中文名称: Temsirolimus
英文名称: Temsirolimus
CAS No: 162635-04-3
分子式: C56H87NO16
分子量: 1030.29
EINEC: 683864
T10710 Temsirolimus ≥98% (psaitong)
包装规格:
5mg 25mg 100mg in glass bottle
溶解性:
溶于DMSO(≥ 30 mg/mL)
产品描述:

基本信息

产品编号:

T10710

产品名称:

Temsirolimus

CAS:

162635-04-3

 

储存条件

粉末

2-8℃

四年

分子式:

C56H87NO16

溶于液体

-80℃(避光,氮气保存)

6个月

分子量:

1030.29

-20℃(避光,氮气保存)

1个月

化学名: 

CCI-779

Solubility (25°C):

 

体外:

 

DMSO

100mg/mL (97.06mM)

Ethanol

100mg/mL (97.06mM)

Water

Insoluble

体内(现配现用):

2% DMSO+30% PEG 300 +2% Tween 80+ddH2O

7mg/mL

1mg/ml表示微溶或不溶。

普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得,实际溶液度可能与公布值有所偏差,属于正常的批间细微差异现象。

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;⼀旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。

 

制备储备液

 

浓度

 

溶液体积

质量

 

1mg

 

5mg

 

10mg

1mM

0.9706mL

4.8530mL

9.7060mL

5mM

0.1941mL

0.9706mL

1.9412mL

10mM

0.0971mL

0.4853mL

0.9706mL

50mM

0.0194mL

0.0971mL

0.1941mL

 

生物活性

产品描述

mTOR抑制剂,IC50值为1.76μM。Temsirolimus能激活自噬 (autophagy),在动物模型中防止心脏功能恶化。

靶点

mTOR 
(Cell-free assay)

1.76μM

 

体外研究

Temsirolimus抑制核糖体蛋白S6磷酸化,作用于PTEN阳性DU145细胞比作用于PTEN阴性PC-3细胞更有效,且抑制细胞生长,和细胞的克隆生存,这种作用存在浓度依赖性。Temsirolimus按100ng/mL剂量处理原代人淋巴细胞性白血病(ALL)细胞,显著抑制增殖,且诱导凋亡。在FKBP12存在时,Temsirolimus有效抑制mTOR激酶活性,IC50为1.76μM,与Rapamycin(IC50为1.74μM)类似。Temsirolimus按纳摩尔浓度(10nM到<5μM)处理,通过FKBP12依赖机制,具有适度的选择性抗增殖活性,在低微摩尔浓度(5-15μM)时,可以完全抑制多种肿瘤细胞增殖,涉及FKBP12非依赖性的mTOR信号阻断。Temsirolimus按微摩尔而不是纳摩尔浓度(20μM)处理,显著降低全部蛋白质合成,也显著降低多聚核糖体的分解, 伴随着翻译延伸因子eEF2和翻译起始因子eIF2A的磷酸化快速提高。

体内研究

Temsirolimus按20mg/kg剂量腹腔注射,每周5天,显著延迟DAOY移植瘤生长,与对照组相比,处理一周,延迟160%,处理两周,延迟240%。Temsirolimus按100mg/kg高剂量单独给药腹腔注射,一周内,诱导肿瘤体积衰退37%。Temsirolimus处理2两周,也延迟抗Rapamycin的U251移植瘤生长,延迟148%。Temsirolimus作用于患Huntington疾病的小鼠模型,抑制mTOR,提高四种不同行为任务的表现,且降低聚合形成。Temsirolimus处理8226,OPM-2,和U266移植瘤的皮下生长,诱导显著的抗癌反应,这种作用存在剂量依赖性,作用于8226和OPM-2移植瘤,ED50分别为20mg/kg和2mg/kg,与抑制增殖和血管生长,诱导凋亡,和肿瘤细胞尺寸降低相关。每天按10mg/kg剂量处理携带人ALL的NOD/SCID移植瘤模型,降低外周血膨胀和脾肿大。

 

推荐实验方法(仅供参考)

激酶实验:

体外mTOR 催化活性检测

Flag标记的野生型人mTOR (Flag-mTOR) DNA结构短暂转染进HEK293细胞。48小时后,进行蛋白提取和Flag-mTOR纯化。在体外,在不同浓度Temsirolimus存在而没FKBP12时,在96孔板上进行纯化的Flag-mTOR激酶实验,通过解离增强镧系荧光免疫分析(DELFIA),使用His6-S6K1作为底物来测量。在激酶实验 buffer (10mM Hepes pH 7.4,50mM NaCl,50mM β-甘油磷酸,10mM MnCl2,0.5mM DTT,0.25μM微囊藻素LR,和100μg/mL BSA)上第一次对酶进行稀释。每孔中,12μL稀释的酶与0.5μL Temsirolimus混合。加入含ATP和His6-S6K的12.5μL激酶buffer开始激酶反应,终体积为25μL,含800ng/mL FLAG-mTOR,100μM ATP,和1.25μM His6-S6K。反应板在室温下温和震荡温育2小时,加入25μL终止液(20mM Hepes pH 7.4,20mM EDTA,和20mM EGTA)终止反应。磷酸化的(Thr-389) His6-S6K的DELFIA检测在室温下使用单克隆抗P(T389)-p70S6K抗体进行,抗体使用铕-N1-ITC (Eu) (每种抗体10.4 Eu)标记。45μL终止的激酶反应混合物转移到含55μL PBS的MaxiSorp板上。His6-S6K粘附2小时后,吸除每孔,使用PBS冲洗。加入含40ng/mL Eu-P(T389)-S6K抗体的100μL DELFIA buffer。轻轻搅拌,再使抗体结合持续进行1小时。吸除每孔,然后使用含0.05% Tween-20(PBST)的PBS冲洗4次。每孔加入100μL of DELFIA增强溶液,然后在PerkinElmer Victor模板酶标仪上读数。

 

细胞实验:

 

细胞系

A549,H157,H460,H446,HCT116,HT29,SW480,DLD1,Caco2,LNCap,DU145, MDA468,MDA231,HEK293,和PC3-MM2

浓度

溶于DMSO,终浓度为~20μM

处理时间

72小时

方法

使用不同浓度Temsirolimus处理细胞72小时。处理后,通过MTS染料转换,使用CellTiter AQ检测试剂盒测定存活细胞密度。

 

动物实验:

 

动物模型

皮下注射DAOY,或U251细胞的雌性无胸腺裸鼠

剂量

20 mg/kg

给药处理

每天注射,每周5次

保存条件:
2-8℃
UN码:
HazardClass:
危害声明:
安全说明:
搜索质检报告(COA)
参考文献 & 客户发表文献

本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)

摩尔浓度计算公式

  • =
    *
    *
    *选择对应的单位 *空出希望得到的变量,填写另外两个变量

用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积

稀释公式

稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )

  • * = *

连续稀释计算器方程

  • 连续稀释

  • 初始浓度:
  • 稀释倍数:
  • 计算结果

  • C1=C0/X C1: LOG(C1):
    C2=C1/X C2: LOG(C2):
    C3=C2/X C3: LOG(C3):
    C4=C3/X C4: LOG(C4):
    C5=C4/X C5: LOG(C5):
    C6=C5/X C6: LOG(C6):
    C7=C6/X C7: LOG(C7):
    C8=C7/X C8: LOG(C8):