无机磷检测试剂盒 - CAS号查询_生物试剂_化学试剂_分析试剂

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产品说明书

PS0343 无机磷检测试剂盒硫酸亚铁钼蓝比色法 (普西唐-psaitong)

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产品描述：

产品简介

血清中的无机磷(Inorganic phosphorous)主要由 H2PO4 -和 HPO4 2-两种磷酸根阴离子组成，上述阴离子在在不同的 pH 环境下能快速相互转换。在 pH7.4 血清中两种磷酸根阴离子浓度比例为 1:4；在酸中毒环境下二者浓度约为 1:1；在碱中毒环境下二者浓度比例为1:9；在 pH4.5 尿液中浓度比例为 100:1。WHO 推荐的常规检测方法为比色法，我国卫生部临检中心推荐的常规方法为硫酸亚铁钼蓝比色法和米吐尔钼蓝比色法。

无机磷检测试剂盒(硫酸亚铁钼蓝比色法)是先经硫酸亚铁提纯蛋白，利用无机磷与钼酸铵结合生成磷钼酸铵，后者被硫酸亚铁还原成蓝紫色的复合物，通过分光光度计检测 640nm 处吸光度，根据公式计算出无机磷含量。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

组成：

产品名称	规格（50T）	规格（100T）	Storage
试剂(A): 磷标准(1mg/ml)	1ml	2ml	4℃
试剂(B): 标准品稀释液	25ml	50ml	RT
试剂(C): Pi Assay buffer	250ml	500ml	4℃ 避光
试剂(D):钼酸胺(粉末)	0.66g	1.32g	RT
试剂(E): 钼酸铵稀释液	15ml	30ml	RT

操作步骤(仅供参考)：

1、 (选做)制备样品：
① 血浆、血清样品：取0.1ml待测血浆、血清样品，加入2.4ml Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。
② 尿液样品：取适量的待测尿液，用蒸馏水做1:10-1:20稀释。取稀释后的尿液样品，2.4ml加入Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。
③ 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清。取匀浆样品，加入2.4ml Pi Assay buffer，充分混匀，室温静置10min，3000r/min离心后取上清，-20℃冻存，用于Pi的检测。
④ 高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的Pi，可以使用去离子水稀释。
⑤ (选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内的Pi含量。
2、制备磷标准工作液：取适量的磷标准(1mg/ml)，按磷标准(1mg/ml)：标准品稀释液 =1:24 的比例稀释，即获得磷标准(1.292mmol/L)；取 0.1ml 磷标准(1.292mmol/L)，加入 2.4ml Pi Assay Buffer，充分混匀，室温静置 10min，3000g 离心 10min，取上清，即为磷标准工作液，-20℃冻存，用于 Pi 的检测。
3、配制钼酸铵显色液：将钼酸铵粉末和钼酸铵稀释液按 0.44g：10ml 的比例混合溶解，即可使用。钼酸铵显色液不宜长期保存，一般配制后 4℃保存，2 周有效。
4、 Pi 加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，按下表操作。如果样品中的 Pi 含量过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置 2 平行管，求平均值。
加入物(ml)	空白管	标准管	测试管
Pi Assay buffer	2	一	一
处理后的磷标准工作液	一	2	一
处理后的待测上清液	一	一	2
钼酸胺溶液	0.25	0.25	0.25
5、Pi 测定：混匀，室温静置 15min，以空白管调零，比色杯光径 1cm，分光光度计 640nm处检测标准管、测定管的吸光度(即为 A 标准，A 测定)。

计算：

血清、血浆中无机磷计算公式：磷(mmol/L)=(A测定/A标准)×1.292

尿液中无机磷计算公式：磷(mmol/d)=(A测定/A标准)×1.292×N×24h尿量(L)

组织中磷计算公式：磷(mmol/mg)=(A测定/A标准)×1.292/待测样品蛋白浓度(mg/L)

式中：A 测定=待测管的吸光度

A 标准=标准管的吸光度

N=尿液稀释倍数

单位换算：1 mg/dL=10 mg/L=1 mmol/L×0.323

参考区间：健康成年人血清磷浓度：0.96-1.62mmol/L(3-5mg/dl)

