( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。胰蛋白酶由223个氨基酸残基的单链多肽组成,通过从胰蛋白酶原中去除N-末端六肽而产生,胰蛋白酶原在Lys-lle肽键处被裂解。氨基酸序列通过6个二硫键交联。这是胰蛋白酶,β-胰蛋白酶的天然形式。β-胰蛋白酶可以自溶,在 Lys-Ser残基上裂解,产生α-胰蛋白酶。胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
技术指标:
分 子 量:23.8kDa
来源:牛胰
消光系数:E1%=12.9-15.4 (280nm)
最适pH:7.8-8.5
比活性:≥10000 BAEE U/MG
生化生理:
胰蛋白酶在赖氨酸和精氨酸残基的C末端切割肽。如果酸性残基位于切割位点的任一侧,则该反应的水解速率减慢,如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则水解停止。胰蛋白酶活性的最佳pH为7-9。胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 EDTA被添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂,该螯合剂中和钙离子和镁离子,这些离子模糊了胰蛋白酶作用的肽键。去除这些离子会增加酶活性。丝氨酸蛋白酶抑制剂,包括DFP,TLCK,APMSF,AEBSEF和抑肽酶等,都会抑制胰蛋白酶。
主要用途:
本品为蛋白质水解酶,能选择地水解蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,能消化溶解变性蛋白质,对未变性的蛋白质无作用,专一性催化水解赖氨酸、精氨酸羧基形成的肽键。可用于蛋白质化学研究。
制备方法说明:
溶解胰蛋白酶应使用不含Ca2+或Mg2+的缓冲盐溶液。它可溶于1mM HCl,浓度为1mg/mL。 它也经过TPCK处理和透析。用L-1-甲苯磺酰胺-2-苯乙基氯甲基酮(TPCK)处理降低了胰蛋白酶通常存在的胰凝乳蛋白酶活性。
稳定性:
1mM HCl中的溶液以小份储存在-20℃可以稳定1年。Ca2+的存在也会降低胰蛋白酶的自溶性并维持其在溶液中的稳定性。胰蛋白酶还将在2.0M尿素,2.0M盐酸胍或0.1%(w/v)SDS中保留其大部分活性。
2、以上信息仅做参考交流之用。
胰蛋白酶切割赖氨酸和精氨酸残基的 C 端肽。 如果酸性残基位于切割位点的任一侧,则该反应的水解速度减慢,并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧,则停止水解。 胰蛋白酶活性的最适 pH 为 7-9。 胰蛋白酶还可以起到裂解氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键的作用。 将 EDTA 作为螯合剂添加到胰蛋白酶溶液中,用于中和钙离子和镁离子,这些离子遮蔽胰蛋白酶作用的肽键。 去除这些离子会增加酶活性。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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