产品简介
IPTG为安慰性诱导物,X-gal为生色底物,二者共同用于蓝白斑筛选。IPTG可诱导载体Lac操纵子DNA区段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,该片段可与宿主细胞编码的缺陷型β-半乳糖苷酶实现基因内互补(α互补)。实现α互补的细菌铺在含有X-gal生色底物的培养基上,可形成蓝色菌落。外源DNA插入质粒的多克隆位点后可破坏α互补作用,将产生白色菌落。IPTG也是常用的基因工程中重组蛋白表达的诱导剂。0.22um滤器过滤。 |
组成:
产品名称 |
规格 |
Storage |
IPTG溶液 2g/10mL |
10mL |
-20℃ |
操作步骤(仅供参考):
蛋白表达诱导:50mg/mL浓度为210mM。如果终浓度要求为0.5mM,则每升培养基中加入2.38mL IPTG溶液(50mg/mL)。如果实验中需要使用其他诱导浓度,可自行计算加入量 |
白斑筛选:(1)在 100mL 的琼脂培养基中,加入 500μL 的 X-gal 溶液(20mg/mL)、250μL 的 IPTG 溶液(50mg/mL) 和 100 μL 的 Amp(氨苄青霉素,100 mg/mL),制作成含 X-Gal、IPTG 和 Amp 平板培养基。高压灭菌后的培养基 需冷却至 55℃以下时加入 X-Gal、IPTG 和 Amp,以防失活。 |
(2)实际上 X-gal 和 IPTG 可以直接涂抹在平板培养基表面, 90mm 的平板,X-gal(20mg/mL)涂 40μL, IPTG(50mg/mL)涂 16μL。150mm 的平板加倍使用量,待涂布的液体干后就可以使用。细菌铺板后,37℃培养 过夜,可根据长出菌体的蓝白色,而方便地挑选出基因重组体(白色菌落为具有 DNA 插入片段的基因重组体)。 |
注意事项:
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 |
有限期:-20℃避光保存储存,有效期至少 12 个月。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )