产品简介:
血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-两种磷酸根阴离子组成, WHO推荐的常规检测方法为比色法,我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。
无机磷检测试剂盒(米吐尔钼蓝比色法)利用无机磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵,后者被米吐尔还原成蓝紫色的复合物。通过分光光度计检测610nm处吸光度值,根据公式计算出无机磷含量。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
无机磷检测试剂盒(米吐尔钼蓝比色法)利用无机磷在酸性条件下与钼酸铵结合生成磷钼酸铵,后者被米吐尔还原成蓝紫色的复合物。通过分光光度计检测610nm处吸光度值,根据公式计算出无机磷含量。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
操作步骤:
1、 (选做)制备样品:
① 血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定, -20℃冻存,用于Pi的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于Pi的检测。
③高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的Pi,可以蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量。
2、制备磷标准工作液:取适量的磷标准 (1mg/ml),按磷标准(1mg/ml):标准品稀释液=1:24 的比例稀释,即获得磷标准工作液(1.292mmol/L),-20℃冻存,用于 Pi 的检测。
制备米吐尔钼蓝显色工作液:
3、取 1 支的米吐尔,充分溶解于 50ml Pi Assay buffer,即为米吐尔钼蓝显色工作液。配制后的该溶液应 4℃避光保存,一般建议 1 周内用完。
4、 Pi检测:按下表操作。
5、 混匀,水浴,分光光度计650nm处检测,比色杯光径1.0cm,以空白管调零,读取各 管吸光度值。
计算:
血清、血浆中无机磷计算公式:磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.292
组织中磷计算公式:磷(mmol/mg)=(A测定/A标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L)
参考区间:
健康成年人血清磷浓度:0.96-1.62mmol/L(3-5mg/dl)
儿童血清磷浓度:1.45-2.1mmol/L(4.5-6.5mg/dl)
① 血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定, -20℃冻存,用于Pi的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于Pi的检测。
③高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的Pi,可以蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量。
2、制备磷标准工作液:取适量的磷标准 (1mg/ml),按磷标准(1mg/ml):标准品稀释液=1:24 的比例稀释,即获得磷标准工作液(1.292mmol/L),-20℃冻存,用于 Pi 的检测。
制备米吐尔钼蓝显色工作液:
3、取 1 支的米吐尔,充分溶解于 50ml Pi Assay buffer,即为米吐尔钼蓝显色工作液。配制后的该溶液应 4℃避光保存,一般建议 1 周内用完。
4、 Pi检测:按下表操作。
加入物(ml) | 空白光 | 标准管 | 测试管 |
测试管 | 0.05 | 一 | 一 |
磷标准(1.29 mmol/L) | 一 | 0.05 | - |
待测样品 | - | - | 0.05 |
米吐尔钼蓝显色工作液 | 2.0 | 2.0 | 2.0 |
计算:
血清、血浆中无机磷计算公式:磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.292
组织中磷计算公式:磷(mmol/mg)=(A测定/A标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L)
参考区间:
健康成年人血清磷浓度:0.96-1.62mmol/L(3-5mg/dl)
儿童血清磷浓度:1.45-2.1mmol/L(4.5-6.5mg/dl)
组分:
产品名称 | 规格 | Storage |
试剂(A): 磷标准(1mg/ml) | 1ml 2ml | 4℃ |
试剂(B): 标准品稀释液 | 5ml 10ml | 4℃ 避光 |
试剂(C): Pi Assay buffer | 120ml 240ml | RT |
试剂(D):米吐尔 | 2×0.35g 2×0.35g | RT 避光 |
试剂(E): ddH2O | 5ml 10ml | RT |
注意事项:
1、 米吐尔钼蓝显色工作液配制完成后,尽快使用,放置过久会导致正常血清液产生轻度 浑浊。
2、 如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
2、 如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
保存条件:
4℃,避光,12个月
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )