产品简介：
一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
操作步骤：
使用前用生理盐水或PBS将Hoechst 33258染色液稀释100倍，即为工作液。
1、对于固定的细胞或组织：
a、对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b、对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258工作液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积的工作液，混匀。室温放置3-5分钟。
c、吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织：
a、加入适当量Hoechst 33258工作液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1mL工作液，对于96孔板一个孔需加入100μL工作液。
b、在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
1、对于固定的细胞或组织：
a、对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst 33258染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
b、对于贴壁细胞或组织切片，加入少量Hoechst 33258工作液，覆盖住样品即可；对于悬浮细胞，至少加入待染色样品3倍体积的工作液，混匀。室温放置3-5分钟。
c、吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
d、直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。细胞发生凋亡时，会看到凋亡细胞的细胞核呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染。
2、对于活细胞或组织：
a、加入适当量Hoechst 33258工作液，必须充分覆盖住待染色的样品，通常对于六孔板一个孔需加入1mL工作液，对于96孔板一个孔需加入100μL工作液。
b、在适宜于细胞培养的温度下培养20-30分钟。弃染色液，用PBS或培养液洗涤2-3次即可进行荧光检测。
注意事项：
1、Hoechst 33258对人体有一定刺激性，请注意适当防护。
2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、以上信息仅做参考交流之用。
2、荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
3、为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
5、以上信息仅做参考交流之用。
保存条件：
-20℃ 避光 一年
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安全说明：
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
