中文名称: | Temsirolimus | ||||
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英文名称: | Temsirolimus | ||||
别名: | 替西罗莫司 CCI-779 | ||||
CAS No: | 162635-04-3 | 分子式: | C56H87NO16 | 分子量: | 1030.29 |
CAS No: | 162635-04-3 | ||||
分子式: | C56H87NO16 | ||||
分子量: | 1030.29 | ||||
EINEC: | 683864 | ||||
EINEC: | 683864 |
基本信息
产品编号: |
T10710 |
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产品名称: |
Temsirolimus |
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CAS: |
162635-04-3 |
储存条件 |
粉末 |
2-8℃ |
四年 |
分子式: |
溶于液体 |
-80℃(避光,氮气保存) |
6个月 |
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分子量: |
1030.29 |
-20℃(避光,氮气保存) |
1个月 |
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化学名: |
CCI-779 |
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Solubility (25°C): |
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体外:
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DMSO |
100mg/mL (97.06mM) |
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Ethanol |
100mg/mL (97.06mM) |
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Water |
Insoluble |
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体内(现配现用): |
2% DMSO+30% PEG 300 +2% Tween 80+ddH2O |
7mg/mL |
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<1mg/ml表示微溶或不溶。 |
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普西唐提供的所有化合物浓度为内部测试所得,实际溶液度可能与公布值有所偏差,属于正常的批间细微差异现象。 |
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请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液;⼀旦配成溶液,请分装保存,避免反复冻融造成的产品失效。 |
制备储备液
浓度
溶液体积 质量 |
1mg |
5mg |
10mg |
1mM |
0.9706mL |
4.8530mL |
9.7060mL |
5mM |
0.1941mL |
0.9706mL |
1.9412mL |
10mM |
0.0971mL |
0.4853mL |
0.9706mL |
50mM |
0.0194mL |
0.0971mL |
0.1941mL |
生物活性
产品描述 |
是mTOR抑制剂,IC50值为1.76μM。Temsirolimus能激活自噬 (autophagy),在动物模型中防止心脏功能恶化。 |
靶点 |
mTOR |
1.76μM |
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体外研究 |
Temsirolimus抑制核糖体蛋白S6磷酸化,作用于PTEN阳性DU145细胞比作用于PTEN阴性PC-3细胞更有效,且抑制细胞生长,和细胞的克隆生存,这种作用存在浓度依赖性。Temsirolimus按100ng/mL剂量处理原代人淋巴细胞性白血病(ALL)细胞,显著抑制增殖,且诱导凋亡。在FKBP12存在时,Temsirolimus有效抑制mTOR激酶活性,IC50为1.76μM,与Rapamycin(IC50为1.74μM)类似。Temsirolimus按纳摩尔浓度(10nM到<5μM)处理,通过FKBP12依赖机制,具有适度的选择性抗增殖活性,在低微摩尔浓度(5-15μM)时,可以完全抑制多种肿瘤细胞增殖,涉及FKBP12非依赖性的mTOR信号阻断。Temsirolimus按微摩尔而不是纳摩尔浓度(20μM)处理,显著降低全部蛋白质合成,也显著降低多聚核糖体的分解, 伴随着翻译延伸因子eEF2和翻译起始因子eIF2A的磷酸化快速提高。 |
体内研究 |
Temsirolimus按20mg/kg剂量腹腔注射,每周5天,显著延迟DAOY移植瘤生长,与对照组相比,处理一周,延迟160%,处理两周,延迟240%。Temsirolimus按100mg/kg高剂量单独给药腹腔注射,一周内,诱导肿瘤体积衰退37%。Temsirolimus处理2两周,也延迟抗Rapamycin的U251移植瘤生长,延迟148%。Temsirolimus作用于患Huntington疾病的小鼠模型,抑制mTOR,提高四种不同行为任务的表现,且降低聚合形成。Temsirolimus处理8226,OPM-2,和U266移植瘤的皮下生长,诱导显著的抗癌反应,这种作用存在剂量依赖性,作用于8226和OPM-2移植瘤,ED50分别为20mg/kg和2mg/kg,与抑制增殖和血管生长,诱导凋亡,和肿瘤细胞尺寸降低相关。每天按10mg/kg剂量处理携带人ALL的NOD/SCID移植瘤模型,降低外周血膨胀和脾肿大。 |
推荐实验方法(仅供参考)
激酶实验: |
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体外mTOR 催化活性检测 |
Flag标记的野生型人mTOR (Flag-mTOR) DNA结构短暂转染进HEK293细胞。48小时后,进行蛋白提取和Flag-mTOR纯化。在体外,在不同浓度Temsirolimus存在而没FKBP12时,在96孔板上进行纯化的Flag-mTOR激酶实验,通过解离增强镧系荧光免疫分析(DELFIA),使用His6-S6K1作为底物来测量。在激酶实验 buffer (10mM Hepes pH 7.4,50mM NaCl,50mM β-甘油磷酸,10mM MnCl2,0.5mM DTT,0.25μM微囊藻素LR,和100μg/mL BSA)上第一次对酶进行稀释。每孔中,12μL稀释的酶与0.5μL Temsirolimus混合。加入含ATP和His6-S6K的12.5μL激酶buffer开始激酶反应,终体积为25μL,含800ng/mL FLAG-mTOR,100μM ATP,和1.25μM His6-S6K。反应板在室温下温和震荡温育2小时,加入25μL终止液(20mM Hepes pH 7.4,20mM EDTA,和20mM EGTA)终止反应。磷酸化的(Thr-389) His6-S6K的DELFIA检测在室温下使用单克隆抗P(T389)-p70S6K抗体进行,抗体使用铕-N1-ITC (Eu) (每种抗体10.4 Eu)标记。45μL终止的激酶反应混合物转移到含55μL PBS的MaxiSorp板上。His6-S6K粘附2小时后,吸除每孔,使用PBS冲洗。加入含40ng/mL Eu-P(T389)-S6K抗体的100μL DELFIA buffer。轻轻搅拌,再使抗体结合持续进行1小时。吸除每孔,然后使用含0.05% Tween-20(PBST)的PBS冲洗4次。每孔加入100μL of DELFIA增强溶液,然后在PerkinElmer Victor模板酶标仪上读数。 |
细胞实验: |
|
细胞系 |
A549,H157,H460,H446,HCT116,HT29,SW480,DLD1,Caco2,LNCap,DU145, MDA468,MDA231,HEK293,和PC3-MM2 |
浓度 |
溶于DMSO,终浓度为~20μM |
处理时间 |
72小时 |
方法 |
使用不同浓度Temsirolimus处理细胞72小时。处理后,通过MTS染料转换,使用CellTiter AQ检测试剂盒测定存活细胞密度。 |
动物实验: |
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动物模型 |
皮下注射DAOY,或U251细胞的雌性无胸腺裸鼠 |
剂量 |
20 mg/kg |
给药处理 |
每天注射,每周5次 |
本计算器可帮助您计算出特定溶液中溶质的质量、溶液浓度和体积之间的关系,公式为:
质量 (g) = 浓度 (mol/L) x 体积 (L) x 分子量 (g/mol)
摩尔浓度计算公式
用本工具协助配置特定浓度的溶液,使用的计算公式为:
开始浓度 x 开始体积 = 最终浓度 x 最终体积
稀释公式
稀释公式一般简略地表示为:C1V1 = C2V2 ( 输入 输出 )