产品简介：
磷酸盐含量是生物、医药、食品、环境等领域需要定量分析与监控的重要指标。本试剂盒在保证准确定量分析的基础上实现了快速、微量、多样本同步测定。可以用于：发酵过程中发酵液磷酸盐水平监控；各种水源（包括饮用水、工业用水、污水）中磷含量的测定；食品、化妆品、饮料等磷酸盐水平分析；医学临床中组织、细胞、体液、血液等样本中磷酸盐含量分析。
测定原理：
无色化合物（本试剂盒中试剂）与正磷酸盐在酸性条件下发生化学反应形成有色物质，可在特定可见波长下监测其浓度，由此实现对磷酸盐的定量分析。
7PO43- + 21NH4+ + 12Mo7O246- + 72H+ =7(NH4)3[PMo12O40 ] ↓+ 36H2O
(NH4)3[PMo12O40 ] →H3PO4•2Mo2O5
合成的绿色钼磷酸在620 nm处检测可直接得出游离磷酸盐溶度。
测定原理：
无色化合物（本试剂盒中试剂）与正磷酸盐在酸性条件下发生化学反应形成有色物质，可在特定可见波长下监测其浓度，由此实现对磷酸盐的定量分析。
7PO43- + 21NH4+ + 12Mo7O246- + 72H+ =7(NH4)3[PMo12O40 ] ↓+ 36H2O
(NH4)3[PMo12O40 ] →H3PO4•2Mo2O5
合成的绿色钼磷酸在620 nm处检测可直接得出游离磷酸盐溶度。
操作步骤：
试剂准备：
1：试剂Ⅲ全部移入玻璃烧杯后加入试剂Ⅳ，振荡混匀，使用中速定性滤纸进行过滤，滤液装回试剂Ⅲ试剂瓶，为试剂Ⅲ，待用。4℃保存。
2：试剂Ⅰ稀释浓度为0.25×10-4 mol/L 方可使用，即稀释100倍。
标准曲线的制作：
1： 使用前将磷酸盐标准液稀释100倍到浓度0.25×10-4 mol/L，稀释五个梯度分别标记为B1，B2，B3，B4和B5。并以纯水作为空白样标记为B6。（见下表）。
2：2 mL离心管中添加1 mL的样品，试剂Ⅰ或者空白液。
3：添加200 μL试剂Ⅱ。完全混合，在室温下静置10 min。
4：每孔添加200 μL试剂Ⅲ。完全混合，加入过程中要小心，防止气泡产生，加入后不能剧烈晃动，在室温下静置20 min。
5：在620 nm下测定吸光度。
待测样品的预处理方法：
1：待测样品与 2 mol/L NaOH 溶液体积比1:1混合，静置10 min；
2：在加热60℃条件下，向其中加入 1 mol/L HCl，与HCl体积比1:0.5，使沉淀消失；
3：向其中加入无水乙醇，与无水乙醇体积比1:2，静置10 min，12000 r/min 离心5 min，取上清；
最佳pH测定范围4.5-7.6。
操作步骤：
1：使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2：根据待测样品数量决定所需的离心管。每个标准品和空白管建议做重复操作。每个样品根据自己的数量来定，能重复操作的尽量做重复操作。
注：通过增加或减少样品的稀释度，来改变样品的OD值。使所测定的OD值在孔雀石绿实验的线性范围内。且这个稀释度应包含在标准曲线中。如发酵液离心后上清一般稀释104倍左右进行测定。
3：加入待测样品1 mL于离心管中。
4：每管添加200 μL试剂Ⅱ。完全混合，在室温下静置10 min。
5：每管添加200 μL试剂Ⅲ。完全混合，加入过程中要小心，防止气泡产生，加入后不能剧烈晃动，在室温下静置20 min。
注：为了获得最佳的一致性，每批次在加入试剂Ⅲ后，固定的时间读数。
6：在620 nm波长处测定各孔的吸光度。
结果分析：
1:计算
以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的磷酸盐含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
2：表现的特征
这里所制作的标准曲线是用该试剂盒的典型数据的一个例子，但是，您的结果不会完全相同。您必须由您的样品的数据来绘制一条新的标准曲线。依据条件，水的纯度的改变，您的结果数据肯定不同于下图。
1：试剂Ⅲ全部移入玻璃烧杯后加入试剂Ⅳ，振荡混匀，使用中速定性滤纸进行过滤，滤液装回试剂Ⅲ试剂瓶，为试剂Ⅲ，待用。4℃保存。
2：试剂Ⅰ稀释浓度为0.25×10-4 mol/L 方可使用，即稀释100倍。
标准曲线的制作：
1： 使用前将磷酸盐标准液稀释100倍到浓度0.25×10-4 mol/L，稀释五个梯度分别标记为B1，B2，B3，B4和B5。并以纯水作为空白样标记为B6。（见下表）。
2：2 mL离心管中添加1 mL的样品，试剂Ⅰ或者空白液。
3：添加200 μL试剂Ⅱ。完全混合，在室温下静置10 min。
4：每孔添加200 μL试剂Ⅲ。完全混合，加入过程中要小心，防止气泡产生，加入后不能剧烈晃动，在室温下静置20 min。
5：在620 nm下测定吸光度。
| 表 | ||
| 标准管 | 稀释方法 | 稀释后浓度 （1×10-7 mol/L） |
| B1 | 1 mL磷酸盐标准液+1 mL纯水 | 125 |
| B2 | 1 mLB1+1 mL纯水 | 62.5 |
| B3 | 1 mLB2+1 mL纯水 | 31.25 |
| B4 | 1 mLB3+1 mL纯水 | 15.625 |
| B5 | 1 mLB4+1 mL纯水（混匀后取走1 mL） | 7.8125 |
| B6（空白） | 1 mL纯水 | 0 |
待测样品的预处理方法：