儿童血清磷浓度：1.45-2.1mmol/L(4.5-6.5mg/dl)

注意事项：

1、溶血样本对检测有干扰，尽量避免采用溶血样本。

2、本法能够用于自动生化分析仪终点检测法。

3、如果样品浓度过高，应用蒸馏水稀释后重测，结果乘以稀释倍数。

4、本法测定的线性范围为 0.01~0.2mg/ml，检测下限为 0.005，检测上限为 1。

5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

有效期：12 个月有效。常温运输，4℃ 保存。

附录：标准曲线制作：Leagene 在室温条件下按说明书操作，用分光光度计对系列磷标准(1/100、1/40、1/25、1/15、1/10、1/8 mg/ml)进行吸光度的测定，其标准曲线如下(仅供参考)：

保存条件：

4℃,避光,12个月

UN码：

HazardClass：

危害声明：

安全说明：

搜索质检报告(COA)

分析证书(COA)

Lot/Batch Number

C23PD950T

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系，公式为：
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

质量 =

浓度 *

体积 *

分子量

*选择对应的单位 *空出希望得到的变量，填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液，使用的计算公式为：
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为：C1V1 = C2V2 ( 输入输出 )

* = *

连续稀释计算器方程

连续稀释
初始浓度:
稀释倍数:

计算结果

C1=C0/X	C1:	LOG(C1):
C2=C1/X	C2:	LOG(C2):
C3=C2/X	C3:	LOG(C3):
C4=C3/X	C4:	LOG(C4):
C5=C4/X	C5:	LOG(C5):
C6=C5/X	C6:	LOG(C6):
C7=C6/X	C7:	LOG(C7):
C8=C7/X	C8:	LOG(C8):

请在下列方框中输入相关信息后点击计算，可以得到母液配置方法和体内配方的制备方法：
举例：给药剂量是10 mg/kg，每只动物体重20g，给药体积100 μL， TargetMol | Animal experiments

一共给药动物10只，您使用的配方为5% TargetMol | reagent

DMSO + 30%PEG300 + 5%Tween 80 + 60%Saline /PBS/ddH₂O，那么您的工作液浓度为2mg/mL。

母液配置方法: 2 mg 药物溶于 50 μLDMSO TargetMol | reagent

（母液浓度为 40 mg/mL ）, 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度，请先与我们客服联系。

体内配方的制备方法: 取 50μLDMSO TargetMol | reagent

母液，添加 300 μLPEG300 TargetMol | reagent

混匀澄清，再加 50μLTween 80, 混匀澄清，再加 600μLSaline /PBS/ddH₂O TargetMol | reagent

混匀澄清

方案所需的各种助溶剂如： DMSO ， PEG300 / PEG400 ， Tween 80 ， SBE-β-CD ，玉米油等，均可点击跳转或在网站搜索购买。

以上为“动物实验计算换算器”的使用方法举例，并不是具体某个试剂的配制，请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。

第一步：请输入基本实验信息（考虑到实验过程中的损耗，建议多配一只动物的药量）

给药剂量

mg/kg

动物平均体重

每只动物给药体积

动物数量

只

第二步：请输入动物体内配方组成（配方适用于不溶于水的药物；不同批次药物配方比例不同，请联系普西唐客服为您提供正确的澄清溶液配方）

% DMSO

% Tween 80

% Saline/PBS/ddH2O

计算重置

计算结果:

工作液浓度： mg/ml；

DMSO母液配制方法： mg 药物溶于 μL DMSO溶液（母液浓度 mg/mL，注：如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度，请先联系普西唐客服）；

体内配方配制方法：取 μL DMSO母液，加入 μL PEG300，混匀澄清后加入μL Tween 80，混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O，混匀澄清。

注意：1. 首先保证母液是澄清的；
2. 一定要按照顺序依次将溶剂加入，进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液，可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。

剂量转换

对于不同动物的给药剂量换算，您也可以参考更多