中文名称: 考马斯亮蓝G250染料试剂
英文名称:
CAS No:
PS0111 考马斯亮蓝G250染料试剂 (psaitong)
产品简介:
Bradford 法是常用的蛋白浓度检测的方法,与传统方法相比,更简单、更稳定、兼容性更好。Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度可高达 1M,DTT 的浓度可高达 5mM。但受高浓度的去垢剂的影响明显,故在用 Bradford Protein Assay Kit 进行蛋白定量时,需确保 SDS 低于 0.01%,Triton X-100低于 0.05%,Tween 20, 60, 80 低于 0.015%,含高浓度去污剂的蛋白定量,建议采用 BCAProtein Assay Kit。 考马斯亮蓝 G250 染料试剂由考马斯亮蓝 G250、乙醇、磷酸组成,用于考马斯染料结合(Bradford)分析的总蛋白测量,其特点在于对蛋白样品中可能存在的大多数盐、溶剂、缓冲液、硫醇、金属螯合剂、还原性物质等均不排斥。检测浓度下限达到 25μg/ml,最小检测蛋白量达到 0.5μg,待测样品体积为 1~20μl,在 50~1000μg/ml 浓度范围内有较好的线性关系。
操作步骤:
1、稀释蛋白标准(一般为 BSA 5mg/ml)使其终浓度为 0.5mg/ml。注意:蛋白样品在什么溶液中,蛋白标准也应用什么溶液稀释,也可以用 0.9%NaCl 或 PBS 稀释蛋白标准。
2、将标准品按 0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl 加到 96 孔板的蛋白标准孔中,加蛋白标准稀释液补足至 20μl。
3、加适当体积样品到 96 孔板的样品孔中,补加标准品稀释液至 20μl。
4、各孔加入 200μl 考马斯亮蓝 G250 染料试剂,室温放置 3~5min。
5、酶标仪测定 595nm 波长处的吸光值,560~610nm 之间的波长也可。
6、根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。
自备材料:
1、酶标仪或分光光度计
2、蒸馏水
3、96 孔板或比色杯
组分:
产品名称 规格 Storage
考马斯亮蓝G250染料试剂 500mL 室温,避光
注意事项:
1、 待测蛋白溶解于什么样的稀释液中,蛋白标准也应溶解于什么样的稀释液中,否者待测蛋白与蛋白标准中所含非蛋白成分不一致,有可能导致测定不准确。
2、 需可检测 560~610nm 之间波长的酶标仪一台,最佳检测波长为 595nm。
3、 建议每次测定时都做标准曲线。因为测定时颜色会随着时间的延长不断加深,并且显色反应的速度和温度有关,所以除非精确控制显色反应的时间和温度,否则如需精确测定应每次都做标准曲线。
4、 如果没有酶标仪,也可以使用普通的分光光度计测定,但测定时,考虑根据比色皿的最小检测体积。应按比例适当加大考马斯亮蓝 G250 染料试剂的用量使总体积不小于最小检测体积,样品和标准品的用量亦相应按比例放大。使用分光光度计测定蛋白浓度时,每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
5、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
室温,避光,12个月
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):