产品简介：
本产品采用 DNA 吸附柱和新型独特的溶液系统，适合于从真菌组织细胞中快速简单地提取基因组 DNA。可在 30 分钟内完成一个或 多个 100mg 新鲜或 20mg 干燥的真菌样品 DNA 的纯化工作。提取过程不需要用到有毒的酚氯仿等有机物抽提，也不需要用到耗时的 异丙醇或乙醇沉淀，并能快速高效地去除多糖类、酚类和酶抑制物等杂质，纯化的 DNA 可直接用于 PCR、酶切和杂交等实验。
新鲜或干燥的真菌组织(细胞)磨碎后经裂解液裂解;蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;然后基因组 DNA 在高离序盐状态下选择 性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。
新鲜或干燥的真菌组织(细胞)磨碎后经裂解液裂解;蛋白质、多糖、细胞残片被沉淀去除;然后基因组 DNA 在高离序盐状态下选择 性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤, 进一步将多糖，多酚和细胞代谢物，蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组 DNA 从硅基质膜上洗脱。
操作步骤：
第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入。
第一次使用前请先在缓冲液 AP3/E 中加入指定量无水乙醇。
1：取适量真菌组织在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
2：转移细粉(新鲜真菌组织100 mg或干重组织20 mg)到一个 1.5ml 离心管，不要解冻，加入400μl缓冲液AP1和4μl RNase A(10 mg/ml)，旋涡振荡，充分混匀帮助裂解。如果组织裂解困难，可根据需要加一个轻柔匀浆10秒的步骤帮助裂解。大多数情况下不需要离心去除未完全裂解的组织，因为 后面有一个离心去除的步骤。
第2步请注意：以上可选:多糖含量特别高的时候可以在AP1加入 2%PVP40000; 多酚含量特别高的时候可以在AP1中加入0.2% beta巯基乙醇。也可两者同时加入。
3：65°C水浴 10 分钟，在水浴过程中颠倒离心管 2-3 次，混合样品。
4：加入130μl 缓冲液 AP2，充分混匀，冰上放置 5 分钟，14,000 rpm 离心5-10 分钟，小心吸取上清到一个新的 1.5ml 离心管，注意不要吸到界面物质。
5：计算上清量，加入 1.5 倍体积的 AP3/E(请先检查是否已加入无水乙醇!)，立即吹打混匀。加入 AP3/E 可能会出现絮状沉淀，但不影响 DNA 提取。注意将 AP3/E 直接加入到上清并立即吹打混匀。
6：将上一步所得混合物(包括可能出现的沉淀)加入一个吸附柱 AC 中，(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm 离心 30-60 秒，倒掉收集管中的废液(先加 650μl 离心，弃废液，再加入剩余的溶液，再次离心)。
7：加入 600μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
8：加入 600μl 漂洗液 WB，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
9：将吸附柱 AC 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10：取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 100μl 洗脱缓冲液EB， 室温放置3-5 分钟，12,000 rpm离心 1 分钟。将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟。 洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果预计和需要产量高，可增大洗脱体积，如果需要 DNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于 50μl，体积过小降低 DNA 洗脱效率，减少 DNA 产量。
11：DNA 可以存放在 2-8°C,如果要长时间存放，可以放置在-20°C。
第一次使用前请先在缓冲液 AP3/E 中加入指定量无水乙醇。
1：取适量真菌组织在研钵中加入液氮充分碾磨成细粉。
2：转移细粉(新鲜真菌组织100 mg或干重组织20 mg)到一个 1.5ml 离心管，不要解冻，加入400μl缓冲液AP1和4μl RNase A(10 mg/ml)，旋涡振荡，充分混匀帮助裂解。如果组织裂解困难，可根据需要加一个轻柔匀浆10秒的步骤帮助裂解。大多数情况下不需要离心去除未完全裂解的组织，因为 后面有一个离心去除的步骤。
第2步请注意：以上可选:多糖含量特别高的时候可以在AP1加入 2%PVP40000; 多酚含量特别高的时候可以在AP1中加入0.2% beta巯基乙醇。也可两者同时加入。
3：65°C水浴 10 分钟，在水浴过程中颠倒离心管 2-3 次，混合样品。
4：加入130μl 缓冲液 AP2，充分混匀，冰上放置 5 分钟，14,000 rpm 离心5-10 分钟，小心吸取上清到一个新的 1.5ml 离心管，注意不要吸到界面物质。
5：计算上清量，加入 1.5 倍体积的 AP3/E(请先检查是否已加入无水乙醇!)，立即吹打混匀。加入 AP3/E 可能会出现絮状沉淀，但不影响 DNA 提取。注意将 AP3/E 直接加入到上清并立即吹打混匀。
6：将上一步所得混合物(包括可能出现的沉淀)加入一个吸附柱 AC 中，(吸附柱放入收集管中)13,000 rpm 离心 30-60 秒，倒掉收集管中的废液(先加 650μl 离心，弃废液，再加入剩余的溶液，再次离心)。
7：加入 600μl 漂洗液 WB(请先检查是否已加入无水乙醇!)，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
8：加入 600μl 漂洗液 WB，12,000 rpm 离心 30 秒，弃掉废液。
