则造成 DNA 残留或产量降低。开始摸索实验条件 时，如果不清楚样品DNA/RNA 含量时可使用较少的样品处理量，将来根据样品试验情况增加或者减少处理量。
5：一般说来任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的微量残留，本产品采取了独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能 力的吸附膜，在大多数 RT-PCR 扩增过程中极其微量的 DNA 残留(一般电泳 EB 染色紫外灯下观察不可见)影响不是很大, 如果 要进行严格的 mRNA 表达量分析如荧光定量 PCR，建议在进行模板和引物的选择时:选用跨内含子的引物,以穿过 mRNA 中的连接区,这样 DNA 就不能作为模板参与扩增反应。选择基因组 DNA 和 cDNA 上扩增的产物大小不一样的引物对。将 RNA 提取物用 RNase-Free 的 DNase I 处理。在步骤去蛋白液 RW1 漂洗前，直接在吸附柱 RA 上进行 DNase I 处理。
保存条件：
室温 12个月
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
