| 中文名称: | TG003 | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| 英文名称: | TG003 | ||||
| 别名: | (1Z)-1-(3-乙基-5-甲氧基-2(3H)-苯并噻唑基)-2-丙酮 (1Z)-1-(3-Ethyl-5-methoxy-2(3H)-benzothiazolylidene)-2-propanone | ||||
| CAS No: | 719277-26-6 | 分子式: | C13H15NO2S | 分子量: | 249.33 |
| CAS No: | 719277-26-6 | ||||
| 分子式: | C13H15NO2S | ||||
| 分子量: | 249.33 | ||||
包装规格：
10mg 50mg 100mg in glass bottle
产品简介：
TG003是一种强效的ATP竞争性的Cdc2-like激酶(Clk)抑制剂，作用于Clk1, Clk2,和Clk4时IC50分别为20 nM, 200 nM,和15 nM。对Clk3, SRPK1, SRPK2, 或者PKC无抑制效果。
溶解性：
溶于DMSO （ 50 mg/mL ）
储备液保存：
-80°C 2 years
-20°C 1 year
-20°C 1 year
体内实验：
1、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→40% PEG300 →5% Tween-80→45% saline
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in saline)
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% corn oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。
2、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% (20% SBE-β-CD in saline)
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL 20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。
3、请依序添加每种溶剂： 10% DMSO→90% corn oil
Solubility: ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM); Clear solution
此方案可获得 ≥ 2.08 mg/mL (8.34 mM，饱和度未知) 的澄清溶液，此方案不适用于实验周期在半个月以上的实验。
以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 20.8 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL玉米油中，混合均匀。
＜1mg/ml表示微溶或不溶。
普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得，实际溶液度可能与公布值有所偏差，属于正常的批间细微差异现象。
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；⼀旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
靶点：
mCLK4(Cell-free assay):15 nM
mCLK1(Cell-free assay):20 nM
mCLK2(Cell-free assay):200 nM
mCLK1(Cell-free assay):20 nM
mCLK2(Cell-free assay):200 nM
体外研究：
TG003通过抑制Clk1/Sty介导的磷酸化抑制人类β珠蛋白在体外的SF2/ASF依赖性剪接。TG003抑制哺乳动物细胞中Clk1/Sty激酶活性，而在10μM浓度下对HeLa和COS-7细胞的生长没有毒性作用。 TG003通过抑制IL-1β异核RNA的剪接阻断血小板产生IL-1β RNA。在3T3-L1细胞分化时期，TG003也会阻断PKCβII的可变剪接以及PPARγ1和PPARγ2的表达。
体内研究：
TG003（10μM）能够挽救非洲爪蟾体内过度Clk活性诱导的胚胎缺陷。
激酶实验：
体外激酶试验