9：将吸附柱 AC 放回空收集管中，13,000 rpm 离心 2 分钟，尽量除去漂洗液， 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
10：取出吸附柱 AC，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加 100μl 洗脱缓冲液EB， 室温放置3-5 分钟，12,000 rpm离心 1 分钟。将得到的溶液重新加入吸附柱中，室温放置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟。 洗脱体积越大，洗脱效率越高，如果预计和需要产量高，可增大洗脱体积，如果需要 DNA 浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是最小体积不应少于 50μl，体积过小降低 DNA 洗脱效率，减少 DNA 产量。
11：DNA 可以存放在 2-8°C,如果要长时间存放，可以放置在-20°C。
产品特点：
1：离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。
2：不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3：快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
4：数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.7-1.9。
2：不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。
3：快速，简捷，单个样品操作一般可在1小时内完成。
4：数种去多糖、多酚成份和多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280 典型的比值达 1.7-1.9。
组分：
| 组分名称 | 50T |
| RNase (10mg/ml) | 250 μl |
| 缓冲液 AP1 | 20mL |
| 缓冲液 AP2 | 7mL |
| 缓冲液 AP3/E | 15mL |
| 漂洗液 WB | 13mL |
| 洗脱缓冲液 EB | 15mL |
| 吸附柱 AC | 50个 |
| 收集管(2mL) | 50个 |
注意事项：
1：缓冲液 AP1、AP3/E 低温时可能出现析出和沉淀，可以在 65°C水浴几分钟帮助重新溶解(AP3 加入乙醇前可加热，加入乙醇后 不可加热)，恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2：避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3：所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机。
4：开始实验前将需要的水浴先预热到 65°C备用。
5：缓冲液 AP3/E 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或 者生理盐水冲洗。
6：不同来源的真菌组织细胞材料中提取DNA 的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
7：洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保 pH 大于 7.5， pH 过低影响 洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该保存在-20°C。DNA 如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱 (10mM Tris-HCl， 1mM EDTA， pH 8.0)，但是 EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
8：真菌种类复杂，没有一种试剂盒可以提取所有种类的真菌 DNA。如果有的真菌多糖多酚含量过于丰富、次级代谢产物太复杂导致 本试剂盒效果不佳，可以选择本公司的 DN14 CTAB 法植物 DNA 提取试剂盒提取真菌，一般该试剂盒对于多糖多酚次级代谢产 物复杂的真菌 DNA 提取效果良好。
2：避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3：所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机。
4：开始实验前将需要的水浴先预热到 65°C备用。
5：缓冲液 AP3/E 中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或 者生理盐水冲洗。
6：不同来源的真菌组织细胞材料中提取DNA 的量会有差异，一般100mg新鲜组织典型产量可达3-25μg。
7：洗脱液 EB 不含有螯合剂 EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保 pH 大于 7.5， pH 过低影响 洗脱效率。用水洗脱 DNA 应该保存在-20°C。DNA 如果需要长期保存，可以用 TE 缓冲液洗脱 (10mM Tris-HCl， 1mM EDTA， pH 8.0)，但是 EDTA 可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
8：真菌种类复杂，没有一种试剂盒可以提取所有种类的真菌 DNA。如果有的真菌多糖多酚含量过于丰富、次级代谢产物太复杂导致 本试剂盒效果不佳，可以选择本公司的 DN14 CTAB 法植物 DNA 提取试剂盒提取真菌，一般该试剂盒对于多糖多酚次级代谢产 物复杂的真菌 DNA 提取效果良好。
保存条件：
室温 12个月
自备试剂：
无水乙醇(E20003)
UN码：
HazardClass：
危害声明：
安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
