中文名称: 植物基因组DNA提取试剂盒
英文名称: Plant Genomic DNA Kit
CAS No:
PS1357 植物基因组DNA提取试剂盒 (psaitong)
产品简介:
本试剂盒采用高效、专一结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲系统,适合从各种不同的新鲜或冻存植物组织中提取基因组DNA,并可最大限度去除植物组织中的杂质。本试剂盒无需使用酚/氯仿抽提,操作安全。提取的基因组DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠, 适用于PCR、荧光定量PCR、分子标记、文库构建等实验。
操作步骤:
1:取植物新鲜组织100 mg左右或干重组织约20 mg,加入液氮充分研磨。
2:将研磨后的粉末收集到离心管(自备)中,加入400μl Buffer LP1和6μl RNase A(10 mg/ml),涡旋振荡1分钟,室温放置10分钟,使其充分裂解。
第2步请注意:使用涡旋振荡或移液器吹打,充分裂解组织,组织裂解不完全会影响最终的DNA得率。
请勿在使用前将Buffer LP1与RNase A混合。
3:加入130μl Buffer LP2,混匀,涡旋震荡1分钟。
4:12,000 rpm(~13,400×g)离心5分钟,将上清移至新的离心管(自备)中。
5:加入1.5倍体积的Buffer LP3(使用前检查是否已加入无水乙醇),充分混匀(如500μl滤液加入750μl Buffer LP3)。
第5步请注意:加入Buffer LP3后应立即混匀,可能会产生沉淀但不影响后续实验。
6:将上步所得溶液和沉淀全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7:向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱 重新放回收集管中。
第7步请注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入500μl无水乙醇,12,000 rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收 集管中。
8:重复步骤7。
9:12,000 rpm离心2分钟,倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
第9步请注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR 等)。
10:将吸附柱放到一个新离心管(自备)中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50-100μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12,000 rpm离心1分钟,收集DNA溶液。-20℃保存DNA。
第10步请注意:如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
如果要提高DNA的终浓度,可以将步骤10所得的DNA洗脱液重新加至吸附膜上,重复步骤10;若洗脱体积小于100 μl,可以增加DNA的终浓度,但可能会减少DNA的总产量。如果所得DNA的量小于1 μg,推荐用50 μl Buffer GE进行洗脱。
因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20 ℃保存。
组分:
组分名称 50T
Buffer LP1 25mL
Buffer LP2 10mL
Buffer LP3 (concentrate) 21mL
Buffer GW2 (concentrate) 15mL
Buffer GE 10mL
RNase A(10mg/ml) 300 μl
Spin Columns DM with Colletion Tubes 50个
注意事项:
1:样品应避免反复冻融,否则会导致提取DNA片段较小且提取量下降。
2:第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer LP3 (加27ml无水乙醇)和Buffer GW2 (加45ml无水乙醇,)中加入无水乙醇。使用前请检查Buffer LP1和Buffer LP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer LP1和Buffer LP2于56℃水浴重每个新溶解。
保存条件:
室温 12个月
自备试剂:
无水乙醇(E20003)
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):