( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。1:本产品溶于DMSO(100mM),0.22 μm滤膜无菌过滤,小剂量分装(如50-100 μL),-20°C避光冻存备用。
二:工作液浓度推荐
最佳工作浓度因植物物种、外植体类型和农杆菌菌株而异,建议通过预实验进行优化。
1:共培养培养基添加:常用终浓度为 100 - 200μM。例如向1L培养基中加入1 mL的100 mM储备液,即可得到100μM的工作浓度。
2:农杆菌菌液预处理:常用浓度为100 - 400μM。
三:实验流程参考
1:在制备共培养培养基时,待培养基冷却至约50-60°C(不烫手)后,按计算量加入无菌的乙酰丁香酮储备液,混匀后倒板。
2:将经过预培养的植物外植体浸入含有乙酰丁香酮的农杆菌菌液中,侵染数分钟。
3:取出外植体,吸干多余菌液,置于含有乙酰丁香酮的共培养培养基上,在适宜条件下(通常为黑暗或弱光,22-25°C)培养2-4天。
4:共培养结束后,将外植体转移至含抗生素(如头孢霉素、特美汀)的脱菌/选择培养基上,清除农杆菌并筛选转化细胞。
一:农杆菌介导的植物遗传转化
1:共培养培养基的添加:在植物外植体(如叶片、茎段、胚等)与农杆菌共培养期间,添加到培养基中,诱导农杆菌的Vir基因,促进T-DNA的转移和整合。
2:农杆菌菌液预处理:在侵染前,将农杆菌菌液重悬于含有乙酰丁香酮的溶液中,预诱导Vir基因表达。
二:提高难转化植物的转化效率:对于单子叶植物(如水稻、玉米、小麦)以及某些双子叶植物,乙酰丁香酮的使用是成功转化的关键步骤。
三:植物-微生物互作研究:作为信号分子,用于研究植物与病原菌/共生菌之间的化学通讯机制。
2:储备液和含有该产品的培养基应避光保存,以防止降解。
3:本品仅供科研使用。操作时请穿着实验服,佩戴手套和护目镜。避免吸入粉尘或与皮肤、眼睛接触。
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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