1：待测样品与 2 mol/L NaOH 溶液体积比1:1混合，静置10 min；
2：在加热60℃条件下，向其中加入 1 mol/L HCl，与HCl体积比1:0.5，使沉淀消失；
3：向其中加入无水乙醇，与无水乙醇体积比1:2，静置10 min，12000 r/min 离心5 min，取上清；
最佳pH测定范围4.5-7.6。
操作步骤：
1：使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2：根据待测样品数量决定所需的离心管。每个标准品和空白管建议做重复操作。每个样品根据自己的数量来定，能重复操作的尽量做重复操作。
注：通过增加或减少样品的稀释度，来改变样品的OD值。使所测定的OD值在孔雀石绿实验的线性范围内。且这个稀释度应包含在标准曲线中。如发酵液离心后上清一般稀释104倍左右进行测定。
3：加入待测样品1 mL于离心管中。
4：每管添加200 μL试剂Ⅱ。完全混合，在室温下静置10 min。
5：每管添加200 μL试剂Ⅲ。完全混合，加入过程中要小心，防止气泡产生，加入后不能剧烈晃动，在室温下静置20 min。
注：为了获得最佳的一致性，每批次在加入试剂Ⅲ后，固定的时间读数。
6：在620 nm波长处测定各孔的吸光度。
结果分析：
1:计算
以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的磷酸盐含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
2：表现的特征
这里所制作的标准曲线是用该试剂盒的典型数据的一个例子，但是，您的结果不会完全相同。您必须由您的样品的数据来绘制一条新的标准曲线。依据条件，水的纯度的改变，您的结果数据肯定不同于下图。
| 图（标准曲线测定结果） | |
| 游离磷酸盐浓度（1×10-7 mol/L） | 吸光度 |
| 0 | 0 |
| 7.8 | 0.062 |
| 15.6 | 0.132 |
| 31.2 | 0.226 |
| 62.5 | 0.434 |
| 125 | 0.800 |
自备材料：
1:移液枪：200 μL、1000 μL。
2:2 mL离心管若干。
3:0.5 cm厚度，1 cm光程比色皿若干。
4:紫外分光光度计。
5:中速定性滤纸。
6:漏斗。
7:超纯水、1M HCL 25mL、10M NaOH 25mL。
2:2 mL离心管若干。
3:0.5 cm厚度，1 cm光程比色皿若干。
4:紫外分光光度计。
5:中速定性滤纸。
6:漏斗。
7:超纯水、1M HCL 25mL、10M NaOH 25mL。
组分：
| 试剂Ⅰ：磷酸盐标准溶液（0.25×10-2 mol/L） | 2 mL×3支 | 4 ℃ | 按说明书进行使用 |
| 试剂Ⅱ | 25 mL | 4 ℃ | 按说明书进行使用 |
| 试剂Ⅲ | 25 mL | 4 ℃ | 按说明书进行使用 |
| 试剂Ⅳ | 2 mL×1支 | 室温 | 按说明书进行使用 |
| 该试剂盒中提供材料可测定样本约100个。 | |||
注意事项：
注意事项：
1：试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
2：实验中不用的试剂应立即放回4℃保存。
3：不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
4：使用一次性的枪头以免交叉污染。
5：读取OD值应及时。
6：加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应的时间一致。
7：按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行操作。
备注：
1：这里所制作的标准曲线是用该试剂盒的典型数据的一个例子，但是，你的结果不会完全相同。你必须由你的样品的数据来绘制一条新的标准曲线。依据条件，水的纯度的改变，你的结果数据可能不同于上图。
2：本试剂盒在pH范围 4.5-7.6条件下测定磷酸盐含量。
3：本试剂盒在温度范围4-37 ℃下可使用室温测定的标准曲线，其余温度需要重新作标准曲线。
1：试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。
2：实验中不用的试剂应立即放回4℃保存。
3：不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
4：使用一次性的枪头以免交叉污染。
5：读取OD值应及时。
6：加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应的时间一致。
7：按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行操作。
备注：
1：这里所制作的标准曲线是用该试剂盒的典型数据的一个例子，但是，你的结果不会完全相同。你必须由你的样品的数据来绘制一条新的标准曲线。依据条件，水的纯度的改变，你的结果数据可能不同于上图。
2：本试剂盒在pH范围 4.5-7.6条件下测定磷酸盐含量。
3：本试剂盒在温度范围4-37 ℃下可使用室温测定的标准曲线，其余温度需要重新作标准曲线。
保存条件：
2-8°C
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