Clks和SRPKs的激酶活性在包含200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM dithiothreitol, 4 mM EGTA, 1–20 μM ATP, 1 μCi of [γ-32P]ATP, 1 μg SF2/ASF RS 结构域的 合成肽 (NH2-RSPSYGRSRSRSRSRSRSRSRSNSRSRSY-OH), 以及 0.1–1 μg of 纯净的激酶，终体积为40 μL的反应混合物中被测量。cAMP依赖性蛋白质激酶的活性在包含80 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM 二硫苏糖醇, 4 mM EGTA, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg组蛋白H1, 以及1 μg 大鼠cAMP依赖性纯净的蛋白激酶催化亚基的反应混合物中被测量。蛋白激酶C的活性在包含200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 80 μg/mL 磷脂酰丝氨酸, 8 μg/mL 二油精, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg组蛋白H1, 以及 2 μL 部分纯化的大鼠蛋白激酶C的反应混合物中被测量。Me2SO的终浓度被调节至1%，而不考虑抑制剂浓度。反映混合物在30或者25 °C下培养，哺乳动物或者非洲爪蟾重组蛋白分别培养10分钟，并且半份点样在P81磷酸纤维素膜上。使激酶试验的条件，包括培育周期以及激酶和基底的浓度最优化以保持培育期间的线性关系。用5%磷酸溶液(SF2/ASF RS 域)或者5%三氯乙酰溶液(组蛋白 H1)洗涤膜至少15分钟。放射性通过液体闪烁计数器测定。净放射性通过减去没有激酶的反应混合物的基底计数推导出，数据表示成包含溶剂的对照试样的百分数。
Clks和SRPKs的激酶活性在包含200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM dithiothreitol, 4 mM EGTA, 1–20 μM ATP, 1 μCi of [γ-32P]ATP, 1 μg SF2/ASF RS 结构域的 合成肽 (NH2-RSPSYGRSRSRSRSRSRSRSRSNSRSRSY-OH), 以及 0.1–1 μg of 纯净的激酶，终体积为40 μL的反应混合物中被测量。cAMP依赖性蛋白质激酶的活性在包含80 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 8 mM 二硫苏糖醇, 4 mM EGTA, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg组蛋白H1, 以及1 μg 大鼠cAMP依赖性纯净的蛋白激酶催化亚基的反应混合物中被测量。蛋白激酶C的活性在包含200 mM Tris-HCl (pH 7.5), 12.5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 80 μg/mL 磷脂酰丝氨酸, 8 μg/mL 二油精, 10 μM ATP, 1 μCi [γ-32P]ATP, 5 μg组蛋白H1, 以及 2 μL 部分纯化的大鼠蛋白激酶C的反应混合物中被测量。Me2SO的终浓度被调节至1%，而不考虑抑制剂浓度。反映混合物在30或者25 °C下培养，哺乳动物或者非洲爪蟾重组蛋白分别培养10分钟，并且半份点样在P81磷酸纤维素膜上。使激酶试验的条件，包括培育周期以及激酶和基底的浓度最优化以保持培育期间的线性关系。用5%磷酸溶液(SF2/ASF RS 域)或者5%三氯乙酰溶液(组蛋白 H1)洗涤膜至少15分钟。放射性通过液体闪烁计数器测定。净放射性通过减去没有激酶的反应混合物的基底计数推导出，数据表示成包含溶剂的对照试样的百分数。
细胞实验：
细胞系：HeLa细胞和COS-7细胞
浓度：~10 μM
处理时间：3天
方法：2 × 105 HeLa细胞或者1.5 × 105 COS-7细胞再悬浮于2 mL培养基中接种于6孔培养皿中，并且2 μL 10 mM TG003溶解在Me2SO (终浓度为 10 μM)，或者2 μL Me2SO加入到一些孔中。细胞用胰蛋白酶处理，3天中每24小时计算一次密度。细胞用1 mL冰预冷的70%乙醇固定，用PBS洗涤，在1 ml包含1 μg/mL DNase-free RNase A和50 μg/mL碘化丙啶的PBS中于37 °C下培养20分钟，进而通过FACSCalibur进行细胞周期分析。
浓度：~10 μM
处理时间：3天
方法：2 × 105 HeLa细胞或者1.5 × 105 COS-7细胞再悬浮于2 mL培养基中接种于6孔培养皿中，并且2 μL 10 mM TG003溶解在Me2SO (终浓度为 10 μM)，或者2 μL Me2SO加入到一些孔中。细胞用胰蛋白酶处理，3天中每24小时计算一次密度。细胞用1 mL冰预冷的70%乙醇固定，用PBS洗涤，在1 ml包含1 μg/mL DNase-free RNase A和50 μg/mL碘化丙啶的PBS中于37 °C下培养20分钟，进而通过FACSCalibur进行细胞周期分析。
动物实验：
动物模型：非洲爪蟾胚胎
剂量：~10 μM
给药处理：--
剂量：~10 μM
给药处理：--
注意事项：
1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2、以上信息仅做参考交流之用。
2、以上信息仅做参考交流之用。
保存条件：
-20°C
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
