( 母液浓度为 40 mg/mL ), 如您需要配置的浓度超过该产品的溶解度,请先与我们客服联系。1:配制适量的电泳及制胶用的缓冲液。根据电泳需要,配置合适浓度的电泳及制胶缓冲液。
注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2:根据制胶量及凝胶浓度,在加有一定量的电泳缓冲液的三角锥瓶中,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的 50%容量)。
3:在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30 秒钟,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热 1 分钟,或直至琼脂糖完全溶解。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
注:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4:使溶液冷却至 60℃左右,如需要可在此时加入溴化乙锭(EB)溶液使其终浓度为 0.5ug/ml,并充分混匀。
注:溴化乙锭是一种致癌物质。使用含有溴化乙锭的溶液时,请戴用手套。
5:将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在 3-5mm 之间。
6:在室温下使胶凝固(大约 30 分钟-1 小时),然后放置于电泳槽中进行电泳。
注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在 4℃下保存,一般可保存 2-5 天。
琼脂糖浓度与 DNA 分离范围
| 线性DNA 大小(bp) | 500-25,000 | 300-20,000 | 200-12,000 | 150-6,000 | 100-3,000 | 50-2,000 |
| 琼脂糖浓度(%) 1× TAE Buffer |
0.75 | 1.00 | 1.25 | 1.50 | 1.75 | 2.00 |
| 琼脂糖浓度(%) 1×TBE Buffer |
0.70 | 0.85 | 1.00 | 1.25 | 1.50 | 1.75 |
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )
母液,添加 300 μLPEG300
混匀澄清,再加 50μLTween80, 混匀澄清,再加 600μLSaline/PBS/ddH2O
混匀澄清方案所需的各种助溶剂如: DMSO , PEG300 / PEG400 , Tween 80 , SBE-β-CD , 玉米油 等, 均可点击跳转或在网站搜索购买。
计算结果:
工作液浓度: mg/ml;
DMSO母液配制方法: mg 药物溶于 μL DMSO溶液(母液浓度 mg/mL,
体内配方配制方法:取 μL DMSO母液,加入 μL PEG300,混匀澄清后加入μL Tween 80,混匀澄清后加入 μL Saline/PBS/ddH2O,混匀澄清。
1. 首先保证母液是澄清的;
2.
一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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